高效液相色谱法测定加味青娥丸中补骨脂素、异补骨脂素的含量

目的：测定加味青娥丸中补骨脂素、异补骨脂素的含量。方法：色谱柱：Zorbax C18(4.6mm×150mm,5μm),流动相：乙腈-水（30∶70）,流速：1.0mL·min-1,检测波长：246nm。结果：补骨脂素、异补骨脂素分别在0.0258-0.2580μg、0.0240-0.2400μg 范围内线性良好（r=0.9999,n=6）,回收率分别为100.56%、100.74%,RSD 分别为0.75%和1.00%（n=6）。结论：该方法简便、快速、灵敏、准确,可作为加味青娥丸中补骨脂的含量测定方法。     

高速逆流色谱法对补骨脂中补骨脂素和异补骨脂素的分离纯化研究

补骨脂素和异补骨脂素是中药补骨脂的特征成分,含量较高且具有多种生物活性,目前已成为补骨脂及其产品的质量控制成分。本文以补骨脂干燥成熟果实为原料,经乙醇回流制备补骨脂粗提物,率先采用高速逆流色谱技术进行分离,所得样品由高效液相色谱检测纯度,并由对照品确定成分。实验结果表明：采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（7：3：5：5）作为两相溶剂体系,经一步逆流分离可以从补骨脂粗提物中分离得到补骨脂素和异补骨脂素,二者纯度分别达到99．4％、99．1％。该法具有制备量大、分离效率高等优点。     

Anti-Postmenopausal osteoporosis effects of Isopsoralen: A bioinformatics-integrated experimental study

Isopsoralen (IPRN), which comes from the fruit of Psoralea corylifolia, has been identified as a kind of phytoestrogen and has been proven to be effective for the treatment of osteoporosis (OP). However, the mechanisms underlying IPRN's anti-OP effects, especially the anti-postmenopausal osteoporosis (PMOP) effects, remain indistinct. Thus, this study aimed to investigate the effects and mechanisms of IPRN's anti-PMOP activity. In this study, the bioinformatics results predicted that IPRN could resist PMOP by targeting EGFR, AKT1, SRC, CCND1, ESR1 (ER-α), AR, PGR, BRCA1, PTGS2, and IGF1R. An ovariectomized (OVX) mice model and a H₂O₂-induced bone marrow mesenchyml stem cells (BMSCs) model confirmed that IPRN could inhibit the bone loss induced by OVX in mice and promote the osteogenic differentiation in H₂O₂-induced BMSCs by inhibiting oxidative stress and apoptosis. Moreover, IPRN could significantly produce the above effects by upregulating ESR1. IPRN might be a therapeutic agent for PMOP by acting as an estrogen replacement agent and a natural antioxidant.     

异补骨脂素促进小鼠胫骨骨折愈合的研究

目的:探讨灌服不同剂量异补骨脂素(isopsoralen,ISO)对小鼠骨折及血管愈合的影响。方法:选取2月龄体质量为(20±2)g的雄性C57BL/6小鼠60只,采用随机数字表法分为4组:模型组(Model)、低剂量组(isopsoralen-low dose,ISO-L)、中剂量组(isopsoralen-medium dose,ISO-M)和高剂量组(isopsoralen-high dose,ISO-H),每组15只。建立右侧胫骨骨折模型。术后采用灌胃给药,ISO-L组、ISO-M组和ISO-H组分别灌服ISO的浓度为10、20和40 mg·kg^-1,Model组灌服等体积生理盐水,每日1次,连续给药28 d。每周称量体重1次。分别于第7、14、21、28天行X线检查,并采用改良后I.R. Garrett评分对骨痂生长情况进行评价。至28 d后取材,剥离主要脏器称重并计算脏器系数,进行脏器苏木素伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)观察病理结构变化。采用微计算机断层扫描技术(Micro-CT)扫描骨折区域并进行三维重建得出效果图,量化骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV)。将脱钙后的胫骨进行石蜡包埋并切片,通过HE染色和番红固绿染色观察骨折断端愈合及塑形情况。通过血管灌注Microfil造影剂后取出右侧胫骨并脱钙,使用Micro-CT扫描骨折区域骨痂微血管,比较血管体积分数及血管直径。结果:给药28 d后,各组小鼠体质量及器官系数比较,差异无统计学意义 (P＞0.05),脏器HE染色未发现明显病理学改变。X线片和改良后I.R. Garrett评分结果显示,ISO-M组28 d评分高于Model组(P＜0.05);ISO-H组第14、21、28 天评分均高于其他3组(P＜0.05)。Micro-CT结果显示,ISO-M组腔内骨痂明显减少,低于Model组(P＜0.05);ISO-H组骨痂大部分消退,BV/TV均低于其他3组(P＜0.05)。HE染色及番红固绿染色结果显示ISO-H组骨折区域断端闭合,已出现连续板层骨,骨折愈合进程超过其他组。血管造影结果显示,ISO-H组和ISO-M组血管体积分数高于Model组和ISO-L组(P＜0.05),ISO-H组和ISO-M组血管直径高于Model组和ISO-L组(P＜0.05)。结论:ISO在10~40 mg·kg^-1浓度范围内无明显毒副作用,可以改善骨微结构,促进骨痂微血管的生成,呈浓度依赖性加速小鼠骨折断端的愈合。