全身照射后大鼠血浆代谢特征分析

目的 探索全身照射大鼠血浆代谢物变化,为辐射生物标志物研究提供实验依据。方法 应用代谢组学方法筛选辐射差异代谢物并进行初步验证。筛选研究中,大鼠50只（发现集）,用⁶⁰Co γ射线对大鼠进行全身照射,照射剂量为0、1、2、3、5、8 Gy;验证研究中,大鼠25只（验证集）,照射剂量为0、0.5、2.5、4、6 Gy。照射后4 h采集外周血液,分离血浆进行代谢组学分析,并测定辐射差异代谢物浓度,用代谢物组合受试者工作特征曲线（ROC）对特定剂量进行分类。结果 共筛选出8个血浆辐射差异代谢物,其中4个（胞嘧啶、己酰基肉碱、十八碳二烯酰基肉碱及棕榈酰基肉碱）在受照后发生上调,变化趋势与验证集一致,区分特定剂量样本曲线下面积（AUC）>0.75。将上述4个代谢物进行组合后,区分0 Gy与>0 Gy、<2 Gy与≥2 Gy、<5 Gy与≥5 Gy样本的AUC值分别为0.96、1和0.94。结论 大鼠受到全身照射后4 h,血浆代谢物发生显著变化,共鉴定出8个辐射差异代谢物,其中胞嘧啶、己酰基肉碱、十八碳二烯酰基肉碱及棕榈酰基肉碱具有良好的稳定性,其组合具有较高的分类准确性,有可能成为特定剂量分类的辐射敏感标志物。     

生长因子受体结合蛋白-2抑制肠癌细胞HT29增殖

目的 研究Grb2 shRNA转染对肠癌细胞HT29增殖相关信号通路的影响,探讨以Grb2为肠癌治疗靶点的可行性.方法 应用shRNA慢病毒质粒系统,将Grb2 shRNA转染至293T细胞,获得5株不同序列Grb2 shRNA慢病毒颗粒,并感染肠癌HT29细胞,分别获得的5株感染Grb2 shRNA慢病毒颗粒的肠癌HT29细胞系为实验组(即感染Grb2 shRNA的细胞HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-70、HT29/shGrb2-71、HT29/shGrb2-72、HT29/shGrb2-73),以eGFP shRNA慢病毒感染肠癌HT29细胞为阴性对照组.MTT法检测细胞增殖情况,RT-PCR检测Grb2 mRNA表达,Western blot检测Grb2、P42/44 ERK、磷酸化P42/44 ERK、Akt、磷酸化Akt(P-Akt)和STAT5等信号通路分子表达的改变.结果 感染shGrb2病毒72 h,HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-73两株细胞在mRNA和蛋白水平均出现抑制现象.HT29/shGrb2-69、HT29/shGrb2-73细胞在感染后24h A值分别为0.176±0.045,0.186±0.013,感染48 h后为0.347±0.048、0.382±0.041均显著高于空白对照、阴性对照(P ＜0.001),72 h为0.934±0.038、0.983±0.205高于空白对照、阴性对照(P＜0.01);感染后72 h,phospho-P42/44 ERK、Akt、phospho-Akt明显下降,而ERK、STAT5表达不受影响.结论 在HT29细胞,Grb2 mRNA和蛋白水平上明显抑制,可诱导HT29细胞增殖和相关信号传导通路分子表达下调.     

Ras、MAPK、Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性研究

目的探讨Ras/Raf/MAPK信号通路和通路下游靶基因Cyclin D1与皮肤瘢痕癌的相关性。方法 (1)用激光扫描共聚焦显微技术对病理性瘢痕和瘢痕癌进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记;(2)提取DNA,检测病理性瘢痕和瘢痕癌组织中K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子的突变;(3)采用免疫组化SP法检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌组织中MAPK、Cyc-lin D1蛋白的表达;(4)采用原位杂交技术检测3组组织中MAPK mRNA、Cyclin D1 mRNA的表达。结果 (1)免疫荧光双标记K-ras、H-ras、N-ras在病理性瘢痕上皮中呈较弱荧光为弱阳性,在瘢痕癌组织中呈较强荧光为强阳性;(2)在病理性瘢痕和瘢痕癌中未发现K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变;(3)MAPK和Cyclin D1的蛋白及mRNA在正常皮肤表皮均呈阴性或弱阳性,在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性,在瘢痕癌组织中呈强阳性。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均光密度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01),正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)Ras、MAPK、Cyclin D1基因的高表达与瘢痕癌的发生密切相关,各种基因共同发挥了协同作用;(2)K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变与瘢痕癌的发生无相关性。     

主编点评

细胞缝隙连接(gap junction,GJ)介导的细胞间信号传导在生命活动和疾病过程中具有重要作用,是公认的一种疾病治疗新靶点。本期发表的"CX26/CX32缝隙连接蛋白的Tet-onHeLa细胞模型的建立及鉴定"一文,用可控性基因重组技术成功地建立了具有GJ功能结构的     

基于LMCD的步态信号复杂度分析

目的步态信号的研究是现今生物医学研究的重点。对不同步态信号的分析,有助于进行临床诊断和医学研究。方法采用Lopez—Mancini—CalbetDivergence（LMCD）的复杂度分析方法,对老年人、年轻人和帕金森患者各10例的步态信号分别计算复杂度,并对实验数据进行方差分析。结果3种步态信号的复杂度差异显著性,年轻人的步态信号复杂度最大,老年人次之,帕金森患者的复杂度最小。结论基于LMCD的步态信号复杂度分析可以得出人的步态信号随机性的强弱。     

基于虚拟仪器的人体生理信号发生器的研制

目的:基于虚拟仪器技术构建人体生理信号发生器。方法:利用MIT-BIH等标准数据库中大量免费的人体生理数据,通过NI公司的PCI数据采集卡(可实现模-数/数-模转换,本研究利用其数-模转换功能),利用LabVIEW编程实现模拟信号输出。采用NI-PCI 6221 DAQ卡,插入电脑PCI插槽构成系统硬件。系统软件先读入头文件,根据头文件各个字段设置相应变量,然后读入数据文件,根据文件格式进行解码,计算出相应数值发送给DAQ卡,输出模拟信号。DAQ卡的配置可通过LabVIEW自带的DAQ Assistant助手。结果:可准确输出心电、脑电、肌电、体温、呼吸、血压等多种人体生理信号,信号的幅值等参数可调。结论:利用虚拟仪器技术可简单灵活地输出多种人体生理参数,与其他只能重复输出相同波形且价格昂贵的模拟仪比,本研究的人体生理信号发生器具有很高的性价比。     

超声检测甲状腺结节钙化及血流异常对其良恶性的诊断价值

目的探讨超声检测甲状腺结节钙化及血流异常对其良恶性的诊断价值。方法回顾分析168例甲状腺结节患者的超声表现,分析甲状腺结节钙化的检出情况及血流异常情况,以便分析砂砾钙化及血流异常与甲状腺癌发生的关系。结果本组168例患者共发现甲状腺结节208个,其中甲状腺癌36例,36个结节,甲状腺良性结节172个。甲状腺癌结节钙化及砂砾样钙化的发生率高于良性结节（63.8%VS.19.2%,50.8%VS.8.2%）,两者比较差异有统计学意义（P<0.01）;良恶性结节血流组间分别在“0”和“+++”级有显著差异（P<0.05）,而在“+”、“++”级间无显著差异（P>0.05）,良恶性结节间的 Vmax和RI比较差异有统计学意义（P<0.05）。钙化诊断甲状腺癌的敏感性为63.8%,特异性为81.4%;砂砾样钙化诊断甲状腺癌的敏感性为50.8%,特异性为93.1%。结论砂砾样钙化及高速高阻丰富血流信号对超声判断甲状腺结节的良恶性有较好的临床价值,也可作为甲状腺癌预后不良的指针之一。     

DZIP1通过影响Wnt/β-catenin信号通路促进口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭

目的　探究DZIP1通过Wnt/β-catenin信号通路对口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭的影响。方法　实时荧光定量PCR和Western blot检测DZIP1和Wnt/β-catenin信号通路相关基因mRNA表达和蛋白表达,CCK-8检测细胞活力,克隆形成实验检测口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果　与人口腔角质形成细胞相比,人OSCC细胞系TSCCA,Tca8113和SCC25中DZIP1的mRNA表达和蛋白表达均显著升高;与阴性对照组（negative control,NC）相比,敲低DZIP1显著降低SCC25细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的mRNA表达和蛋白表达（P<0.05）,显著降低细胞活力（P<0.05）,显著抑制细胞增殖（P<0.05）,显著降低细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）,LiCl显著升高SCC25细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的mRNA表达和蛋白表达（P<0.05）,显著升高细胞活力（P<0.05）,显著促进细胞增殖（P<0.05）,显著升高细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）;与si-DZIP1组相比,si-DZIP1+LiCl显著升高SCC25细胞Wnt/β-catenin信号通路相关基因的mRNA表达和蛋白表达（P<0.05）,显著升高细胞活力（P<0.05）,显著促进细胞增殖（P<0.05）,显著升高细胞迁移和侵袭能力（P<0.05）。结论　DZIP1通过影响Wnt/β-catenin信号通路促进口腔鳞状细胞癌增殖、迁移和侵袭。     

种植体掺离子表面改性技术及其促进骨结合的研究进展

种植牙因其在解决牙列缺损方面巨大的优势,已成为许多缺牙患者首选的治疗方式。在临床应用中,如何促进种植体与骨组织界面的骨结合是种植治疗成功的关键,因此种植体表面改性一直是研究的热点。骨组织中含有钙、磷、锌、镁、锶等大量微量元素,这些微量元素对于骨组织的生长发育必不可少。因此可以通过将微量元素掺入种植体表面来促进种植体骨结合。本文着重介绍了种植体表面改性的相关技术以及微量元素促进骨结合的具体机制。     

经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化

牙周炎是口腔最常见的疾病之一,累及牙周支持组织,随着疾病的进展将引起附着丧失、牙周袋形成、牙槽骨吸收,最终导致牙齿松动脱落。因被牙周炎破坏吸收的牙槽骨自愈能力十分有限,所以牙周炎的治疗目标是在彻底清除菌斑生物膜的基础上,争取获得较多的牙周组织再生。牙周膜干细胞作为最适宜进行牙周组织再生的细胞,被广泛研究。Wnt信号通路分为经典Wnt通路和非经典Wnt信号通路,为十分复杂而高度保守的通路传导途径。该通路与牙周膜干细胞成骨分化的关系十分密切,牙周膜干细胞的成骨分化又对牙周组织再生有重要意义。该文对经典Wnt信号通路与牙周膜干细胞成骨分化的研究概况作一综述。