微波消解ICP-MS法测定海藻羊栖菜中多种有害元素

目的对海藻羊栖菜中的砷、镉、汞、铅、钴、镍、钒等多种有害元素进行分析。方法使用微波消解ICP-MS法同时检测上述多种有害元素,并对所建立的方法进行了方法学验证。结果结果表明羊栖菜中砷和镍的污染程度较高,同时探讨了有害成分的限量标准。结论该方法为海藻羊栖菜的风险监控提供了技术参数。     

气相色谱-串联质谱法测定海藻羊栖菜中的19种有机氯农残

摘 要 目的：建立海藻羊栖菜中19种有机氯农药残留分析的气相 质谱联用方法。方法: 使用GC MS法同时检测19种农药残留,色谱系统采用HP 5MS毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm,0.25 μm）;柱温为程序升温,初始温度70℃,保持1 min,以15℃·min^-1 升温至180℃,再4℃·min^-1 升温至280℃,保持7 min;进样口温度240℃;采用质谱检测器,电子轰击源EI,离子源温度230℃,采用多反应监测模式。结果: 采用所建立的方法对海藻羊栖菜进行检测,对照品与供试品中相邻色谱峰分离情况均良好,除六氯苯外,其他有机氯农残加样回收率均在72%～127%之间,RSD也满足要求。未检出羊栖菜样品中含有有机氯农药残留。结论: 方法的建立为海藻类样品有机氯农药残留检测提供了参考。     

海藻玉壶汤中海藻不同品种与甘草加减应用对甲状腺肿大大鼠氧化应激及肝脏Nrf2/HO-1通路的影响

目的探讨海藻玉壶汤中海藻不同品种与甘草加减应用对甲状腺肿大大鼠氧化应激及肝脏核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路的影响。方法随机分为空白组、模型组、阳性药优甲乐组(优甲乐组)、含羊栖菜的海藻玉壶汤全方组(羊栖菜全方组)、含海蒿子的海藻玉壶汤全方组(海蒿子全方组)、含羊栖菜的海藻玉壶汤去甘草组(羊栖菜去甘草组)、含海蒿子的海藻玉壶汤去甘草组(海蒿子去甘草组)、海藻玉壶汤去海藻组(全方去海藻组)、海藻玉壶汤去海藻甘草组(全方去海藻甘草组)。除空白组外其余各组均灌服丙硫氧嘧啶(PTU)复制甲状腺肿大模型,以优甲乐作为阳性对照药。检测各组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H_2O_2)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,测定肝组织Nrf2 mRNA及HO-1 mRNA的表达。结果与空白组比较,模型组血清MDA升高、Nrf2 mRNA表达降低(P0.01),海蒿子去甘草组血清ALT、肝组织HO-1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),海蒿子全方组血清MDA、肝组织HO-1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),羊栖菜去甘草组及羊栖菜全方组血清ALT、AST、MDA、H_2O_2升高,GSH-Px、Nrf2 mRNA表达降低(P0.05,P0.01);与海蒿子去甘草组比较,羊栖菜全方组血清AST升高、肝组织HO-1 mRNA表达降低(P0.05,P0.01),羊栖菜去甘草组血清H_2O_2升高、HO-1 mRNA表达降低(P0.05,P0.01);与海蒿子全方组比较,羊栖菜去甘草组血清ALT、AST、H_2O_2升高,HO-1 mRNA表达降低(P0.05,P0.01),羊栖菜全方组血清AST升高、HO-1 mRNA表达降低(P0.01)。结论不同品种海藻(海蒿子/羊栖菜)与甘草在海藻玉壶汤中加减应用,海蒿子全方组及海蒿子去甘草组在一定程度上可以保护肝脏组织免受过氧化物的损害,其机制可能与激活Nrf2/HO-1通路提高肝细胞抗氧化能力有关;而羊栖菜全方组及羊栖菜去甘草组肝功能受到一定影响,可能与氧化抗氧化系统平衡紊乱,Nrf2/HO-1通路激活障碍有关。     

羊栖菜多糖通过调控miR-29b-5p/AQP9表达对过氧化氢诱导的星形胶质细胞氧化损伤的影响及机制

目的探讨羊栖菜多糖(SFPS)对过氧化氢(H₂O₂)引起星形胶质细胞氧化损伤的影响及作用机制。方法用200μmol/L H₂O₂处理细胞24 h作为H₂O₂组,以正常培养细胞作为对照(Con)组;分别用15 mg/L、30 mg/L、60 mg/L的SFPS培养液预处理24 h后用200μmol/L H₂O₂诱导处理24 h,分别记为H₂O₂+SFPS-L组、H₂O₂+SFPS-M组、H₂O₂+SFPS-H组。将miR-NC、miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用200μmol/L H₂O₂再诱导处理24 h,记为H₂O₂+miR-NC组、H₂O₂+miR-29b-5p组;将anti-miR-NC、anti-miR-29b-5p转染至星形胶质细胞后用60 mg/L的SFPS培养液处理24 h后再用200μmol/L H₂O₂诱导处理24 h,分别记为H₂O₂+SFPS+anti-miR-NC组、H₂O₂+SFPS+anti-miR-29b-5p组。丙二醛(MDA)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测MDA含量、SOD、GSH-Px活性;Western印迹检测水通道蛋白(AQP)9水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29b-5p和AQP9 mRNA表达水平;荧光素酶报告实验检测miR-29b-5p和AQP9的靶向关系。结果与Con组相比,H₂O₂组星形胶质细胞中MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低(均P<0.05);与H₂O₂组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中MDA含量逐渐降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,呈浓度依赖性(均P<0.05)。与Con组相比,H₂O₂组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著降低,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05);与H₂O₂组相比,不同浓度SFPS组星形胶质细胞中Bcl-2表达水平显著升高,Bax、酶切caspase-3表达水平及细胞凋亡率均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05),与Con组相比,H₂O₂组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著降低,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05);与H₂O₂组相比,不同浓度SFPS糖组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9 mRNA和蛋白表达水平均显著降低,且均呈浓度依赖性(均P<0.05)。miR-29b-5p组荧光素酶活性显著低于miR-NC组(P<0.05)。相较于miR-NC组AQP9蛋白表达水平,miR-29b-5p组显著降低;相较于anti-miR-NC组AQP9蛋白表达水平,anti-miR-29b-5p组显著升高(均P<0.05)。与H₂O₂+miR-NC组相比,H₂O₂+miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p表达水平显著升高,AQP9表达水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平和细胞凋亡率显著降低(均P<0.05),与H₂O₂组相比,H₂O₂+SFPS组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著升高,AQP9水平显著降低,MDA水平显著降低,SOD、GSH-Px活性显著升高,Bcl-2水平显著升高,Bax水平及细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与H₂O₂+SFPS+anti-miR-NC组相比,H₂O₂+SFPS+anti-miR-29b-5p组星形胶质细胞中miR-29b-5p水平显著降低,AQP9水平显著升高,MDA水平显著升高,SOD、GSH-Px活性显著降低,Bcl-2水平显著降低,Bax水平及细胞凋亡率显著升高(均P<0.05)。结论SFPS可抑制H₂O₂诱导的星形胶质细胞氧化应激和凋亡,保护H₂O₂引起的星形胶质细胞氧化损伤,其机制可能与miR-29b-5p和AQP9有关。     

羊栖菜多糖对氧化应激人成纤维细胞的保护作用

目的研究羊栖菜多糖对氧化应激的人皮肤成纤维细胞的保护作用及机制。方法以0.8 mmol/L H2O2诱导人皮肤成纤维细胞建立氧化应激模型,MTT法测定不同浓度羊栖菜多糖(15、30、60mg/L)对过氧化氢(H2O2)损伤人皮肤成纤维细胞增殖的影响,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,流式细胞仪测定细胞周期分布。测定细胞丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、还原性谷胱甘肽(GSH)水平和活性氧(ROS)水平。结果羊栖菜多糖可抑制H2O2对人皮肤成纤维细胞增殖活性的下降和凋亡率的上升,维持细胞正常形态。流式细胞仪检测表明,羊栖菜多糖能显著降低H2O2损伤的细胞G0/G1期阻滞现象;升高SOD和GSH-Px活力,降低MDA和ROS水平,升高GSH水平,差异有统计学意义且具有剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论羊栖菜多糖能减轻H2O2对人皮肤成纤维细胞的氧化损伤,具有较好的抗氧化保护作用,与其增强抗氧化酶活性,降低脂质过氧化有关。     

羊栖菜活性成分和药理作用研究进展

目的:了解并明确羊栖菜的化学成分和具有的生物活性.方法:查阅相关文献资料进行归纳总结.结果:羊栖菜含有多种微量元素、氨基酸、多糖等,在抗肿瘤、影响免疫功能、降糖、降脂等方面有显著的药理作用.结论:羊栖菜的开发具有广阔的应用前景.     

羊栖菜多糖体外诱导人大肠癌细胞凋亡

目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人大肠癌lovo细胞和RKO细胞增殖的作用及其意义。方法MTT法检测SFPS在体外抑制大肠癌细胞增殖的抑制率;扫描电镜、透射电镜和流式细胞术鉴定细胞凋亡。结果SFPS对lovo细胞和RKO细胞具有显著的生长抑制作用,并在一定范围内呈量效关系。电镜下可见细胞膜表面微绒毛减少、染色质固缩、边集,凋亡小体形成。流式细胞术结果显示,G0/G1期的细胞比例有不同程度的增高,相应的S期细胞比例显著下降(P<0.01);而lovo细胞的细胞周期时相比例无明显改变。结论SFPS在体外能够显著诱导lovo和RKO细胞凋亡,这可能是SFPS抑制人大肠癌细胞增殖的机制之一。     

羊栖菜化学成分及药理活性研究进展

羊栖菜Sargassum fusiforme是一种生长在太平洋西北部的暖温带至亚热带性藻类植物,用于消痰软坚散结、利水消肿。因其具有多样的药用价值和丰富的营养价值而广受关注,长期研究证据表明羊栖菜在抗阿尔茨海默病、抗抑郁、抗氧化、抗衰老、降血糖、调节肠道菌群、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎、抗凝血等方面均表现出显著的药理活性。对羊栖菜化学成分及其药理作用的前沿研究进行综述,为羊栖菜药理活性物质的合理开发与综合利用提供参考。     

羊栖菜多糖提取工艺及其单糖组成研究

采用正交试验结合方差分析，研究羊栖菜多糖(Sargassum fusiforme polysaccharides,SFPS)的最佳提取工艺；采用GC-MS分析该多糖的单糖组成。结果表明，羊栖菜多糖最佳提取工艺条件为：温度80℃，加水量50倍，pH值5，提取时间5h，按此工艺提取羊栖菜多糖产率高并且不影响其生物活性；该多糖主要由L-山梨糖、D-木糖、D-艾杜糖、D-甘露糖及D-半乳糖5种单糖组成，摩尔比为5．13：2．15：1．99:1:4．35。     

羊栖菜多糖对血管内皮细胞氧化损伤的保护和修复作用的实验研究

目的 研究羊栖菜多糖(SFPS)对过氧化氢所致人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护及修复作用.方法 噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、NO水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性及细胞内丙二醛(MDA)含量.结果 羊栖菜多糖可剂量依赖性地抑制过氧化氢所致的细胞活力降低,阻止LDH外漏,增加NO释放,并减少MDA生成,提高SOD活性.结论 羊栖菜多糖对过氧化氢所致HUVEC损伤具有明显的保护及修复作用.