门氏护胃方中连翘与其他药材配伍煎煮前后连翘酯苷A和连翘苷提取率变化的研究

目的:考察门氏护胃方中连翘单药及与其他药材配伍煎煮前后连翘酯苷A和连翘苷提取率的变化。方法:采用高效液相色谱法测定连翘单味药材(5 g×7付)、连翘(5 g×7付)与姜半夏配伍、门氏护胃方[包括连翘(5 g×7付)、姜半夏等6味药材]经水煎煮后药液中连翘酯苷A和连翘苷的提取量并计算提取率。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,检测波长为278 nm,柱温为30℃,流速为1.0 m L/min。结果:连翘酯苷A与连翘苷进样量线性范围分别为0.61～6.1、0.246～2.46μg(r=0.999 7、0.999 9),在精密度、稳定性(20 h内)和重复性试验中RSD均<2%(n=6),平均回收率为96.10%～99.37%(RSD≤2.36%,n=6);在连翘单味药材中,连翘酯苷A和连翘苷的提取率分别为96.90%、66.67%;在连翘-姜半夏配伍样品水煎液中,二者的提取率分别为101.61%、54.55%;在门氏护胃方样品水煎液中,二者的提取率分别为98.39%、84.85%。结论:连翘与姜半夏配伍后连翘酯苷A的提取率增加、连翘苷的提取率略有减少;连翘与门氏护胃方中其他药材配伍后,二者的提取率均略有增加。     

多指标正交实验法优选当归止痒口服液的提取工艺

目的优选当归止痒口服液的提取工艺。方法以芍药苷转移率、阿魏酸转移率和干浸膏得率为指标,采用正交实验法考察料液比、提取时间和提取次数对当归止痒口服液提取工艺的影响,得出当归止痒口服液的最佳提取工艺。采用HPLC法测定芍药苷和阿魏酸的含量。结果最佳提取工艺为:加12倍量水,回流提取3次,每次1h。结论优选的提取工艺稳定,具有良好的重复性和可操作性,可为工业化生产提供科学依据。     

雷公藤多苷联合来氟米特治疗老年活动性类风湿性关节炎的效果观察

目的观察雷公藤多苷联合来氟米特治疗老年活动性类风湿性关节炎(EORA)的临床效果。方法选取2017年1月-2018年6月桂林市第二人民医院收治的EORA患者78例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组39例。对照组单独应用来氟米特治疗,观察组给予雷公藤多苷联合来氟米特治疗。比较2组临床疗效、临床指标变化情况。结果观察组治疗总有效率为100.00%,高于对照组的87.18%(P<0.05);治疗后,观察组类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白水平(CRP)、关节压痛指数、肿胀关节数均优于治疗前,且观察组优于对照组(P<0.01)。结论雷公藤多苷联合来氟米特治疗EORA的效果较好,有助于改善患者临床症状,值得临床推广应用。     

脑苷肌肽联合法舒地尔对急性脑梗死患者脑动脉血流参数的影响

目的探讨脑苷肌肽联合法舒地尔对急性脑梗死患者脑动脉血流参数的影响。方法选取收治的120例急性脑梗死患者为研究对象,随机分为对照组和观察组各60例,对照组单用法舒地尔静脉滴注治疗,观察组采用脑苷肌肽联合法舒地尔静脉滴注治疗,对比两组临床疗效与动脉血流参数指标,并记录两组不良反应情况。结果观察组总有效率明显高于对照组,观察组全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度等脑动脉血流指标均低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);两组不良发生发生率对比,差异无统计学意义(P0.05)。结论脑苷肌肽联合法舒地尔治疗急性脑梗死,可改善脑动脉血流,无严重不良反应,临床应用安全高效,有利于促进患者康复。     

健脾益肾丸指标成分的含量测定及其对CRF模型大鼠钙磷代谢和炎症因子的影响

目的:建立健脾益肾丸(JYP)中黄芪甲苷、大黄素、大黄酚的含量测定方法,并探讨JYP对慢性肾衰竭(CRF)模型大鼠钙磷代谢和炎症因子等相关指标的影响。方法:采用高效液相色谱法进行含量测定。黄芪甲苷以及大黄素、大黄酚的色谱柱分别为Agilent Zorbax SB-C18、Agilent TC C18,流动相分别为乙腈-水(36∶64,V/V)、甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25,V/V),检测器分别为蒸发光散射检测器和二极管阵列检测器(后者检测波长为254 nm),柱温分别为30、25℃,流速均为1.0 m L/min,进样量分别为20、10μL。将SD大鼠随机分为正常组、模型组、尿毒清组(1.80 g/kg)和JYP低、中、高剂量组(1.71、3.43、6.85 g/kg),每组10只。除正常组外,其余组大鼠均采用5/6肾切除方法复制CRF模型。造模4个月后,正常组和模型组大鼠均灌胃相应体积水,各给药组大鼠灌胃相应药物,每日1次,连续12周。采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、甲状旁腺激素(PTH)和炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]含量,采用甲基百里香酚蓝比色法和磷钼酸法检测其血钙、血磷含量,采用Pearson检验考察炎症因子与钙磷代谢相关指标(血钙、血磷、PTH)的相关性。结果:黄芪甲苷、大黄素、大黄酚检测质量浓度的线性范围分别为54.537～381.759、2.960～20.720、6.318～44.223μg/m L(r>0.999),定量限分别为0.010、0.288、0.216μg/mL,检测限分别为0.003、0.096、0.072μg/mL,精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于3.0%,加样回收率为97.18%～102.33%(RSD<3%,n=9)。造模后(给药前),模型组和各给药组大鼠血清Scr、BUN含量均较正常组显著升高(P<0.01);给药后,各给药组大鼠上述指标均较模型组和同组给药前显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠血钙含量显著降低,IL-6、TNF-α含量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,JYP中、高剂量组大鼠血钙含量均显著升高,尿毒清组PTH含量,JYP中、高剂量组PTH、IL-6含量以及各给药组TNF-α含量均显著降低(P<0.05或P<0.01);但JYP对大鼠血磷含量无显著影响,且其血清炎症因子与钙磷代谢相关指标均无显著相关性(P>0.05)。结论:本含量测定方法简便、专属性强、灵敏度高,可用于JYP中黄芪甲苷、大黄素、大黄酚的含量测定。JYP可改善CRF模型大鼠的肾功能,缓解其钙代谢紊乱,并抑制其炎症因子的表达。     

Fas/FasL、p38 MAPK通路在溃疡性结肠炎大鼠中的表达及雷公藤多苷的作用

目的探讨Fas/FasL及p38 MAPK信号通路在溃疡性结肠炎(UC)大鼠中的表达变化,以及雷公藤多苷(TWP)对其的影响。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇灌肠法建立UC大鼠模型。对大鼠结肠炎症进行评分;以表达谱技术分析Fas/FasL的差异表达,并用real-time PCR技术进行验证;继而DAVID数据库信号通路分析显示,Fas/FasL调节UC的炎症活动涉及p38 MAPK信号通路,同时在表达谱中分析此信号通路中的相关分子,并以real-time PCR法加以验证;最后采用RT-PCR法及Western blot法检测该信号通路末端炎症因子的表达。结果 UC大鼠结肠炎症评分明显升高,TWP能明显降低其炎症评分; Fas/Fas L系统及p38 MAPK通路中的Fas L、MAPK14(p38α)、TNF-α、IL-1β在UC大鼠炎症活动时均呈上调表达,TWP能够明显下调上述指标的表达。结论 TWP能够通过Fas/Fas L系统及p38MAPK信号通路对UC炎症活动进行调控。     

基于不同Caspase凋亡通路的玄参环烯醚萜总苷抑制心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡的作用机制研究

目的:研究玄参环烯醚萜总苷抑制心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡的作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和玄参环烯醚萜总苷低、中、高剂量给药组,每组10只。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立心肌梗死模型,假手术组只穿线不结扎。各剂量药物组大鼠在造模成功后分别灌胃玄参环烯醚萜总苷混悬液,每次剂量为50、100、200 mg/kg(以总苷提取物质量计),灌胃体积为10 m L/次,每天2次,连续给药7 d;假手术组和模型组大鼠同法灌胃等体积生理盐水。记录大鼠术前、术后及给药7 d过程中的Ⅱ导联心电图S-T段变化情况;检查大鼠心功能指标;采用比色法、免疫抑制法或酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(c TnⅠ)、N末端钠尿肽原(NT-pro BNP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用TUNEL法观察心肌细胞凋亡情况;采用比色法检测心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量;采用ELISA法、酶解比色法或酶解荧光法检测心肌细胞中Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶8(Caspase-8)、Caspase-9、Caspase-12、Caspase-3、Calpain的蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心电图S-T段显著抬高,左室舒张末期内径、左室收缩末期内径均显著增加,左室射血分数、短轴缩短率均显著降低;血清中LDH、CK-MB、cTnⅠ、NT-pro BNP、TNF-α水平均显著升高;心肌组织中有大量黄褐色凋亡细胞;心肌组织中SOD活性显著降低,MDA含量显著升高;心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值均显著降低,Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12、Calpain的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各剂量药物组大鼠的上述指标及心肌组织病理学变化均有显著改善;心肌细胞中Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax比值均显著升高,Bax、Cyt C、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12、Calpain的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:玄参环烯醚萜苷可同时通过抑制Caspase-8、Caspase-9、Caspase-12相关的3条凋亡通路,继而抑制Caspase-3的激活,从而起到抗心肌细胞凋亡作用。