HPLC-MS/MS法分析桑叶总生物碱成分及总生物碱含量

目的:利用HPLC-MS/MS法,对桑叶总生物碱部位中的各生物碱成分进行分析和鉴别,并采用柱前衍生化HPLC-UV法测定生物碱部位中总生物碱的含量。方法:采用HiQSiL C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5 μm),以9-氯甲酸芴甲酯(FMOC-Cl)为柱前衍生化试剂,流动相为乙腈-0.1%醋酸(50:50,V/V),流速0.8 mL.min_-1,检测波长为254 nm;电喷雾离子源(ESI);正离子检测模式;以1-脱氧野尻霉素(DNJ)为对照,外标法计算桑叶总生物碱含量。结果:鉴定了6个生物碱类成分分别为DNJ,fagomine,3-epi-fagomine,DAB,Calystegine B₂和2-O-β-Glc-DAB;测定3批供试品中总生物碱含量均达到75%以上。结论:本法简便、准确、灵敏,可用于桑叶总生物碱及其制剂的定性定量分析。     

桑叶提取物在大鼠体内的代谢产物含量测定及其药动学研究

目的:建立大鼠血浆中槲皮素、山萘酚及异鼠李素总浓度的高效液相色谱法,并计算大鼠口服桑叶提取物(Folium Mori extract,FME)后血浆中主要代谢产物-槲皮素、山萘酚及异鼠李素的药动学参数.方法:大鼠口服110 mg/kg桑叶提取物后,取其血浆并用3 moL/L盐酸水解,水解液经乙醚-丙酮混合液萃取,用HPLC法测定血浆中槲皮素、山萘酚及异鼠李素总浓度,以DAS 3.0软件计算药动学参数.结果:槲皮素、山萘酚和异鼠李素分别在0.0545 ～ 8.70,0.0954 ～ 14.7和0.0545 ～ 8.55μg/ml内呈良好线性关系,r分别为0.9979、0.9993、0.9981;三者的绝对回收率分别在85.3% ～86.1%、79.4%～86.7%、62.8% ～ 89.7%内,方法回收率均在94.7% ～ 107%内.日内及日间精密度RSD分别小于9.5%及9.8%.以药动学软件计算的药动学统计矩参数T1/2:分别为92.7,67.9和54.2 h;Tmax分别为0.400、0.400和3.87 h;AUC (0-∞)分别为68.0、67.5和32.8 mg·h-1·L-1;MRT(0-∞)分别为128、85.2和72.0 h.结论:本法准确可靠,操作简便,重复性好,可用于同时测定桑叶提取物在大鼠体内的主要代谢产物-槲皮素、山萘酚及异鼠李素的总浓度;同时,药动学研究显示,三者在大鼠体内分布迅速,滞留久长.     

桑叶黄酮对胰岛素抵抗大鼠氧化应激影响

目的 观察桑叶黄酮对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠氧化应激作用,并探讨其改善胰岛素抵抗的分子机制.方法高脂饮食饲养成年雄性SD大鼠8周诱导大鼠胰岛素抵抗模型,随机分为糖尿病模型组(MOD组)和桑叶黄酮治疗组(MLF组),对照组为正常SD大鼠(NOR组);测量各组大鼠空腹血糖(FPG)、胰岛素(FINS)及血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(IRI).结果 与NOR组比较,MOD组MDA升高,为(8.73±0.85) nmol/L,SOD、GSH-Px活性均降低,分别为(226.45±17.54)、(529.03±69.56)U/mL;与MOD组比较,MLF组能降低病鼠FINS和IRI,分别为(25.83±2.1) mU/L和(8.86±0.96),提高ISI,为(5.08±0.09),降低FPG和MDA含量,分别为(7.95±1.85) mmol/L和(6.82±0.79) nmol/mL,增强SOD活性,为(297.85±22.16) U/mL.结论桑叶黄酮能改善2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠高胰岛素血症,降低血糖,提高胰岛素敏感性,降低氧化应激水平,具有抗氧化能力.     

桑抹茶对THP-1源性泡沫细胞脂质沉积的作用研究

目的 明确桑抹茶对THP-1泡沫细胞脂质沉积的改善作用。方法 实验分为正常对照组：佛波酯诱导的THP-1源性巨噬细胞,模型对照组：佛波酯+Ox-LDL诱导的THP-1源性泡沫细胞,药物干预组：THP-1源性泡沫细胞+不同浓度（10、20、40、80、160、320、640 μg/ml）桑抹茶提取物,同时设RPMI 1640培养基为空白对照。MTT法检测各组细胞活力;油红O染色观察细胞内脂质沉积;荧光显微镜观察THP-1巨噬细胞内吞Dil-Ox-LDL情况;Western blotting检测各组细胞介导细胞内胆固醇流出蛋白ABCA1及PPARγ蛋白表达水平。结果 桑抹茶提取物能浓度依赖地抑制THP-1源性泡沫细胞对Ox-LDL的摄取,减少THP-1泡沫细胞内脂质沉积;与对照组比较,模型组泡沫细胞内脂质水平显著升高[(0.974±0.033)比(0.794±0.030),P<0.01],ABCA1蛋白表达量增加[(0.702±0.005)比(0.575±0.014),P<0.01],PPARγ表达量降低[(0.099±0.004)比(0.875±0.019),P<0.01]。与模型组比较,93、186、372 μg/mL桑抹茶提取物能显著降低泡沫细胞内脂质水平[(0.876±0.032)、(0.835±0.019)、(0.815±0.028)比(0.974±0.033),P<0.01],增加PPARγ蛋白表达量[(0.270±0.006)、(0.328±0.014)、(0.706±0.020)比(0.099±0.004),P<0.01],93、372 μg/mL桑抹茶能提高ABCA1蛋白表达量[(0.823±0.041)、(1.411±0.048)比(0.702±0.005),P<0.01]。结论 桑抹茶可能通过减少Ox-LDL摄取,促进细胞内胆固醇流出,减少细胞内脂质沉积。     

中药桑叶药理作用的研究进展

传统中医药对桑白皮叶子的广泛使用有着悠久的历史。桑叶提取物具有显著的药理作用,包括降血糖、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗氧化、抗炎、延缓衰老、抗肿瘤和免疫调节等作用,但是,目前对桑叶提取物中具体成分的有效作用还不完全清楚,同时,这些有效成分的细胞和分子作用机制仍然需要进一步研究。该研究总结了桑叶的主要药用价值和药理作用,以期为桑叶的合理开发利用提供理论依据。     

基于UPLC-DAD指纹图谱结合化学计量学及6种成分含量测定的桑叶质量研究

[目的]建立超高效液相色谱法(UPLC)-DAD指纹图谱方法,结合化学计量学与多指标含量测定综合评价桑叶质量.[方法]采用Agilent EC-C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温35℃;检测波长分别为290 nm(检测没食子酸甲酯、隐绿原酸)和360 nm(检测芦丁、异槲皮苷、山奈酚-3-O-芸香糖...     

毛细管电泳法测定桑叶中的有效成分

目的建立测定桑叶中的有效成分槲皮素(Quercetin)、紫槲皮甙(Rutoside)、绿原酸(Chlorogenic acid)的一种简便方法.方法在熔硅毛细管(58.2 cm×75 μm i.d.,有效长度50.6 cm)柱上,以0.01 mol/L磷酸盐与0.02 mol/L硼砂混合缓冲液(pH=8.60)作电解质,电压为20 kV,温度30℃,真空进样5 s,于254 nm处紫外检测.结果分离完全的色谱峰,有良好的线性关系,R=0.998.结论方法高效、快速.     

基于α-葡萄糖苷酶抑制活性评价桑叶多组分药效相互作用研究

采用柱色谱法对桑叶提取物中黄酮、生物碱、多糖组分进行富集分离;采用葡萄糖氧化酶法,利用蔗糖为底物,以α-葡萄糖苷酶抑制模型对桑叶多组分进行评价;采用等效线法、周-特氏联合指数法和等辐射分析法评价2组分间的药效相互作用及量效特点,为揭示桑叶降血糖的作用机制提供科学依据。成分分析表明,桑叶提取物中,黄酮质量分数为5.3%,有机酚酸质量分数为10.8%,1-脱氧野尻霉素(DNJ)质量分数为39.4%,多糖质量分数为18.9%。活性评价表明,桑叶黄酮、生物碱、多糖组分均具有显著的α-葡萄糖苷酶抑制活性,其抑制率随各组分浓度的增加而升高,3个组分中桑叶生物碱抑制活性最强。桑叶生物碱与桑叶黄酮配伍、桑叶生物碱与桑叶多糖配伍均表现出协同增效作用,但多糖与黄酮组配伍未见明显的协同作用,从而证实了桑叶多组分调节血糖的相互作用,为桑叶多组分降血糖物质基础与作用机制的揭示提供了科学依据。     

桑叶提取物基于PI3K/AKT通路对2型糖尿病大鼠的作用研究

目的 分析桑叶提取物基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)通路对2型糖尿病大鼠的作用。方法 将桑叶风干后粉碎成粉末,萃取、洗涤、洗脱并室温蒸发下得到干燥提取物。选取46只SPF级SD大鼠,随机选取10只大鼠作为空白组,另外36只建立2型糖尿病模型。采用腹腔一次性注射40 mg/kg链脲佐菌素建立2型糖尿病模型。将建模成功30只大鼠按照随机数字表法分为模型组、低剂量组、高剂量组,各10只。空白组、模型组大鼠注射相同剂量的0.9%氯化钠溶液,低剂量组大鼠给予0.1 mL/100 g桑叶提取物,高剂量组大鼠给予0.4 mL/100 g桑叶提取物;空白组喂普通饲料,模型组、低剂量组、高剂量组喂高脂高糖饲料。观察大鼠一般情况和病理形态;比较大鼠的空腹血糖(FBG)、血脂[甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、胰岛素水平及HOMA-IR指数、生化指标[超氧化物岐化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛]水平,并比较PI3K、AKT mRNA表达量以及PI3K/AKT通路蛋白表达量。结果 与空白组相比,模型组、低剂量组、...     

华桑叶水溶性化学成分研究

目的:研究华桑Morus cathayana Hemsl.叶的水溶性化学成分.方法:应用离子交换树脂和Sephadex LH-20柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.结果:从华桑叶中分离得到7个化合物,分别鉴定为1-脱氧野尻霉素(1)、fagomine(2)、1,4-dideoxy-1,4-imino-D-arabinitol(3)、2-O-α-D-galactopyranosyl-1-deoxynojirimycin(4)、4-O-β-D-glucopyranosylfagomine(5)、1,4-dideoxy-1,4-imino-(2-O-β-D-glueopyranosyl)-D-arabinitol(6)、肌醇c(7).结论:以上7个化合物均为首次从该植物中分离得到.