聚合酶链反应标记轮状病毒地高辛素探针的初步应用

目的为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术标记的地高辛素（ＤＩＧ）探针的特异性和敏感性。方法用聚合酶链反应技术制备地高辛素标记的人类轮状病毒（ＨＲＶ）ｃＤＮＡ探针，经ｃＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交。结果该探针具ＨＲＶ特异性，可检出１０ｐｇ的ＲＮＡ。应用该项技术检测了１２０份婴幼儿腹泻粪样标本，其阳性率为６５％，明显高于ＰＡＧＥ方法（４９．１％）的阳性率。结论ＰＣＲ方法直接制备地高辛素标记的ｃＤＮＡ探针方便、快速、特异性好、标记率高。     

乙型肝炎病毒检测方法比较与临床意义

目的：对FQ－PCR与常规PCR和探针斑点杂交的灵敏性比较及临床应用。方法：采用FQ－PCR与常规PCR和探针斑点杂交三种方法检测HBV－DNA。结果：在156例乙型病毒性肝炎中,FQ－PCR的检出率是93．59％（146／156）,常规PCR为76．28％（119／156）,探针斑点杂交为71．80％（112／156）。FQ－PCR显高于常规PCR及探针斑点杂交,P值均＜0．05）。结论：FQ－PCR有灵敏,特异,简便的优点,它能为临床疗效观察提供直接的指标。     

IL—1βmRNA在胎儿脑及U251细胞中的表达

目的 探讨IL－1βmRNA在胎儿脑中的表达与某些疾病的关系。方法 采用杂交法检测胎儿脑中IL－1βmRNA的水平,利用Northern杂交法检测人脑胶质瘤传代细胞U251中IL－1β的表达情况。结果 显示了TPA可明显刺激U251中IL－1β的表达。结论 孕2个月胎儿脑在未加任何刺激的自然情况下即有中IL－1β的表达。     

小儿咽喉乳头状瘤组织人乳头瘤病毒检测及型别分析

目的：探讨人乳头瘤病毒感染和小儿咽喉乳头状瘤的关系。方法：应用ＰＣＲ和ＰＣＲ产物斑点杂交技术检测３５例小儿咽喉乳头瘤组织和１０例小儿声带小结（对照组）ＨＰＶ６、１１、１６、１８、３３五个型别的ＤＮＡ。结果：乳头瘤组织ＨＰＶ感染率为９１．４％（３２／３５）,其中ＨＰＶ６型检出率为５４．２％（１９／３５）,ＨＰＶ１１型感染率为２５．７％（９．３５）,多重型ＨＰＶ６＋１１感染率为１１．４％（４／３５）;     

聚合酶链反应及斑点杂交技术对外耳道尖锐湿疣的病因学研究

尖锐湿疣 (Ｃｏｎｄｙｌｏｍａａｃｕｍｉｎａｔａ ,ＣＡ)由人乳头瘤病毒 (Ｈｕ ｍａｎＰａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ,ＨＰＶ)感染引起 ,尽管近年来的发病率明显升高 ,但是发生于外耳道者罕见。研究外耳道ＣＡ的病因 ,对于减少传播、控制复发具有重要意义。1　临床资料男性患者 ,40岁 ,因右耳痛痒 1月伴少量出血 1ｄ入院。 1月前在街头地摊上掏耳后常感耳内痒 ,自己掏挖 ,轻微疼痛 ,近来挖耳后少许出血。查 :右外耳道前壁见一新生物 ,乳头状突起 ,质软 ,周围少许干血痂。否认冶游史 ,无外生殖器ＣＡ。活检 :鳞状上皮乳头状瘤。于 1994年 9…     

聚合酶链反应及斑点杂交技术对外耳道尖锐湿疣因学研究

尖锐湿疣(Condyloma acuminata,CA)由人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)感染引起,尽管近年来的发病率明显升高,但是发生于外耳道者罕见.研究外耳道CA的病因,对于减少传播、控制复发具有重要意义.     

斑点杂交法及PCR法检测乙肝患者血清HBV DNA结果分析

１９９４年２月以来,我们对我院门诊及住院部临床已确诊的１０２１例乙肝患者,采用ＥＬＩＳＡ法检测患者血清的乙肝两对半,并同时留标本采用ＤｉｇＨＢＶＤＮＡ探针斑点杂交法及ＰＣＲ—溴化乙锭法分别检测其ＨＢＶＤＮＡ。以便探讨ＤｉｇＨＢＶ－ＤＮＡ探针斑点杂交法及ＰＣＲ－溴化乙锭法探测ＨＢＶ－ＤＮＡ的灵敏度及特异性,更好地为临床提供最佳的检测结果,现将结果报告如下。１　对象与方法１－１　标本来源　１０２１例血清标本来自我院门诊及住院部,按病毒性乙型肝炎诊断标准已确诊的患者。抽患者空腹血２份,分离血清。其中…     

定量PCR与定性PCR及分子斑点杂交测定HBVDNA的比较

乙型肝炎病毒感染的诊断主要依赖于血清抗原抗体和ＨＢＶＤＮＡ的检测,聚合酶链反应是检测核酸的一种超微量最敏感的有效手段。目前,乙型肝炎病毒感染的基因诊断技术已从定性发展到定量［１］。应用聚合酶链反应定量检测病毒基因水平国外已有报道［２］。现将应用ＰＣＲ定量与定性及分子斑点检测ＨＢＶＤＮＡ结果报道如下：１　材料与方法１．１　研究对象选择１９９７年５月～１９９８年３月来我院就诊的乙肝病人３２９例,男２０８例,女１２１例,平均年龄２５－５±１５－３岁。按ＨＢＶ抗原抗体系统不同结果分三组。１．２　试剂检…     

应用PCR和斑点杂交试验检测急性淋巴细胞白血病微小残瘤病

应用ＰＣＲ和斑点杂交试验检测３５例儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）ＩｇＨ和ＴｃＲｒ基因重排，并对９例完全缓解期患儿进行了微小残留病（ＭＲＤ）动态监测，结果表明，双基因标记检查较单一基因检测ＭＲＤ更具优越性，可降低假阴性率，有利于临床预知疾病意义。     

应用PCR-反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐链霉素基因型

目的 应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素(SM)的耐药性。方法 设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和ms的寡核苷酸探针，点于硝酸纤维素膜上，与结核分枝杆菌分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交，并与PCR-单链构象多态性(PCR—SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较。结果 53株结核分枝杆菌临床分离株中，三种检测方法符合率为100％。9株敏感株rpsL和ms基因的SSCP图谱、膜杂交结果与标准株完全相同；44株耐SM菌株中，33株存在rpsL基因43位密码子AAG→AGG突变，6株有ms基因513位A→C突变，1株有ms基因513住A→T突变，突变检出率为90．9％，40株耐SM菌株和9株敏感株可用膜杂交方法检测出来，与传统药敏试验方法检测符合率为49／53。结论 应用膜反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐SM基因型灵敏度高、特异性好、简便、快速，可用于临床耐药性检测。