洛士辛对豚鼠心室心室肌细胞L型钙通道的作用

采用膜片钳技术,研究Ｌｏｔ对单个豚鼠单个腺鼠心室细胞Ｌ型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。Ｌｏｔ１～２００μｍｏｌ／Ｌ浓度依赖性地增加Ｉｃａ－Ｌ幅值,ＥＣ５０为３８μｍｏｌ／Ｌ,Ｌｏｔ３０μｍｏｌ／Ｌ使最大峰值电流增加６０％。其促钙作用明显使用依赖性,略促进钙通电流激活,显著地沽产钙电流的稳态失活。表明Ｌｏｔ增加Ｌ型钙电流作用主要与减少钙电流的稳态失活有关。     

二甲基-氨氯吡咪和牛黄酸对大鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换电流的影响

利用全细胞膜片钳技术 ,采用胶原酶B急性分离的大鼠心室肌细胞 ,研究了牛黄酸和二甲基 -氨氯吡咪对心肌细胞膜Na /Ca2 交换电流的影响。结果表明 ,10 μmol,2 0 μmol和 4 0 μmol的二甲基 -氨氯吡咪可使Ni2 敏感电流浓度依赖性地增加 ;膜电位为 5 0mV时分别增加 ( 2 7± 7) % ,( 12 1± 4 3 ) % ,和 ( 173± 68) % ;膜电位为 - 10 0mV时分别增加 ( 110±5 2 ) % ,( 2 2 1± 88) %和 ( 2 81± 80 ) %。牛黄酸对Na /Ca2 交换的内向和外向电流均无影响     

大鼠纹状体边缘区神经元中乙酰胆碱激活的离子通道特性

用细胞贴附式膜片钳技术研究了急性分离的新生SD大鼠纹状体边缘区神经元中乙酰胆碱激活的离子通道的特性。发现通道有25PS和60PS两种电导状态,25PS通道为主要类型,因此,本文主要报道25PS通道的特性。ACh激活的单通道电流为快速内向电流,随着超极化程度增加而增加,反转电位约为0mV。通道开放具单个开放和簇状开放,其开放时间均可权指数拟和,单个开放时间常数为0．29ms和1.84ms,簇状开放时间常数为1．96ms和18.24ms。平均关闭时间也可双指数拟和,两个时间常数为1．70ms和54．00ms。通道开放概率为0．012,未表现出电压依赖性。提示纹状体边缘区神经元上存在乙酸胆碱受体离子通道。根据特性证实为烟碱型离子通道。     

六味地黄汤含药血清对海马神经元突触活动的影响

目的：研究六味地黄汤益智作用的机理。方法：应用血清药理学和电生理方法，观察六味地黄汤含药血清对原代培养大鼠海马神经元自发突触活动的影响。结果：含药血清作用48h可明显增加海马神经元自发动作电流(spontaneous action cur-rent,sAC)和微小兴奋性突触后电流(miniature excitatory post aynaptic currenl,mEPSC)的产生频率，但并不影响mEPSC的幅度。结论：六味地黄汤可作用于突触前位点对海马神经元突触活动产生调节作用，该作用可能是其调节海马神经元的兴奋性进而发挥益智作用的机制之一。     

银杏苦内酯A对心室肌细胞延迟整流钾电流的影响

目的:研究银杏苦内酯A对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的影响.方法:全细胞膜片钳记录心室肌细胞延迟整流钾电流.结果:银杏苦内酯A 0.1,1.0,10.0 μmol•L 1分别使延迟整流钾电流减小5.34%(n＝7,P＞0.05),9.92%(n＝6,P＜0.05)和27.64%(n＝7,P＜0.05),并且具有浓度依赖性.结论:银杏苦内酯A能减少延迟整流钾电流且具有浓度依赖性.     

普罗帕酮对钾通道亚型Kv4.2和Kv4.3电流的影响

目的　研究普罗帕酮对钾通道亚型Kv4 2和Kv4 3电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳技术记录稳定表达Kv4 2和Kv4 3电流的人胚胎肾细胞株 (HEK2 93细胞 )电流的变化。结果　①普罗帕酮明显抑制Kv4 2和Kv4 3电流 ,呈浓度依赖性 ,IC50 分别为 1 0 3 μmol·L- 1 和 71 μmol·L- 1 ;②普罗帕酮明显加速Kv4 2和Kv4 3电流失活 ,1 0μmol·L- 1 的普罗帕酮可使Kv4 2电流衰减时间常数τ由(38 9± 2 1 )ms变为 (9 9± 1 8)ms ,半数最大失活膜电位V1 /2 由 (- 66 6± 0 8)mV左移至 (- 70 9± 1 1 )mV ;1 0 0μmol·L- 1 的普罗帕酮可使Kv4 3电流衰减时间常数τ(1 4 4 8± 2 0 8)ms变为 (1 8 5± 2 8)ms,半数最大失活膜电位V1 /2 由 (- 4 5 6± 1 9)mV左移至 (- 52 3± 2 1 )mV ;③普罗帕酮明显左移Kv4 2和Kv4 3电流的激活曲线 ,1 0μmol·L- 1 的普罗帕酮可使Kv4 2电流半数最大激活膜电位V1 /2 由 (- 4 1± 0 5)mV左移至 (- 1 6 1± 2 4)mV ;1 0 0μmol·L- 1 的普罗帕酮可使Kv4 3半数最大激活膜电位V1 /2由 (- 6 0± 1 1 )mV左移至 (- 1 6 5± 3 0 )mV。结论　普罗帕酮明显抑制Kv4 2 ,Kv4 3电流 ,该作用可能是其治疗心律失常的机制之一。     

豚鼠耳蜗单离Hensen细胞的分离技术及其钾通道

目的　探讨适合膜片钳技术的单离Hensen细胞的分离及对其钾通道的研究。方法　取豚鼠耳蜗 ,获得Corti器 ,采用酶消化和机械分离方法对Hensen细胞进行分离 ,并采用传统全细胞膜片钳技术 ,记录单离Hensen细胞的钾电流。结果　每只耳蜗可以获得活性良好的单离Hensen细胞 12± 3个。Hensen细胞的钾电流呈明显的外向整流性 ,只有迟电流 (IK) ,没有峰电流 (IA)。结论　酶消化结合机械分离的方法可获得适用于膜片钳技术研究的单离Hensen细胞 ,并用于讨论了所记录到的Hensen细胞钾电流     

硝普钠对豚鼠耳蜗外毛细胞全细胞钙电流作用的实验研究

目的　探讨一氧化氮供体———硝普钠 (sodiumnitroprusside ,SNP)对豚鼠单离耳蜗外毛细胞钙电流的影响及作用机制。方法　利用急性分离的豚鼠耳蜗外毛细胞 ,在全细胞膜片钳电压钳记录技术下 ,通过分离离子电流成分的方法 ,记录豚鼠耳蜗外毛细胞全细胞钙电流。结果　SNP对内向钙电流有抑制作用 ,在钳制电位为 -60mV ,刺激电压为 + 10mV的条件下 ,10mmol/L的SNP能抑制 (61 12± 1 99) %的内向钙电流 ( x±s ,n =5)。从 5～ 8个细胞得到的量效关系曲线中 ,其半数作用浓度为 1 9mmol/L ,最大抑制浓度为 10 0mmol/L ,斜率为 0 98。作用的机制为SNP可选择性地阻断外毛细胞膜上的L 型钙通道 (n =6)。结论　SNP作为一氧化氮的一种供体 ,能影响豚鼠耳蜗外毛细胞的生理功能 ,是通过阻断外毛细胞L 型钙通道电流的内流来实现的     

腺苷对模拟缺血再灌注豚鼠心室肌细胞动作电位的影响及其离子机制

目的　研究腺苷 (Ado)在模拟缺血缺氧时对豚鼠心室肌细胞动作电位 (AP)、L 型钙电流 (ICa.L)和ATP敏感性钾电流 (IK .ATP)的影响。方法　在离体豚鼠心室肌和酶解法分离的单个豚鼠心室肌细胞上 ,分别应用细胞内微电极和全细胞膜片钳技术记录动作电位和电流。结果　在模拟缺血缺氧状态下 ,Ado剂量依赖性的增大动作电位时程 (APD)的缩短 (P <0 0 5 ) ;抑制再灌注后APD恢复 ,而表现出迟后恢复。在缺血缺氧状态下 ,ICa.L受到抑制 ,Ado并不加重心肌细胞缺血缺氧时ICa.L的减小 ,而再灌注后ICa .L的恢复比较缓慢 ,但同对照组比较无差异。Ado可加速缺血缺氧时IK .ATP的激活 ,Ado(10 0 μmol·L-1)组在缺血缺氧时和再灌注后IK .ATP较对照组均明显增大。结论　在缺血缺氧状态下 ,Ado可增大APD的缩短 ,抑制再灌注后APD的恢复 ,其机制主要在于在缺血缺氧状态下Ado增大了IK .ATP。