应用液相芯片技术对上海地区尖锐湿疣患者进行人乳头瘤病毒分型

目的 采用液相芯片技术分析上海地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)型别的分布情况.方法 从116例尖锐湿疣患者的疣体标本中提取脱氧核糖核酸(DNA),应用液相芯片技术进行HPV基因型检测,并与聚合酶链反应(PCR)的检测结果进行比较,明确液相芯片的检测效能.结果 液相芯片检测的116例标本中,HPV阳性114例,阳性率为98.3%.其中单一型别感染占71.6%(83/116),双重型别感染占18.1%(21/116),三重型别感染占7.8%(9/116),四重型别感染占0.9%(1/116).共检出18种HPV亚型,其中HPV6和HPVll最为常见,感染率分别为60.3%(70/116)和42.2%(49/116).在高危型HPV感染中,最常见的3种亚型依次为HPV16、HPV52和HPVl8.液相芯片与PCR检测结果的符合率为90.7%,并且液相芯片对多重感染的检出率高于PCR.结论 上海地区尖锐湿疣以HPV6和HPV11感染为主.高危型HPV感染中最常见的3种亚型依次为HPV16、HPV52和HPV18.液相芯片对HPV多重感染的检出率高于PCR.     

尖锐湿疣患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能的检测

目的通过对尖锐湿疣（CA）患者皮损及外周血CD4^＋和CD8^＋细胞免疫功能检测的分析,探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能的变化及其对CA的影响。方法通过流式细胞仪（FCM）对40例CA患者及20名正常人外周血进行反映细胞免疫功能的T淋巴细胞亚群的检测,实验采用免疫组化的方法对40例CA皮损样本中CD4^＋和CD8^＋细胞的数目进行检测。结果CA患者外周血及皮损较正常对照组中的CD8^＋细胞百分率增加．CD4^＋细胞百分率及CD4^＋／CD8^＋比值降低。结论CA患者存在全身和局部的细胞免疫功能低下,而且局部皮损细胞免疫功能低下可能在CA的发病中具有重要作用。     

不同病程尖锐湿疣患者特异性CTL细胞频率和功能分析

.48)%,缓解期CA患者的特异性CTL杀伤活性为(59.33±1.71)%,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 缓解期CA患者与复发期CA患者外周血中特异性CTL数量相近,但缓解期CA患者特异性CTL杀伤活性明显强于复发期CA患者,这可能是不同病程CA患者转归差异的根本原因.     

两种黔产淫羊藿总黄酮对痴呆大鼠学习记忆的影响

目的研究黔产粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿淫羊藿总黄酮(TFE)对D-gal-AlCl3联合造模大鼠学习记忆能力的影响。方法联用D-gal-AlCl3 12周造模,同时按剂量100、50 mg.(kg.d)-1,分组po给TFE。采用Morris水迷宫实验检测其空间记忆能力;应用生化技术检测脑、血AChE活性;以免疫组化技术检测脑Bcl-2/Bax水平。结果 D-gal-AlCl3造模形成了大鼠学习记忆障碍;TFE能改善D-gal-AlCl3致痴呆大鼠学习记忆能力,降低脑、血组织中AChE的活性,明显升高bcl-2并降低Bax水平。以粗毛淫羊藿改善记忆能力效果为优。结论粗毛淫羊藿对痴呆大鼠记忆能力,脑细胞凋亡具有更明显保护作用。提示淫羊藿苷(ICA)是TFE中增强记忆的主要物质基础。     

静脉注射更昔洛韦联合局部液氮冷冻治疗尖锐湿疣的疗效观察

目的：观察静脉注射更昔洛韦联合液氮冷冻术对尖锐湿疣的疗效。方法：把62例尖锐湿疣患者随机分为观察组和对照组,观察组采用静脉注射更昔洛韦联合冷冻术,对照组采取单一的冷冻术,随访3个月。结果：观察组痊愈率及总有效率分别为59.38%和87.5%,与对照组比较均有显著性差异（P〈0.01及P〈0.05）。结论：静脉注射更昔洛韦联合液氮冷冻术比单一的液氮冷冻术对尖锐湿疣具有更好的疗效。     

异维A酸联合微波治疗尖锐湿疣疗效观察

目的探讨口服异维A酸联合微波治疗尖锐湿疣（CA）的疗效。方法将已经确诊的初诊CA患者随机分为A、B两组,A组单用微波治疗,B组在微波治疗的基础上口服异维A酸,开始为每日3次,每次1粒,连续1个月,随后减为每日2次,每次1粒,连续1个月,并于开始治疗后的第2周,第2个月及第6个月判断疗效。结果A组在治疗后2周、2个月、6个月时的复发率分别为19．0％、35．7％、45．2％,B组则分别为4．9％、12．2％、19．5％,B组的复发率低于A组,有统计学意义（P〈0．05）。结论异维A酸联合微波治疗CA有较好疗效,可明显降低单用微波治疗CA的复发卒,值得临床应用。     

尖锐湿疣患者血清白介素－2及其可溶性受体的酶免疫检测

采用ＥＬＩＳＡ技术检测３０例ＣＡ患者血清ＩＬ－２水平，其中１８例患者同时作了血清可溶性ＩＬ－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）检测。结果发现ＣＡ患者血清ＩＬ－２水平比对照明显低下（Ｐ＜０．０５）、ｓＩＬ－２Ｒ则无明显改变，说明该病存在细胞免疫功能缺陷，此可能是ＣＡ发病的重要原因。     

尖锐湿疣皮损中的微卫星DNA不稳定性

目的：探讨微卫星不稳定性在尖锐湿疣及其癌变中的作用及意义。方法：采用聚合酶链-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测28例尖锐湿疣皮损中的微卫星DNA改变。结果：28例尖锐湿疣皮损中8例存在微卫星不稳定性。而且其主要出现在尖锐湿疣癌变中，未发现杂合性丢失。结论：尖锐湿疣及其癌变与微卫星不稳定性有关，临床上通过对尖锐湿疣患者微卫星不稳定性的检测，有可能对尖锐湿疣癌变作出可能性预测及早期诊断，为发现癌变高危人群提供新的依据。     

人乳头瘤病毒6b型早期蛋白E6和E7基因的克隆及表达

目的:从尖锐湿疣(CA)标本中克隆出人乳头瘤病毒6b型(HPV-6b)早期蛋白E6、E7基因,并进行序列分析比对及原核表达,为HPV感染的检测和基因工程疫苗研究奠定基础。方法:用PCR法,从CA标本中扩增HPV-6的E6、E7基因,构建pUCHPV-6E6、pUCHPV-6E7两个重组体,酶切鉴定及测序分析比对。经双酶切与表达载体pGEX-5X-1定向连接,构建pGEX-5X-l重组表达质粒,转入BL21大肠杆菌,IPTG诱导GST融合蛋白表达及Westernblot鉴定。结果:克隆出HPV-6b早期蛋白E6、E7基因,成功构建pUCmHPV-6bE6、pUCmHPV-6bE7重组质粒,克隆获得HPV-6bE6、E7基因与GenBank标准株序列完全相同,经双酶切定向克隆,成功构建重组表达质粒pGEX-5X-lHPV-6bE6和pGEX-5X-lHPV-6bE7,转入BL21大肠杆菌,高效表达GST融合蛋白。结论:本研究克隆出的HPV-6bE6、E7基因与标准株相同,HPV-6bE6、E7GST融合蛋白获得高效表达,为HPV-6bE6、E7基因表达产物的纯化、体外活性以及E6、E7为靶位的基因疫苗研究奠定基础。     

表皮生长因子受体和PTEN蛋白在尖锐湿疣皮损中的检测及意义

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)和PTEN蛋白在尖锐湿疣、正常皮肤、皮肤恶性肿瘤中的分布及在尖锐湿疣发病中的作用及意义。方法采用免疫组化SP法分别检测EGFR和PTEN蛋白在正常皮肤、尖锐湿疣、基底细胞癌(BCC)、鳞状细胞癌(SCC)中的分布。比较二者在三组标本中的分布差异。结果EGFR在尖锐湿疣组织除角质层外的表皮全层细胞均为强阳性,在正常皮肤多为中等阳性,且多分布在基底层和棘层下部。在BCC和SCC中,EGFR强阳性(χ2=37.07,P<0.01)。PTEN蛋白主要分布在正常皮肤表皮层的棘层上方,在尖锐湿疣全层的细胞膜和细胞浆中呈中等阳性;在BCC和SCC中,PTEN蛋白减弱或缺失,角珠中PTEN蛋白多呈强阳性(χ2=59.191,P<0.01)。结论EG-FR和PTEN蛋白在尖锐湿疣,BCC,SCC及正常皮肤组织中,其分布的范围和阳性的强度有所不同,检测EGFR和PTEN蛋白可以作为判断尖锐湿疣转归的一种方法。