成都汉族群体五个短串联重复序列基因频率及其种属特异性研究

目的对成都汉族群体5个短串联重复序列（short tandem repeat，STR）基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究，探讨其在法医学中的应用价值。方法用PCR扩增、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色方法，对100名成都汉族无血缘关系健康个体的5个STR基因座的等位基因频率及其种属特异性进行研究。结果D18S979、D11S2014、D18S548、D1S1667和GATA164F07在成都汉族群体中等位基因个数分别为6、5、5、7、6；基因型个数分别为12、11、13、19、14；基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。通过种属特异性分析发现5个STR基因座中，猴在D18S979、D11S2014和D1S1667基因座均检测出扩增产物，但未在人类基因座分型区内；D18S979位点人类分型区内可检测到牛、狗、鳝鱼有扩增产物，猪、鸭、鼠、兔有微弱扩增产物；D18S548位点人类分型区内只检测到牛有微弱扩增产物；D1S1667位点人类分型区内检测到狗、羊、鳝鱼有扩增产物；GATA164F07位点人类分型区内只检测到狗有微弱扩增产物；泥鳅、鸡、豚鼠在5个基因座均未检测到扩增产物。结论5个短串联重复序列中D18S979、D18S548、D1S1667和GATA164F07在成都汉族群体中具有较好的遗传多态性，D11S2014、D18S548和GATA164F07具有较好的种属特异性，在法医学个人识别和亲子鉴定中有应用价值。     

载脂蛋白E多态性与脑梗死及脂类代谢关系的研究

目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)多态性与脑梗死及脂类代谢的关系。方法:缺血性脑梗死组110例,健康对照组60例。ApoE表型采用等电聚焦(IEF)电泳及免疫印迹(Westernblotting)技术测定,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)采用酶法测定,低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)按Fridwald公式计算,ApoAⅠ、ApoB用火箭电泳法测定,ApoE、脂蛋白(a)用ELISA法测定。结果:脑梗死组ApoEε4等位基因表达显著高于对照组(P＜0.05);脑梗死组TC、TG、LDL-C、ApoB、ApoE、Lp(a)水平显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01),ApoAⅠ、HDL-C显著低于对照组(P＜0.05);脑梗死组各等位基因(ε2、ε3、ε4)之间血脂水平比较;含ε4等位基因者,TC、LDL-C、ApoB、Lp(a)水平高于含ε3者(P＜0.05),HDL-C、ApoAⅠ较低(P＜0.05);含ε2等位基因者,TG、HDL-C、ApoAⅠ、ApoE高于含ε3者(P＜0.05),TC、LDL-C、ApoB较低(P＜0.05)。结论:ApoEε4等位基因与脑梗死发病有关,ε2、ε4等位基因与脑硬死患者的脂类代谢改变有关。     

HLA-G多态性与妊娠高血压综合征相关性研究

目的 :探索HLA G与妊娠高血压综合征的发生是否存在关联。方法 :采用非同位素地高辛标记的寡核苷酸探针杂交技术 ,对上海地区 5 4例妊娠高血压综合征 (Pregnancy inducedHypertension ,PIH)病人和 14 6例正常孕妇对照进行HLA G等位基因分型。结果 :在正常对照组及妊高征组中均可检出 9种HLA G等位基因 :G 0 10 11、G 0 10 12、G 0 10 13、G 0 10 18、G 0 10 3、G 0 10 4 1、G 0 10 4 2、G 0 10 4 3、G 0 10 5N。其中G 0 10 11在PIH病人和正常对照组中均是最常见的等位基因 ,各占31 4 8%和 37 33% ,其次是G 0 10 13分别为 2 5 0 0 %和 2 0 2 1% ,G 0 10 4 1分别占 18 5 2 %和 18 4 9%。检出的各等位基因在两组之间比较均无显著性差异。结论 :HLA G等位基因多态性与妊娠高血压综合征的发生可能没有直接关联     

用分子克隆技术构建D12S391基因座等位基因分型标准物及群体遗传学研究

目的 解决长期困扰短串联重复序列（short tandem repeat,STR）分型上存在的准确性和标准化问题。方法 先用PCR扩增出D12S391基因座的9个等位基因片段，将其插入pUC重组质粒中，经DNA测序分析证实插入片段的结构及大小，用国际标准将插入的等位基因片段进行命名，最后经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后，制备出标准的D12S391等位基因分型标准物。结果 应用此法制备出大量的D12S391基因座等位基因分型标准物，并将其用于调查该基因座在德国Mainz地区、日本Miyazaki地区及中国成都汉族、北京汉族、新疆维吾尔族和甘肃回族6个群体中的基因型分布频率。D12S391基因座在各群体中均有较高的多态性，其非父排除概念及个人识别能力分别为0.609-0.786和0.940-0.952。结论 该法制备的STR基因座等位基因分型标准物在法医科学实践中应用价值极高，D12S391基因座是一个非常适合于群体遗传学研究和法医科学应用的遗传标记。     

习惯性流产免疫遗传学的研究进展

习惯性流产（RSA）与人类主要组织相容性抗原（HLA）的关系已成为免疫遗传学及妇产科学研究的热点之一。本综述了RSA免疫遗传学研究的一些最新进展。     

信号转导和转录激活因子6基因多态性与湖北汉族人变应性哮喘的相关性研究

目的　探讨信号转导和转录激活因子 (STAT) 6基因 3′非翻译区G2 96 4A位点多态性和第一外显子GT串联重复序列遗传多态性与湖北汉族人变应性哮喘易感性的关系。方法　用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术检测STAT6基因G2 96 4A位点多态性 ;用聚合酶链反应 短串联重复多态性 (PCR STR)技术对STAT6基因第一外显子微卫星进行分型 ,并将PCR产物克隆及测序鉴定 ;采用病例 对照法研究了 1 35例变应性哮喘患者和 1 0 9例对照。结果　 ( 1 )湖北地区汉族人群STAT6基因G2 96 4A位点基因型以GA型最为常见 ;哮喘组与对照组STAT6基因G2 96 4A位点的等位基因频率和基因型频率GG、GA、AA之间差异无统计学意义 (P >0 .0 5)。 ( 2 )STAT6基因第一外显子微卫星多态性共检出GT串联重复次数为 1 3、1 4、1 5、1 6的 4种等位基因 ;第一外显子微卫星的多态性检测出 1 3/1 4基因型在哮喘患者组和正常对照组相比差异具有统计学意义(P =0 .0 0 1 4 )。 ( 3)STAT6基因第一外显子GT二核苷酸串联重复序列多态性中 1 3 GT重复等位基因与 2 96 4A变异体之间存在连锁不平衡 (P =0 .0 0 0 0 2 1 8)。结论　STAT6基因 3′非翻译区G2 96 4A位点多态性与湖北汉族人哮喘易感性无明显相关性 ;第一外显子GT二核苷酸串联重     

CTLA-4在重症肌无力患者中的表达及其多态性导致的无效转录研究

目的 探讨重症肌无力(MG)患者细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)的表达状况及由CTLA-4基因启动区多态性导致的不同遗传易感性机制。方法 ELISA法测定MG患者血清中sCTLA-4的水平；限制性片段长度多态性分析用于检测启动区-1772、-1661位点的多态性；转录因子NF-1和c／EBPβ结合位点通过染色质免疫沉淀实验(CHIP)得以验证。结果 MG患者血清sCTLA-4的表达水平与等位基因的突变相关，携带T→C^1772突变基因的患者可表达高水平的sCTLA-4。TC^1772基因型的频率在MG患者尤其是胸腺瘤亚组明显高于对照组，而G^-1661等位基因和GG^-1661基因型的频率在MG患者则显著降低。当-1772位点的等位基因是T而非C时，存在转录因子NF-1结合位点；同样，当-1661位点的等位基因是G而非A时，存在转录因子c／EBPβ结合位点，刀豆蛋白A(Con A)、植物血凝素(PHA)能促进NF-1和c／EBPβ的这种位点特异性转录活性。结论 MG患者CTLA-4表达异常，启动区C／T^1772和A／G^-1661多态性可导致无效转录，T→C^1772的突变能影响基因的剪接，干扰蛋白的表达和功能，阻止了负性调节信号的传递而致发病。     

云南汉族系统性红斑狼疮与HLA-B等位基因相关性的研究

人白细胞抗原(HLA)系统是人类最为复杂的免疫遗传系统，与许多免疫疾病的发生直接或者间接相关。系统性红斑狼疮(SLE)与HLA的相关性研究一直受到国内外的关注，目前，国内研究SLE与HLA关联的报道多见于DQ、DR和TNF等基因。我们应用聚合酶链反应，序列特异性引物(PCR-SSP)方法对云南汉族SLE与HLA-B基因的相关性进行了研究。     

HLA-DRB1基因与子痫前期相关性研究

目的探讨HLA-DRB1基因与子痫前期相关性。方法采用序列特异性引物技术（PCR—SSP）对119例子痫前期患者、117例正常孕妇及其新生儿进行HLA-DRB1等位基因分型，比较其基因频率。结果共检出13种等位基因，两组孕母或两组新生儿间，其HLA-DRB1等位基因频率差异无统计学意义（Pc〉0．05）；子痫前期组和正常晚孕组母婴所携带HLA-DRB1＊014、-DRB1＊10、-DRB1＊14等位基因配伍差异有统计学意义（P〈0．05）。结论母婴所携带某些HLA-DRB1基因配伍与子痫前期易感性或抗性相关；父源性HLA-DRB1＊014基因与子痫前期易感性相关。     

维生素D受体基因ApaⅠ多态性与维生素D缺乏性佝偻病易感性研究

目的研究维生素D受体(vitamin D receptor，VDR)基因多态性与维生素D缺乏性佝偻病易感性的相关性，探讨维生素D缺乏性佝偻病的遗传易感因素。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析及基因测序等技术测定34例维生素D缺乏性佝偻病息儿和52名正常儿童的VDR基因多态性，比较两组VDR基因型和等位基因频率。结果在病例组和对照组中AA、Aa、aa基因型频率分别为17．6％、50．0％、32．4％和7．7％、28．8％、63．5％，A、a等位基因频率分别为42．6％、57．4％和22．1％、77．9％。两组AA、Aa、aa基因型频率差异有统计学意义(χ^2=8．113，P=0．017)，两组A和a等位基因频率的差异也有统计学意义(r=8．217，P=0．004)，佝偻病组中A等位基因频率高于对照组。结论VDR基因ApaⅠ酶切位点多态性与维生素D缺乏性佝偻病存在相关性，携带A等位基因的个体存在对佝偻病的易感性，提示VDR基因ApaⅠ酶切位点多态性可能在决定个体维生素D缺乏性佝偻病遗传易感性方面有重要作用。