PTEN和p38MAPK在前列腺良恶性病变中的表达及意义

目的:探讨PTEN蛋白及丝裂素活化蛋白激酶p38(p38MAPK,p38)在前列腺良恶性病变组织中的表达差异及其临床意义.方法:应用免疫组织化学SABC法检测20例良性前列腺增生(BPH)组织、20例前列腺上皮内瘤(PIN)组织及46例前列腺癌(PC)组织中的PTEN和p38的表达.结果:PTEN在BPH、PIN和PC组织中表达活性递减,差异有统计学意义(P＜0.01);p38在BPH、PIN和PC组织中表达活性递增,差异有统计学意义(P＜0.01);PTEN的表达与前列腺癌患者临床分期、病理分级呈负相关(r分别为-0.352和-0.653,P＜0.05),而p38的表达则与上述项目呈正相关(r分别为0.298和0.596,P＜0.05);PTEN与p38表达呈负相关(r=-0.602,P＜0.01).结论:PTEN蛋白低表达和p38活性的增强可能参与了前列腺组织的恶化,在前列腺肿瘤的发生及发展中起重要作用.     

自拟虎菟饮治疗弹性蛋白酶异常男性不育症100例疗效观察

男性生殖道感染为男性不育的重要病因,占男性不育的4%～10%[1]。近年来,随着性传播疾病的蔓延,同时由于亚临床和隐性感染的增多,对男性生殖道感染的实验室诊断就显得尤为重要。弹性蛋白酶是一种丝氨酸中性蛋白水解酶,存在于中性粒细胞中,当精液发生炎症感染时,中性粒细胞释放大量弹性蛋白酶,以发挥抗感染效应。笔者采用自拟虎菟饮治疗弹性蛋白酶男性不育症100例,并观察了治疗前后     

烙铁头蛇毒中一个具有抗补体活性金属蛋白酶的纯化和性质研究

目的从烙铁头蛇毒中筛选分离抗补体活性蛋白,并对其部分生物学活性开展研究,以了解其在蛇伤中的病理生理作用和潜在的应用价值。方法采用蛋白层析技术分离纯化抗补体活性蛋白,测定其分子量、等电点、抗补体作用、多种蛋白水解酶活性、水肿活性及出血活性。结果从烙铁头蛇毒中分离纯化出一个抗补体活性蛋白TMAC-1,表观分子量约为25ku,等电点为9.0。TMAC-1能够抑制补体经典途径和替代途径的溶血,预孵条件下,其IC50分别为62、29mg·L-1;不预孵条件下,其IC50为263、246mg·L-1。TMAC-1能够裂解C3、C5,但裂解产物不能诱导内皮细胞P-selectin的表达。TMAC-1能依次降解纤维蛋白原的Aα、Bβ、γ链,该活性能被EDTA、1,10-phenanthroline、EGTA完全抑制,不受PMSF、SBTI的抑制。TMAC-1具有水肿活性和微弱的偶氮酪蛋白水解活性,没有精氨酸酯酶水解活性和皮下出血活性。结论 TMAC-1是一个非出血性的金属蛋白酶,它可通过酶切补体特定成分抑制补体激活。     

过表达SOD_1 G41S和G41D的重组腺相关病毒载体构建及其在体外N2a细胞中的作用研究

目的研究家族性肌萎缩侧索硬化(fALS)超氧化物歧化酶1(SOD_1)上G41S和G41D两种突变型所致神经元电压门控性钠通道(Na_v)电生理特性的差异及其可能的分子机制。方法构建过表达SOD_1野生型(WT)、SOD_1G41S及SOD_1G41D重组腺相关病毒(rAAV)载体后,体外感染小鼠神经瘤母细胞(N2a),并分为3个实验组:SOD_1WT组、SOD_1G41S和SOD_1G41D组,并以无目的基因rAAV感染的N2a细胞为阴性对照组。利用全细胞膜片钳技术分别记录4组细胞Na_v电流,绘制通道快速激活和稳态失活曲线后分析相关参数。比较各组细胞凋亡分子cleaved caspase-3在感染后24、48和72 h不同时间点的表达情况。结果与对照组和SOD_1WT组比较,感染过表达SOD_1G41S组、SOD_1G41D组rAAV的细胞峰值电流显著增加(P0.05),且SOD_1G41S组显著高于SOD_1G41D组(P0.01)。SOD_1G41S组和SOD_1G41D组细胞半数激活电压和半数失活电压显著高于对照组和SOD_1WT组(P0.05);但SOD_1G41S组半数激活电压高于SOD_1G41D组(P0.05);SOD_1G41S与SOD_1G41D组半数失活电压比较差异无显著性(P0.05);各组激活、失活曲线斜率差异无显著性(P0.05)。虽然24和48h,SOD_1WT、SOD_1G41 S、SOD_1G41D组cleaved caspase-3表达量差异无显著性;但转染72 h后,SOD_1G41S组和SOD_1G41D组cleaved caspase-3表达量高于SOD1WT组,且SOD_1G41S组高于SOD_1G41D组。结论SOD_1G41S和SOD_1G41D突变通过加快Na_v快速激活和抑制失活过程提高神经元活性,SOD_1G41S突变Na_v活性显著高于SOD_1G41D。SOD_1G41S突变导致cleaved caspase-3表达水平高于SOD_1G41D突变。     

VKORC1-1639G＞A、CYP2C9*3基因多态性及年龄、体质量对汉族肺血栓栓塞症患者华法林稳定剂量的影响

目的 探讨细胞色素P450酶2C9基因(CYP2C9)、维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1基因(VKORC1)多态性及非遗传因素对汉族肺血栓栓塞症患者华法林个体化用药的影响.方法 连续纳入北京安贞医院185例确诊为肺血栓栓塞症服用华法林治疗的汉族患者,且PT-INR值范围在2.0～3.0,服药时间至少3个月.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测VKORC1-1639G＞A和CYP2C9*3基因型,通过多元逐步回归分析得出华法林稳定剂量的预测公式.结果 185例患者中,所需华法林稳定剂量差异较大,最小者为1.50 mg/d,最大者为7.50 mg/d.Spearman双变量秩相关分析显示:华法林稳定剂量与VKORC1-1639G＞A基因型(rs=0.482,P=0.000) 、CYP2C9*3基因型(rs=-0.244,P=0.001)及年龄(rs=-0.409,P=0.000)显著相关;性别(P=0.153)、身高(P=0.526)、体质量(P=0.075)、体表面积(P=0.085)及平均INR值(P=0.135)与华法林稳定剂量相关不明显.采用多元逐步回归分析得出华法林稳定剂量方程:D=5.802-1.780×(VKORC1-1639AG)-3.395×(VKORC1-1639AA)-0.027×Age+1.36×(CYP2C9*1/*1)+0.018×Weight.该方程可解释华法林稳定剂量个体差异总变异中的的51.7％.结论 VKORC1-1639G＞A和CYP2C9*3基因多态性及年龄、体质量是引起汉族肺血栓栓塞症患者个体间华法林剂量差异的因素.     

毒蛇咬伤的护理（附49例报告）

毒蛇咬伤是夏秋两季常见急症之一。蛇毒含有多种毒性蛋白质、溶组织酶,以及多肽的复合物,按其对人的作用可分为三类：神经毒、血液毒及混合毒［1］。毒蛇咬伤后蛇毒中的溶血素、凝血素、蛋白水解酶等毒性物质使红细胞溶解及毛细血管内皮细胞破坏,从而引起多系统的损害。毒蛇咬伤后病势凶猛,及时、有效的治疗和护理对提高抢救成功率尤为重要。2011年3月至2013年9月,本科收治49例毒蛇咬伤患者,现将护理措施报告如下。     

复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的机制研究

目的探讨复方木鸡颗粒联合顺铂对人肝癌Hep G2细胞增殖、凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法体外培养人肝癌Hep G2细胞,取对数生长期细胞,将其消化后随机分为对照组,复方木鸡颗粒高、低(10、5mg/m L)剂量组,顺铂组(1mg/m L)和复方木鸡颗粒(5mg/m L)联合顺铂(1mg/m L)组,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,采用Hoehcst染色法检测细胞凋亡情况,采用免疫荧光联合激光共聚焦分别检测各组细胞中凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、蛋白天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、细胞色素C氧化酶(Cyt-C)表达水平。结果与对照组比较,复方木鸡颗粒10、5 mg/mL组及顺铂组、联合组的细胞活力显著降低(P0.01),细胞凋亡显著增加,细胞内Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05、0.01),而Bax、Caspase-9、Cyt-C蛋白显著上调(P0.05、0.01),且联合组在抑制人肝癌Hep G2细胞增殖、促进其凋亡、调控凋亡相关蛋白表达的作用效果最佳。结论复方木鸡颗粒可显著抑制Hep G2细胞增殖并促进其凋亡,其与顺铂联合起到协同增效的效果,其作用机制可能与下调人肝癌Hep G2细胞内抑凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax、Caspase-9、Cyt-C表达水平有关。     

多柔比星联合替莫唑胺治疗脑胶质瘤的临床研究

目的 探索补肺活血胶囊用于新型冠状病毒肺炎（COVID-19）恢复期治疗的潜在作用机制,为其临床用药提供理论指导。方法 通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）、BATMAN-TCM、中国知网（CNKI）和Pubmed数据库获得补肺活血胶囊的活性成分及作用靶点;通过GeneCards数据库获取COVID-19相关靶点,并采用交集法筛选出与补肺活血胶囊活性组分作用的共同靶点,运用Cytoscape 3.7.2构建“中药-化合物-靶点”网络,并通过String数据库构建蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络;通过DAVID数据库进行KEGG通路和GO功能富集分析,并运用R version 3.6.3软件将结果进行可视化;采用AutoDock Tools 1.5.6、AutoDock vina 1.1.2进行分子对接研究。结果 从补肺活血胶囊中共筛选出潜在活性成分32个,对应靶点203个,核心化合物11个,核心靶点52个;PPI网络分析获得补肺活血胶囊干预COVID-19关键作用靶点25个;GO及KEGG富集分析得出与补肺活血胶囊治疗COVID-19作用相关的生物过程251个（P<0.05）,相关信号通路93条（P<0.05）;分子对接结果显示补肺活血胶囊核心化合物与新型冠状病毒（SARS-CoV-2） 3CL水解酶和血管紧张素转化酶II（ACE2）具有较好的亲和。结论 补肺活血胶囊含有的核心化合物可作用于IL6、MAPK8、PTGS2、PTGS1、NCOA2等靶点,调节多条信号通路,从而发挥对COVID-19恢复期的治疗作用。