逆转录－套式PCR检测血清中丙肝病毒RNA

利用与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因组５＇非编码区保守序列同源的套式引物，建立了检测血清中ＨＣＶＲＮＡ的聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，由于在引物设计中选择了最保守的区域且避开了与黄病毒属的同源序列，保证了ＰＣＲ检测的灵敏度和特异性。经逆转录和两轮ＰＣＲ扩增，可检出１×１０－３ｕｌ血清中的ＨＣＶＲＮＡ。研究了影响ＨＣＶＲＮＡＰＣＲ检测的各种因素，并对ＲＮＡ分离及ＲＴ－ＰＣＲ反应体系进行了优化，在此基础上研制了ＨＣＶ的ＰＣＲ检测试剂盒。     

运用聚合酶链反应技术检测结核分枝杆菌

ＰＣＲ检测结核分枝杆菌是一种高效的实验方法，具有极高的敏感性和特异性；检测出结果所用时间比生物培养法综合了约１００倍，比涂片法更加敏感，甚至可检测到１个结核杆菌。     

用聚合酶链反应检测乙肝患者血清中的HBV—DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了１１４例传梁科门诊病人血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与ＨＢＶ有关的血清学标志（ＨＢＶＭ）进行了比较。结果证明ＰＣＲ法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ较用ＥＬＩＳＡ法检测抗原－抗体更加灵敏、可靠。     

HCV RNA定量PCR检测研究进展

ＨＣＶ ＲＮＡ检测是ＨＣＶ感染的重要诊断手段。本文系统介绍了以ＲＴ－ＰＣＲ定量分析ＨＣＶ ＲＮＡ的标本稀释法，竞争性ＲＴ－ＰＣＲ法及放射性核素掺入法等三种方法的原理和应用，对其可靠性和可操作性进行了评价。此外还就这三种方法对ＨＣＶ ＲＮＡ检测在血液制品的污染的鉴定，慢性丙型肝炎的诊断，以及在ＩＦＮα治疗疗效评价中的应用进行了叙述和展望。     

海南文昌汉族人群中两种葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变的研究

目的:分析海南文昌人群中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因1376G→T、95A→G突变。方法:应用硝基四氮唑蓝定量法进行G6PD缺乏症的筛查,用等位基因特异PCR检测1376G→T、95A→G突变。结果:在358位海南文昌汉族人中,发现G6PD缺乏症患者20例,其中9例患者有1376G→T突变,3例患者有95A→G突变。结论:1376G→T、95A→G突变是文昌人群中常见的突变。     

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值

聚合酶链反应在诊断结核性胸膜炎中的价值姜艳，谭玉芹，鞠吉雨，冯永堂，王健（潍坊市第二人民医院潍坊２６１０４２潍坊医学院免疫学教研室）聚合酶链反应（ＰＣＲ）是具有灵敏、快速、特异的一基因诊断技术。我们对结核性胸膜炎的胸水标本行ＰＣＲ结核菌检测，同时用胸...     

聚合酶链反应产物特异性的阳性证实

以聚合酶链反应(PCR)法在mRNA水平检测T淋巴细胞受体α链可变区基因表达为例,介绍用~(32)P标记的人工合成寡核苷酸探针对PCR产物特异性作阳性证实的方法。该法以干琼脂糖凝胶作为支持物、相对较为简便和省财。用Ca探针以干凝胶作支持物的杂交结果,证实29个Vα基因的PCR扩增中物均为特异性的,放射自显影的带型与位置和溴乙锭染色所示完全吻合。     

逆转录-聚合酶链反应检测胃癌淋巴结微转移

目的 检测胃癌常规病理检查阴性的淋巴结微转移的发生及与其它临床参考指标的关系。方法 利用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法检测68枚胃癌胃周淋巴结癌胚抗原（CEA）mRNA基因表达，同时比较RT－PCR与免疫组化（IHC）方法的检测敏感性。结果 CEAmRNA RT－PCR是一种很敏感的方法，可以检测1／10^6个转移的癌细胞；检测19例胃癌患者取材的68枚胃周淋巴结，IHC阳性率28％（19／68），RT－PCR阳性率57％（39－68），两组之间差异有非常显著性意义（P＜0.01）；RT－PCR阳性率与胃部临床参考指标密切相关，且随着病期进展而增大。结论 CEA mRNA RT-PCR是比免疫组化更敏感的方法，可以预测胃癌淋巴结微转移，能够有效地避免已有微小转移的患者被漏诊。