第一讲O157:H7大肠杆菌和志贺样毒素(续)

第一讲Ｏ１５７：Ｈ７大肠杆菌和志贺样毒素（续）徐建国二、ＥＴＥＣ、ＥＰＥＣ、ＥＩＥＣ和ＥＡｇｇＥＣ的毒力因子和鉴定１．ＥＴＥＣ：ＥＴＥＣ的主要特征是能分泌热稳定毒素（ＳＴ）、热不稳定毒素（ＬＴ）；具有与致病性相关的菌毛，如ＣＦＡｓ（Ｃｏｌｏｎｉｚａｔ...     

我院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及肠毒素分析

收集了我院１９９４年１０月至１９９５年４月金黄色葡萄球菌１００株，应用药敏试验筛选ＭＲＳＡ，并检测其对１２种抗生素的耐药性，计算ＭＩＣ５０和ＭＩＣ９０，应用乳胶凝集试验法，测定其肠毒素产生率。结果我院总的ＭＲＳＡ阳性率为６０％，烧伤科的ＭＲＳＡ的阳性率为６７．４％，内科６２．５％，骨科４４．５％，ＭＲＳＡ耐药性低于５０％的有万古霉素（３．３％）去甲万古霉素（５％），丁胺卡那霉素（２１．５％）３种，     

重组血管内皮细胞生长因子在大肠杆菌的高效表达

目的:使重组血管内皮细胞生长因子(VEGF)在大肠杆菌中得到高效表达.方法:通过构建表达重组VEGF的质粒PRL621/VEGF,并在大肠杆菌中高效表达.结果:表达量约占菌体总蛋白的40%.对形成包含体的表达产物进行变性,初步复性处理,得到重组人VEGF粗提液,鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生长活性,N-端15个氨基酸序列分析结果,与天然VEGF蛋白质相应序列一致.     

综合疗法降低臀产围产儿死亡率之临床分析

我院从1990年以来,将单胎足月臀产者采取提前入院、B 超检查、产前外倒转、人工破膜、催产素静脉滴注及适当放宽剖宫产指征等综合疗法取得满意疗效,现报告如下。临床资料一一般资料本组病例为研究组,全部病例均为我院住院分娩单胎足月臀产,共191例。并以我院1990年前4年未采取综合疗法的单胎足月     

糖对椰酵假单胞菌产毒性能的影响研究

以半固体ＬＡ和营养琼脂为基础培养基，分别加入葡萄糖、蔗糖、可溶性淀粉、甘油等４种成分，研究糖分对椰酵假单胞菌产毒性能影响。结果表明，椰酵假单胞菌在营养琼脂和ＬＡ半固体基础培养基上基本不产毒或产毒量很低，而葡萄糖和甘油的加入使椰酵假单胞菌的产毒能力大幅度提高，产毒量不低于在马铃薯葡萄糖琼脂（ＰＤＡ）中，提示了糖代谢在椰酵假单胞菌生长和产毒过程中的重要作用。建议将ＬＤＡ（含葡萄糖的ＬＡ，新设计）半固体做为一种新的椰酵假单胞菌产毒培养基，有利于实验室研究及不同实验室间的质量控制     

天蚕素A-蛙皮肽杂合肽基因的表达及产物抗菌活性测定

目的 研究天蚕素A-蛙皮肽杂合肽基因[CA（1-8）-MA（1-12）]抗菌肽的抗菌活性。方法 将天蚕素A-蛙皮肽杂合肽基因抗菌肽的人工基因克隆到具有自切割功能的表达载体pTYB12上，并在大肠杆菌（E.coli)BL21(DE3)中进行表达，表达产物用几丁质树脂进行了亲和吸附，自切割后洗脱得到抗菌肽，进行透析以去除盐类物质，最后用大肠杆菌与金黄色葡萄球菌进行活性检测。结果 天蚕素A-蛙皮肽杂合肽[CA（1-8）-MA（1-12）]对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌均有一定的抗菌活性。结论 天蚕素A-蛙皮肽杂合肽具有抗菌活性。其抑瘤活性的研究还有待于进一步研究。     

高渗透压对细菌电转化率的影响

研究了革兰氏阴性细菌大肠杆菌JM109和革兰氏阳性细菌地衣芽孢杆菌0204在电转化过程中,高渗溶液如山梨醇、甘露醇、甘油、蔗糖和葡萄糖对其电转化率的影响.结果表明,高渗溶液能够有效保护细胞,提高转化率.在复苏培养基中,0.7mol/L甘露醇对地衣芽孢杆菌0204的保护效果最好,0.1mol/L蔗糖对大肠杆菌JM109的保护效果最好.由此得到质粒DNA对地衣芽孢杆菌0204的最高电转化率为9.8×102转化子/μg,质粒DNA对大肠杆菌JM109的最高电转化率为5.9×108转化子/μg.     

鸡柔嫩艾美耳球虫疫苗候选基因在大肠杆菌中的表达

目的构建柔嫩艾美耳球虫子孢子表面抗原原核表达载体，并且在大肠杆菌中表达。方法将本室构建的pMD-Mz5-7克隆质粒酶切回收目的片段定向亚克隆到pET-28b( )载体上，构建成原核表达载体pET-28b-Mz5-7，酶切鉴定正确后，在Escherichia coli BL21(DE3)中用IPTG诱导表达，并经SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果成功构建了目的抗原基因的原核重组表达质粒pET-28b-Mz5-7，IPTG诱导表达该融合蛋白，SDS-PAGE电泳表明，其能表达一分子质量约为37ku的融合蛋白，与预测分子质量相符，最佳反应条件为1mol／LIPTG诱导4h后表达量最高。薄层扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的18％，Western blotting结果显示，表达产物可被抗柔嫩艾美尔球虫的多克隆抗体识别，说明该融合蛋白具有很好的反应原性。结论在原核细胞融合表达Mz5-7成功，为鸡球虫病重组苗的研究奠定了基础。     

中西医结合治疗产后及术后急性结肠假性梗阻

产后及盆腔手术后并发急性结肠假性梗阻(ACPO)是妇产科较为少见的并发症.我院自1990年1月～2002年12月共收治10例,均采用中西医结合方法治疗,疗效满意,现将诊治情况分析如下.