高效液相色谱法测定大鼠脑组织中川陈皮素含量

目的建立大鼠脑组织中川陈皮素含量的高效液相色谱紫外检测法。方法脑组织匀浆液经乙腈蛋白沉淀,再采用乙酸乙酯和正己烷进行萃取,吸取有机相,N2气流吹干后,流动相复溶,离心,取上清液待测。采用Kro—masilC18柱（4．6mm×150mm,5μm）,流动相为甲醇-水（65：35,v／v）,流速0．8mL·min^-1,柱温为40℃,检测波长335nm,以尼莫地平为内标进样分析。结果川陈皮素、内标和内源性杂质分离良好,线性范围6．25～1200ng·g^-1（r=0．9992）,定量下限为6．25ng·g^-1,萃取回收率〉59％,方法回收率〉99％,批内、批间RSD均〈15％。结论本方法灵敏度高、专属性强,适合于大鼠脑组织中川陈皮素含量测定。     

柑橘类黄酮对Neuromedin U2受体的激活效应及siRNA干扰分析

目的:利用NMU2R稳定细胞株和阴性细胞株并通过siRNA干扰分析筛选柑橘类黄酮中对NMU2R有激活效应的物质.方法:利用NMU2R细胞考察9种柑橘黄酮对NMU2R的激活效应,然后针对激活效应较高的柑橘类黄酮,分别用阴性细胞和NMU2R的siRNA干扰分析来排除假阳性干扰.结果:柑橘类黄酮中的橙皮苷和川陈皮素能有效激活NMU2R,橙皮苷和川陈皮素的效能、半效浓度、效价强度分别为4.688,318.970 μmol·L-1,200.933 μmol·L-1和4.758,5.832 μmol·L-1,3.124μmol·L-1.结论:柑橘类黄酮中的橙皮苷和川陈皮素都对NMU2R有激活效应.川陈皮素的半效浓度较低,具有药用开发价值.     

藏药加哇中黄酮类成分和阿魏酸的定量分析

目的：建立藏药加哇中甘草查耳酮甲、阿魏酸、异甘草素和川陈皮素的含量测定方法。方法：ＯＤＳ柱,流动相甲醇１％醋酸（７３∶２７,２８∶７２,５９∶４１）和甲醇水（６５∶３５）,检测波长３４５,３２０,３４５,３３２ｎｍ。结果：甘草查耳酮甲、阿魏酸、异甘草素和川陈皮素含量分别为０．７２８,０．１２４,０．０８３０,０．０２３７ｍｇ／ｇ,平均回收率分别为９９．４５％,９８．１３％,９７．８１％,９６．５８％。结论：为藏药加哇的质量评价、质量控制和开发利用提供了依据。     

川陈皮素体外对微管蛋白聚合的影响

目的：研究川陈皮素对微管蛋白聚合的抑制作用，探讨其抗肿瘤的可能机制。方法：在离体条件下，将受试化合物加入到微管蛋白聚合-解聚反应体系中，于37 ℃，350 nm下检测反应体系吸光度的变化。结果：川陈皮素处理后反应体系的吸光度与对照组相比显著降低。在不同终浓度川陈皮素(5.0，7.5，10.0，12.5 μmol·L^-1)的反应体系中，其对应的最高吸光度分别为：0.130，0.109，0.086，0.071；对微管蛋白聚合的抑制率分别为16.7%，30.1%，44.9%，54.5%。提示它对微管蛋白聚合具有抑制作用。结论：川陈皮素能抑制体外微管蛋白聚合，这可能是其发挥抗癌作用的可能机制。     

诺必擂停对肝癌Heps的抑制作用及其机制

诺必擂停（nobiletin）是从芸香科植物橘及其栽培变种的果实中提取的一种类黄酮，化学命名为5，6，7，8，3’4’-六甲氧基黄酮（5，6，7，8，3’4’-hexamethoxy flavone）。近年来国外研究表明：诺必擂停具有广泛的药理学作用，尤以抗肿瘤作用倍受关注。目前国内关于其药物效应动力学的研究报道甚少，且关于其对肝癌作用的国内外文献亦较少。本研究利用肝癌实体型Heps所致的荷瘤小鼠模型，研究诺必擂停的抗肿瘤作用及其机制。     

Nobiletin suppresses the development of experimental autoimmune encephalomyelitis mediated by modulation of T helper 17 cell differentiation

Multiple sclerosis is an organ-specific autoimmune disease that targets the myelin antigen in the central nervous system. Nobiletin is a dietary polymethoxylated flavonoid found in citrus fruits. In this study, we investigated how nobiletin affects the disease state and immune responses to myelin oligodendrocyte glycoprotein in experimental autoimmune encephalomyelitis mice. Nobiletin was administered orally from 14 days before immunization until the end of the experiment, and clinical scores were determined. The production levels of interleukin-17A and interferon-γ were measured in a culture supernatant of splenocytes stimulated with myelin oligodendrocyte glycoprotein. In addition, flow cytometric analysis was performed to examine the effect of nobiletin on T cell differentiation in vitro. Admin­istration of nobiletin significantly decreased the clinical score and interleukin-17A production in splenocytes. Furthermore, in vitro analysis showed that nobiletin significantly suppressed Th17 cell differentiation and interleukin-17A production in a dose-dependent manner. The results suggest that nobiletin attenuates experimental autoimmune encephalomyelitis severity through modulation of Th17 cell differentiation.     

参一胶囊联合FOLFOX4方案治疗索拉非尼耐药的晚期原发性肝癌的临床研究

目的 建立高效液相结合一测多评（HPLC-QAMS）法同时测定金果含片中哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的方法。方法 采用Agilent HC C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长为210 nm（哈巴苷和哈巴俄苷）和296 nm（柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B）;体积流量1.0 mL/min;进样量10 μL;柱温30℃。进行专属性试验、线性关系考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验。以橙皮苷为内参物,建立该成分与哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B的相对校正因子（RCF）,并计算金果含片中8种成分的含量,同时与外标法的测定结果进行比较,验证该方法的可行性。结果 哈巴苷、哈巴俄苷、柚皮芸香苷、橙皮苷、川陈皮素、橘红素、麦冬甲基黄烷酮A和甲基麦冬二氢高异黄酮B检测质量浓度的线性范围分别为6.54～163.50、2.27～56.75、8.16～204.00、17.95～448.75、1.88～47.00、0.54～13.50、1.48～37.00和0.76～19.00 μg/mL（r值范围0.999 1～0.999 8）;平均加样回收率及RSD值分别为99.85%（0.76%）、97.62%（1.07%）、100.09%（0.64%）、99.80%（0.71%）、97.48%（1.44%）、98.25%（1.60%）、96.90%（1.03%）、96.87%（1.31%）,方法学验证结果均符合要求。HPLC-QAMS法计算值与外标法实测值无显著性差异。结论 所建立的HPLC-QAMS法简便、有效、准确,可用于金果含片中多指标成分含量的同时测定,为提升金果含片的质量控制方法提供参考依据。     

Box-Behnken效应面法优化陈皮中橙皮苷及川陈皮素提取工艺

目的:通过Box-Behnken效应面法优化陈皮中橙皮苷及川陈皮素的提取工艺.方法:采用HPLC测定橙皮苷及川陈皮素含量,以橙皮苷及川陈皮素提取率的总评“归一值”为指标,通过Box-Behnken试验考察提取温度、液料比、提取时间对提取工艺的影响,对结果进行二项式方程拟合,利用效应面法优化提取工艺并进行预测分析.结果:最佳提取工艺为温度77℃,液料比19:1,提取1.6h,乙醇体积分数70％;预测值与验证值偏差较小(＜5％).结论:优选的提取工艺稳定可行,实际值与预测值吻合度高,预测性良好.     

HPLC法同时测定枳壳中伞形花内酯等9种成分的量

目的建立同时测定枳壳中伞形花内酯、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,(3,4)-七甲氧基黄酮、橘红素、橙皮油素的HPLC方法,测定和比较不同周长大小枳壳中的9种化学成分的量。方法采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-水(用磷酸调p H至3.0);梯度洗脱为0~25 min,30%~50%A;25~35 min,50%~70%A;35~40 min,70%~75%A;40~55 min,75%~100%A。体积流量为1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长320 nm;进样量20μL。结果伞形花内酯、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、3,5,6,7,8,(3,4)-七甲氧基黄酮、橘红素和橙皮油素分别在0.002 18~0.07μg(r=0.999 8)、0.021 8~0.70μg(r=0.999 9)、0.242 5~7.76μg(r=0.999 8)、0.024 38~0.78μg(r=0.999 4)、0.523 76~16.76μg(r=0.999 3)、0.004 13~0.132μg(r=0.999 6)、0.003 13~0.10μg(r=0.999 3)、0.002 75~0.088μg(r=0.999 6)和0.000 93~0.03μg(r=0.999 3)呈良好的线性关系;其平均回收率(n=6)分别为98.50%、98.80%、99.51%、98.43%、99.64%、99.21%、100.03%、98.75%和101.11%。结论该法简便,重复性好,可用于枳壳中伞形花内酯、3,5,6,7,8,(3,4)-七甲氧基黄酮等成分的含量测定。     

超高效液相色谱-质谱联用法分析川陈皮素在大鼠体内的代谢产物

采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用(UPLC-MS/MS)技术分析了川陈皮素在大鼠体内的代谢产物。通过比较给药前后大鼠血浆、胆汁和尿液样品的总离子流色谱图,观察到川陈皮素的7个代谢产物。进一步通过综合分析代谢产物的色谱保留行为、一级和二级质谱信息,推定其中3个为I相代谢产物,分别为川陈皮素脱去一个和两个甲基而得。另外4个被推定为II相代谢产物,分别为I相代谢产物进一步通过硫酸化和葡糖醛酸化生成。上述产物中,4个Ⅱ相代谢产物属首次报道。结果提示了Ⅱ相代谢尤其是葡糖醛酸化在川陈皮素代谢通路中的重要作用,提示葡糖醛酸转移酶的基因多态性以及相关的药物相互作用引起的潜在的川陈皮素活性及毒副作用的变化值得进一步的关注。