大鼠扩张型心肌病形成过程中骨桥蛋白的表达

目的 评价心肌球蛋白所致自身免疫性心肌炎后扩张型心肌病形成中骨桥蛋白的表达变化。方法 用RT-PCR法检测在大鼠免疫接种后当天，第14天、第28天、第42天时的骨桥蛋白表达量。结果 在自身免疫性心肌炎组和扩张型心肌病组心肌骨桥蛋白的表达明显高于空白对照组，在自身免疫性心肌炎形成初期骨桥蛋白大量表达。结论 骨桥蛋白参与调节扩张型心肌病形成过程中的炎症反应和心室重塑。     

Association of osteopontin with ischemic axonal death in periventricular leukomalacia

Osteopontin (OPN) is a bone matrix protein expressed my macrophages and related to the process of tissue calcification, and is also known to protect ischemic cells. To understand how OPN is involved in the process of ischemic axonal death in periventricular leukomalacia (PVL), we examined the immunoreactivity of OPN and ionized calcium binding adaptor molecule 1 (Iba1; microglia/ macrophage marker) at various stages of PVL. OPN immunoreactivity paralleled the number of Iba1-positive foam cells; a finding which suggests the production of OPN protein by foam cells. OPN immunoreactivity was not found in either normal white matter or acute PVL lesions, but was detected at the subacute and chronic stages in swollen and calcified axons bordering the ischemic zone. These findings suggest that OPN is closely associated with death of swollen axons at the periphery of the ischemic zone, regulating the presence or absence of calcification. Received: 20 January 1999 / Revised, accepted: 21 September 1999     

喉鳞状细胞癌组织中CTGF和OPN的表达及其临床意义

目的：研究人喉鳞状细胞癌及其癌旁组织中CTGF和OPN表达水平并探讨两者的相互关系及其临床病理意义。方法：41例喉鳞状细胞癌和20例癌旁组织手术切除标本常规制作石蜡包埋切片，CTGF和OPN染色方法为SP免疫组织化学法。结果：41例鳞状细胞癌CTGF和OPN表达阳性率均为25例（61．0％），其评分值分别为2．41±1．60和3．10±1．63，20例癌旁组织CTGF阳性18例（90％）和OPN阳性3例（15．0％），其评分值分别为4．24±1．42和1．12±0．84，癌组织CGTF阳性率及评分明显低于癌旁组织（x^2=5．44，P〈0．05；t=4．36，P〈0．01），但OPN则相反（x^2=11．44，P〈0．01，t=5．08，P〈0．01）；颈淋巴结未转移和临床分型T1病例CTGF表达阳性率及其评分明显高于颈淋巴结转移和临床分型T3病例（P〈0．01）；颈淋巴结转移、临床分型T1及组织学分级Ⅰ级病例OPN表达阳性率及其评分明显低于颈淋巴结转移、临床分型T3及组织学分级Ⅲ级病例（P〈0．01）；CTGF表达评分与OPN表达评分呈密切负相关（r=-0．56，P〈0．01）。结论：CTGF和OPN可能是反映喉鳞状细胞癌进展、生物学行为、转移发生及预后的重要生物学标记物。     

Bone phosphoprotein of newborn rat calvaria detected histochemically with the cationic carbocyanine dye “Stains-all”

Abstruct The originally mineralized area of a fixed and demineralized specimen of newborn rat calvarium was stained blue with Stains-all, which stained phosphoprotiens, glycoproteins and Ca-binding proteins blue. The material stained blue in the histological sections was solubilized by an acidic solution and found to be the protein (Stains-all positive protein = SAPP). This SAPP was found to consist of two different types of phosphoproteins, which had the same amino acid sequence at the N-terminal region and a quite similar amino acid composition to each other. The minor one was equal to the 44kD phosphoprotein which has previously been reported by Prince et al (J. Biol. Chem., 262, 2900, 1987). The major one was a 66kD phosphoprotein, it's molecular weight being determined by SDS electrophoresis on a 15% polyacrylamide gel. The result of the amino acid analysis and peptide mapping analysis after CNBr cleavage contained no Met. Based on its solubility characteristics at sequential extractions with three acidic solutions (pH 5.5, pH 3.5 and pH 2.6), the histochemically discovered SAPP was believed to be bound to the matrix by a weak ionic bond and covered with mineral. It is suggested that the Met free phosphoprotein is a new protein in the mineralized phase of newborn rat calvaria and participates in the induction of bone mineralization.     

米非司酮对人早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白、绒毛膜促性腺激素-β和p53蛋白表达的影响

目的探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜中骨桥蛋白、绒毛膜促性腺激素-β和p53蛋白表达影响。方法米非司酮组：20例停经5～7周，药流完全的早孕女性。对照组：同期20例相同孕周手术流产女性。流产后即刻取绒毛、蜕膜。采用免疫组织化学半定量法检测其骨桥蛋白、绒毛膜促性腺激素-β和p53的表达情况。结果①米非司酮组的骨桥蛋白表达显著低于对照组（P〈0．01）；②米非司酮组的绒毛膜促性腺激素8表达显著低于对照组（P〈0．01）；③米非司酮组的p53蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01）。结论米非司酮终止早孕的机制可能与绒毛及蜕膜的骨桥蛋白和绒毛膜促性腺激素-β表达下调、p53蛋白表达上调有关。     

gax基因转染对血管平滑肌细胞中基质金属蛋白酶2和骨桥蛋白转录的影响

目的:探讨腺病毒介导gax基因转染血管平滑肌细胞(VSMC)后,VSMC中基质金属蛋白酶2(MMP2)和骨桥蛋白基因转录的变化。方法:以携带大鼠gax基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(AdCMV-gax)转染VSMC后,应用免疫细胞化学染色检NGax蛋白表达的变化,以RT-PCR技术检测VSMC中MMP2 mRNA和骨桥蛋白mRNA的变化。结果:AdCMV-gax转染后:(1)VSMC中Gax蛋白的表达比转染前显著增高(P<0.01); (2)VSMC中MMP2 mRNA和骨桥蛋白mRNA 比未转染组均显著降低(P<0.05)。结论:增强gax基因表达可抑制MMP2和骨桥蛋白的转录。     

骨桥蛋白在低钙和燃煤污染型氟中毒大鼠肾组织中的表达

目的 观察骨桥蛋白(OPN)在低钙和氟中毒大鼠肾组织中的表达,探讨OPN与氟中毒肾损害的关系.方法 1月龄Wistar大鼠48只,雌雄各半,体质量80～100 g.按2×2析因设计将大鼠按质量随机分为4组:对照组、高氟组、低钙组、低钙高氟组,每组12只,雌雄各半.采用合成饲料喂养,高氟组和低钙高氟组饲料中的玉米来自燃煤污染型氟中毒病区,含氟量为100 mg/kg,对照组和低钙组饲料中的玉米来自于非病区,含氟量为5 mg/kg.喂养16周后处死大鼠,观察各组大鼠牙齿变化,计算大鼠氟斑牙检出率.取大鼠肾脏,采用RT-PCR技术及免疫组化技术检测大鼠肾脏OPN蛋白和OPN mRNA表达.结果 对照组和低钙组牙齿生长良好,高氟组、低钙高氟组大鼠均出现明显的氟斑牙,氟斑牙检出率为100%.免疫组化结果表明,OPN主要定位于肾组织的肾小管上皮细胞中.对照组和低钙组肾组织OPN阳性细胞淡染、散在分布,高氟组与低钙高氟组OPN阳性细胞着色较深,广泛分布在肾小管上皮细胞中.OPN蛋白表达显示,高氟组(168.64±13.21)和低钙高氟组(169.26±8.92)高于对照组(145.78±10.26,P均<0.01)和低钙组(149.60±16.84,P均<0.01);OPN mRNA表达显示,高氟组(1.89±0.37)和低钙高氟组(1.94±0.22)高于对照组(1.32±0.26,P均<0.05)和低钙组(1.30±0.18,P均<0.05).高氟影响OPN蛋白和OPN mRNA表达(F=13.821、4.24,P均<0.05),低钙不影响OPN蛋白和OPN mRNA表达(F=2.164、0.58,P均>0.05),但高氟和低钙联合作用时,二者对OPN蛋白和OPN mRNA表达有交互作用(F=6.257、4.32,P均<0.05).结论 过量氟可促使大鼠肾组织的OPN表达增加,提示OPN与氟中毒肾损害程度密切相关,可考虑作为一种氟中毒肾损害的标志,并且,高氟与低钙同时存在时,大鼠肾损害会进一步加重,提示低钙是氟化物损害肾脏的重要环节.     

OPN与C-erbB-2、P53在乳腺癌组织中的表达

目的检测骨桥蛋白(Osteopontin、OPN)与C-erbB-2、P53在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用S-P免疫组织化学技术检测OPN、C-erbB-2、P53蛋白在乳腺癌组织中的表达。结果50例乳腺癌组织中OPN、C-erbB-2、P53蛋白阳性表达率分别为76.0%,62.0%、56%。OPN蛋白表达在肿瘤大小、腋窝淋巴结转移及临床分期患者间差异均有统计学意义(P0.05);C-erbB-2和P53蛋白表达在肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、临床分期及不同ER、PR表达情况的患者间差异均有统计学意义(P0.05)。OPN蛋白表达与C-erbB-2、P53蛋白表达有显著相关性(r=0.332,P=0.019;r=0.351,P=0.012)。结论OPN、C-erbB-2、P53蛋白与乳腺癌的临床病理特征密切相关,联合检测对乳腺癌患者病情评估、预测预后及临床用药具有重要的意义。