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101.
102.
氨甲酰磷酸合成酶单克隆抗体的制备、鉴定及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:制备抗人氨甲酰磷酸合成酶(CPSI)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定与应用.方法:将正常成人肝组织匀浆离心并分离线粒体,用线粒体总蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备 mAb,并通过间接ELISA法、Western blot、免疫组化及免疫荧光染色的方法对mAb进行特性鉴定,通过免疫沉淀联合质谱、Uni-ZAP XR表达文库筛选鉴定抗原,借助免疫捕获的方法用抗体来分离复合物.结果:获得3株可稳定分泌抗人CPSI mAb的杂交瘤细胞系.mAb的Ig亚类(型)为IgGl(K),该mAb可用于ELISA检测、Western blot、免疫组化、免疫荧光染色、免疫沉淀实验和复合物的分离.结论:成功制备了抗人CPSI的mAb,为CPSI的研究提供了有力的工具. 相似文献
103.
NO及NO合成酶与感染性休克 总被引:7,自引:1,他引:7
感染性休克病理生理学过程十分复杂。NO在其中的作用既具有有害的一面,同时也存在有利的一面。受内毒素、细胞因子等诱导,iNOS表达上调并产生大量NO,引起循环衰竭、组织细胞损伤以及通过调节炎症介质基因表达扩大全身炎症反应。另一方面,eNOS所产生的NO对机体具有保护作用。然而,感染性休克时,eNOS蛋白质合成及其功能受到损害,反而成为血管内皮功能失常、诱发多器官功能障碍的重要原因。 相似文献
104.
目的: 探讨单磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶(AMPK)对心肌肥厚的影响及可能涉及的作用机制。方法: 通过对大鼠行腹主动脉缩窄术(TAC)引起压力负荷增加,造成心肌肥厚的模型。术后24 h起经皮下注射AMPK的特异性激活剂AICAR(0.5 mg·kg-1·d-1)直至术后7周。处死动物前,对大鼠进行超声心动学指标的检测和血清游离脂肪酸浓度测定;处死动物,取心脏称重后计算心脏重/体重比值,测量心肌细胞的平均直径、心肌中的游离脂肪酸含量、过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)和肉碱棕榈酰转移酶(CPT-I)的mRNA表达。结果: (1)心肌肥厚+AICAR组大鼠的心脏重/体重比值、心肌细胞平均直径、血清及心肌中游离脂肪酸的浓度明显低于心肌肥厚对照组;(2)心肌肥厚+AICAR组大鼠心肌PPARα及CPT-I的mRNA表达明显高于心肌肥厚对照组;(3) 心肌肥厚+AICAR组大鼠心脏超声心动学指标:左室后壁舒张末期厚度、左室舒张、收缩末期内径 (PWT, LVDD, LVSD) 低于心肌肥厚对照组,左室短轴缩短率 (FS%) 则高于心肌肥厚对照组。结论: 活化的AMPK可能通过增强心肌脂肪酸氧化从而抑制压力负荷增加引起的心肌肥厚。 相似文献
105.
黄俊军 《医学分子生物学杂志》1998,(5)
脂肪酸结合蛋白(FABP)是一族多源性的小分子胞内蛋白质,广泛存在于哺乳动物体内的多种细胞。它在长链脂肪酸的转运、代谢调节中扮演着一个重要角色。脂肪酸结合蛋白的异常还可能与心肌肥大、心肌缺血、冠心病、急性和慢性酒精中毒、糖尿病以及癌症等有关。 相似文献
106.
目的:探讨高糖对体外培养Schwann细胞生长及细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化的影响.方法:按照培养液中葡萄糖浓度的小同,分为对照组与高糖组.用MTT法检测Schwann细胞生长情况;用ELISA法检测对照组与高糖组ERK1/2磷酸化的程度,以及加入神经源性一氧化氮合成酶(nNOS)抑制剂后ERK1/2磷酸化的程度.结果:高糖浓度下,细胞虽有增殖但幅度及时程明显低于对照组,高糖抑制Schwann细胞生长;随着精浓度的升高.ERK1/2磷酸化的程度逐渐增加,并与加入nNOS抑制剂有相似的表现.结论:高糖抑制Schwann细胞生长,并且降低nNOS的量,减弱一氧化氮(NO)对ERK1/2的抑制作用,导致ERK1/2磷酸化水平升高. 相似文献
107.
弓形虫分离株表膜脂肪酸的色质谱分析 总被引:2,自引:0,他引:2
本文采用有机质谱法(GC/MS)对弓形虫不同分离株,虫体表膜脂肪酸的种类和含量进行观察分析,实验结果表明弓形虫速殖子细胞膜含有6种主要脂肪酸,范围在C14-C18之间,分别为肉豆寇酸、棕榈油酸、软脂酸、硬脂酸、油酸和亚油酸,而油酸和软脂酸约占总脂肪酸含量的70%(52-84%)。本室自畸胎儿分离获得的SH多个虫株的脂肪酸含量及组分与国际标准人源RH株相一致,而SH4,SH(10)与PP株,RT株相似,与平行观察的人和哺乳动物细胞膜的脂肪酸在含量与组分上均有明显差异,为鉴定分离的弓形虫株提供了实验依据。 相似文献
108.
目的探讨环氧化物酶-2(cyclooxygenase type 2,COX-2)及Ⅰ型前列腺素合成酶(membrane associated prostaglandin E-1,mPGES-1)在人颈动脉粥样硬化斑块中的表达变化及作用机制。方法收集24例人颈动脉粥样硬化斑块标本和10例肠系膜动脉标本做对照组,应用免疫组织化学及逆转录PCR方法测定COX-2及mPGES-1mRNA表达水平,Western印记方法检测COX-2及mPGES-1的蛋白表达水平。比较不同程度动脉粥样硬化组织间COX-2、mPGES-1 mRNA表达水平及蛋白表达水平。结果颈动脉粥样硬化斑块组的免疫组织化学染色检测COX-2和mPGES-1呈阳性表达,斑块组COX-2 mRNA和mPGES-1 mRNA表达与对照组相比上调,差异有统计学意义(P<0.05);COX-2及mPGES-1 mRNA上调水平相关(P<0.05);颈动脉粥样硬化斑块的COX-2蛋白表达上调水平与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);颈动脉粥样硬化斑块COX-2、mPGES-1 mRNA及蛋白表达水平与病理损害程度有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论COX-2及mPGES-1基因表达水平上调可能是进展性动脉粥样硬化损害的关键因素。 相似文献
109.
广东汉族人蛋氨酸合成酶基因多态性 总被引:7,自引:2,他引:7
目的了解广东汉族人蛋氨酸合成酶基因的分布特点.方法应用聚合酶链反应技术对211例正常人蛋氨酸合成酶基因进行扩增,进行图谱分析.并结合文献进行了不同种族间的分析比较.结果广东汉族人群中MS基因型以AA最多见,AG次之.AA基因型频率为0.8009、AG为0.1802、GG为0.0189.A基因型频率为0.8910、G为0.1090.与其他种族相比较,MS基因型在中国正常人群中的分布与白种人群中的分布差异显著.结论蛋氨酸合成酶基因因多态性在不同种族间分布存在着明显的差异. 相似文献
110.
目的探讨二甲双胍治疗前后多囊卵巢综合征大鼠血清瘦素及卵巢ob mRNA表达的变化。方法选取60日龄雌性SD大鼠45只,随机分为:空白对照组(15只);PCOS组(15只);二甲双胍治疗组(15只)。后两组先参照PoretskyL[1]等方法复制大鼠模型,造模成功后,PCOS组喂服生理盐水,治疗组喂服二甲双胍,21日后脱臼处死各组大鼠并取材。采用放免法检测3组血清瘦素(Leptin)水平的变化,用荧光定量PCR法检测卵巢ob基因的表达。结果PCOS组大鼠血清Leptin水平显著升高,卵巢ob mRNA表达增高(P〈0.05);二甲双胍治疗后血清Leptin水平下降,卵巢ob mRNA表达降低(P〈0.05),但仍略高于对照组水平。结论二甲双胍可以减少脂肪酸氧化,减少糖-脂肪酸转化,降低血糖,从而降低瘦素及其受体的表达。 相似文献