放射免疫分析室工作环境污染情况调查

放射性同位素的使用发展很快，它在许多行业得到了应用，尤其在医学上广泛应用Ⅰ生产放免试剂盒，作为体外检测手段，测定人体血清中非激素蛋白质、激素类及药物的浓度等。为了解上海市使用放免试剂盒单位工作的环境污染情况，以便采取相应的防护措施，减低对工作人员健康的影响，我们对31家医院、科研单位中的放射免疫分析测定室(以下简称放免室)进行了工作环境污染情况的调查，现将调查结果报告如下。     

人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制

目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l～1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%～5.9%,3.7%～6.5%.与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应.稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7 d.426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0～12 U/ml.用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995.结论试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.     

ELISA试剂盒在诊断幽门螺杆菌感染中的应用评价

由于幽门螺杆菌在慢性胃十二指肠疾病中的重要致病作用,正确诊断其感染十分必要。临床医生和检验人员迫切需要了解目前市场上种类繁多的检测幽门螺杆菌抗体的ELISA试剂盒是否能用于临床常规检测,各种试剂盒性能如何,结果是否一致,如何解释试验结果,存在哪些问题等等。本文对上述问题作一简要综述。     

近代甲状腺功能检查新策略的初步临床评估

本文观察研究了九组共263例循环血TT4、TT3、FT4、TF3，经数理统计和临床综合分析判断，这些测定值生理，病理含义，临床价值不尽雷同。TT4、TT3是现今临床甲状腺功能检验常用，多用、频用的方法，仍不失为一种金试验。FT4、FT3测定方法灵敏，方法学上仍有争论，TT4、TT3留存的临床问题，FT4、FT3亦常存在，且易发生；FT4、FT3试剂盒价贵，在价格论——效益分析上也应商榷。当前我国临床应用策略上似仍以TT4、TT3、FT3、s-TSH；甲状腺疾病；非甲状腺疾病。     

重组猪戊型肝炎病毒ORF2区主要抗原域的原核表达及鉴定

目的：在大肠杆菌中表达猪戊型肝炎病毒ORF2区主要结构蛋白,并对其进行血清学鉴定。方法：通过RT-PCR技术从一份猪粪中扩增并克隆戊型肝炎病毒主要的结构基因片段,将该片段插入pET-32a表达载体,在原核系统中融合表达蛋白,Western blot和间接ELISA方法分析该蛋白的抗原性。结果：SDS-PAGE分析结果表明,获得45kD的目的蛋白,该重组蛋白可以与HEV阳性血清反应,而不与阴性血清反应,表明该蛋白具有良好的抗原性。结论：本研究获得了猪戊型肝炎病毒重组抗原,可与HEV阳性血清产生特异性的结合反应,可以作为诊断用的重组蛋白,为研制敏感、特异的HEV诊断试剂盒,行之有效的HEV基因工程疫苗及为HEV感染的预防和临床治疗提供资料。     

诺如病毒表达衣壳蛋白单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

目的:建立能稳定分泌抗诺如病毒(Norovirus)N蛋白的单克隆抗体(mAb)细胞株, 制备抗诺如病毒核衣壳蛋白的mAb, 为诺如病毒的早期快速检测及致病机制的研究提供实验材料.方法:用E.coli表达的GⅡ组广州株NVgz01(DQ369797)Norovirus-N蛋白免疫BALB/c小鼠, 通过PEG使小鼠脾细胞和Sp2/0细胞融合, 使用HAT选择性培养基培养融合细胞, 用间接ELISA和Western blot测定mAb的效价、免疫球蛋白亚型和mAb的特异性, 并将各mAb之间进行配对.结果:通过细胞融合和克隆化, 共筛选出4株分泌抗Norovirus-N蛋白抗体的杂交瘤细胞株N2C3、 N7C2、 N4B1、 N8A9.间接ELISA和Western blot检测结果表明, 这4株mAb都可以与E.coli表达的GⅡ组广州株Norovirus-N蛋白产生特异性反应, 并且能与天然粪便标本中的GⅡ组Norovirus产生特异性反应.配对结果显示N2C3和N7C2之间配对, 对表达蛋白和天然病毒都具有较强的检测灵敏度.结论:获得了诺如病毒GⅡ组特异性mAb, 为制备免疫诊断试剂盒及致病机制的研究奠定了基础.     

丙型肝炎病毒(HCV)荧光PCR(F-PCR)试剂盒的研制及与免疫学方法的比较

目的：用荧光PCR（Fluorescence PCR,F-PCR）方法研制丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus,HCV)RNA检测试剂盒，通过临床验,春性能，并与免疫学方法比较。方法：F－PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测，避免了PCR后处理导致的假阳性污染；又采用了荧光检测技术，可以提高检测的灵敏度。结果：设计合成了HCV F－PCR诊断试剂盒。检测了512份临床血清标本，以美国Abbott公司的HCV ELISA诊断试剂盒和美国Biotronics公司的HCV荧光RT－PCR诊断诊断试剂盒（B－PCR）为对照。阳性率30.5%，灵敏度97.3%，特异性98.1%。结论：F－PC的灵敏度显著优于ELISA，也高于B－PCR；三者的特异性无统计学差异。F－PCR试剂盒可以检测HCV的真实感染情况，对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。