银屑病的蛋白组学与中医相关研究探析

蛋白组学作为近年来一门较为新型的学科和研究手段,已被应用于生命学科的各领域。笔者主要从中医证候与辨证分型、中医药治疗与蛋白组学研究在银屑病发病机制和治疗等方面的研究及应用进行综述,以期找出传统医学和现代医学在研究中相互渗透的切入点,并希望能为银屑病的诊断与治疗研究提供一些参考资料和依据,进一步为银屑病患者提供更好的辨证施治。     

差异蛋白组学在中医药防治肾间质纤维化中的应用展望

慢性肾衰竭是严重威胁全球人类健康的一类重大疾病,而肾间质纤维化（RenalInterstitialFibro．sis,RIF）是慢性肾脏病进展至慢性肾衰竭终末阶段的病理表现和途径。大量的,临床及实验研究证实中医中药在防治RIF中具有一定的优势和特色,但其确切的作用机制及作用靶点不清,从而影响到其进一步的推广应用,因此利用现代分子生物学技术,研究中医中药在肾间质纤维化防治中的作用机制及靶点,将有利于中医中药的进一步发展。     

原发性肝癌介入治疗围手术期不同中医证型的血清蛋白表达差异

目的 探讨原发性肝癌介入治疗围手术期不同中医证型的血清蛋白差异表达,并分析其意义。方法 将154例原发性肝癌患者按中医辨证分为肝郁证（37例）、脾虚证（45例）、湿热证（18例）、血瘀证（28例）及阴虚证（26例）,应用表面加强激光解析电离化飞行时间质谱法（surface enhanced laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,SELDI TOF MS）分析其血清蛋白指纹图谱,并结合中医证候特点,探讨肝癌介入治疗围手术期不同中医证型的血清蛋白差异表达。结果 介入前1周,M/Z为3 392、4 970、5 911、6 200、8 575 Da的血清蛋白峰在各证型间的表达比较,差异有统计学意义（P<0.05,P<0.01）;上述5个差异蛋白峰同时出现于脾虚证和血瘀证中。介入后1周,阴虚证M/Z为8 575 Da的血清蛋白峰表达下调,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 肝癌介入治疗围手术期不同证型间出现血清差异蛋白质峰。     

清胰颗粒干预重症急性胰腺炎后胰腺蛋白组学表达差异性研究

目的观察清胰颗粒(Qingyi Granules,QYG)对牛黄胆酸钠(sodium tauro cholate,STC)诱导大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)胰腺组织中总蛋白表达变化的影响。方法 36只SD大鼠经胰胆管逆行注射5%STC诱导SAP,随机分为SAP组和QYG治疗组(QYG组),每组18只。建模成功后,QYG组每12h1次QYG对水(W∶W=1∶1)灌胃[1mL/(100g·只)],SAP组以生理盐水替代,共给药4次。提取两组大鼠胰腺组织总蛋白行双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)、荧光染色和图谱分析,选择48h两组间差异表达超过4倍的蛋白质点进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物信息学分析,观察两组蛋白质点的差异。结果 5%STC诱导出SAP大鼠模型,胰腺组织有典型病理学改变。经凝胶图像处理软件分析胰腺组织蛋白组学变化:48h时两组有22个差异点,用药后5个点蛋白上调,17个点下调。48h时间点比较两组表达差异超过4倍且稳定的蛋白质斑点共有9个,质谱分析和数据库检索共鉴定出7种蛋白质,分别是丝氨酸蛋白酶抑制剂b1a(39kb)、丝氨酸蛋白酶抑制剂b1a(43kb)、硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅳ(PrxⅣ)、糜蛋白酶样蛋白(Clps)、γ-肌动蛋白(Actg1)、谷氨酰-脯氨酰tRNA合成酶(Eprs)、短链羟酰辅酶A脱氢酶(Hadhsc)。从功能分析,这些蛋白与SAP胰腺病理损伤过程中信号传导相关。结论比较蛋白质组学能较好地反映QYG对SAP大鼠胰腺组织中差异表达蛋白的影响,研究差异表达蛋白有可能为QYG治疗SAP提供新的理论基础和分子靶点。     

香砂六君丸对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏线粒体蛋白组学的研究

目的:应用蛋白质组学的方法检测非酒精性脂肪肝大鼠肝脏线粒体中差异蛋白,探讨香砂六君丸治疗非酒精性脂肪肝的作用机制。方法:将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组与治疗组,每组8只。采用高脂饲料喂养法复制非酒精性脂肪肝模型,香砂六君丸(1.35 g/kg·d)灌胃4周治疗后取材,采用i TRAQ技术进行差异蛋白的检测。结果:与正常组大鼠相比,模型组大鼠线粒体蛋白表达具有统计学意义的差异蛋白共61个。与模型组大鼠相比,香砂六君丸组大鼠线粒体蛋白表达有统计学意义的差异蛋白共48个。3组大鼠共同的线粒体蛋白表达有统计学意义的差异蛋白有19个。结论:香砂六君丸可能通过调节线粒体能量代谢的机制以发挥治疗非酒精性脂肪肝的作用。     

消岩汤通过HSPA5逆转肺腺癌耐药的研究

目的 分析肺腺癌耐药细胞株A549/DDP在中药复方消岩汤作用后细胞的差异蛋白并寻找相关耐药靶点。方法 通过Label-free蛋白组学筛选出两组关于耐药方面的差异蛋白,利用GO富集分析,PPI蛋白相互作用网络图的构建筛选核心蛋白,Western blot及qRT-PCR方法验证核心蛋白及基因的表达;利用CCK8法检测A549/DDP细胞增殖活力情况,利用流式细胞术检测A549/DDP细胞凋亡情况。在上调HSPA5蛋白表达的基础上,检测消岩汤对A549/DDP细胞增殖及凋亡的影响,以及A549/DDP细胞对顺铂耐药性的影响。结果 在中药复方消岩汤作用后的A549/DDP细胞蛋白质谱中找到29种耐药相关差异蛋白质,其中14种上调,15种下调。通过PPI蛋白网络互做分析得出核心蛋白,选择HSPA5进行体外实验验证,结果显示与对照组相比,中药复方消岩汤可以降低A549/DDP细胞中HSPA5蛋白及基因的表达,与蛋白组学结果一致。CCK8及细胞凋亡实验显示,消岩汤可以抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,增强耐药细胞对顺铂的敏感性;上调HSPA5蛋白表达,消岩汤抑制细胞生长及增强细胞对顺铂敏感性的能力减...     

狼疮性肾炎热毒炽盛证和脾肾阳虚证的蛋白组学研究

目的:应用蛋白质组学技术研究热毒炽盛型和脾肾阳虚型狼疮性肾炎及正常人之间的蛋白质差异,寻找热毒炽盛型和脾肾阳虚型狼疮性肾炎的相关蛋白及生物标记物。方法:采集狼疮性肾炎患者与正常人的血清,应用双向凝胶电泳、荧光染色及质谱分析技术分析其血清蛋白质表达差异,并对差异蛋白质进行分析。结果:发现狼疮性肾炎患者热毒炽盛型与脾肾阳虚型比较表达的差异点有5个,热毒炽盛型高表达的蛋白质是Ig mu chain C和间α-胰蛋白酶抑制因子重链H4;脾肾阳虚型高表达的蛋白质是细胞角蛋白-10。正常人与狼疮性肾炎患者的差异点有4个,狼疮性肾炎高表达的蛋白质是α1-抗胰蛋白酶和α1-抗糜蛋白酶,正常人高表达的是二硫键异构酶A6蛋白。结论:正常人与狼疮性肾炎患者的血清蛋白质表达有差异,这些差异蛋白可能有助于揭示狼疮性肾炎的发病机制或作为其新的生物标记物,对狼疮性肾炎的诊断及治疗有重要意义;热毒炽盛型与脾肾阳虚型狼疮性肾炎患者的血清蛋白质表达有差异。提示,同一疾病不同中医证型间的蛋白质表达不同,利用蛋白质组学技术有望对中医证候的发生机制进行阐释。     

MALDI质谱成像的样本制备技术及应用研究进展

MALDI质谱成像技术(Maldi tof ImagingMass Spectrometry,MALDI-IMS),是利用MALDI质谱技术将得到的蛋白组学数据,结合计算机辅助成像产生分子图像,进而描绘出组织上已知及未知分子分布情况的新技术。该技术已被广泛应用于生命科学的很多领域,如动植物生理学、病理学[1-3]、药物研发[4-6]等。1样品制备技术MALDI质谱成像实验的关键是样品的制备[7],它主要包括冰冻切片的制备和基质的选择及应用等。     

乳腺癌细胞膜蛋白的SELDI-TOF-MS分析

目的比较乳腺癌细胞株和正常乳腺上皮细胞膜蛋白指纹图谱,为乳腺癌亚细胞蛋白组学的研究奠定基础。方法试剂盒提取两株乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MCF-7及一株乳腺正常上皮细胞HBL-100的膜蛋白,SEL-DI-TOF-MS分析蛋白指纹图谱,寻找差异蛋白。结果在分子量2kD-100kD范围内3株细胞均可检测到近100个蛋白点,MDA-MB-231和MCF-7与HBL-100相比,膜蛋白差异点分别为32个和34个(P<0.05),其中7.8kD,8.3kD和8.8kD的蛋白在两株癌细胞中表达均降低,9.6kD的蛋白在两株癌细胞中表达均增高。结论 SELDI-TOF-MS可以快速灵敏地检测到乳腺癌亚细胞蛋白水平的差异,为乳腺癌早期诊断提供依据。     

蛋白组学技术在泌尿学研究中的应用

人类基因组计划的实施使人类获得了空前数量的DNA序列信息资源Ⅲ。人们利用基因组学技术在DNA和RNA水平开展了基因与各种疾病关系的研究，取得了很大的成就。与此同时，研究人员也逐渐认识到作为细胞结构和功能主要执行的蛋白质虽由基因编码，但两之间却不是线性对应关系：基因组在很大程度上是相对稳定的，而蛋白质的质和