PENA方法的建立及与ELISA IgM检测CMV的比较

目的　介绍一种敏感、稳定、快速、简便的实验室检测CMV的方法 ,同时探讨该种新方法与ELISA检测CMV方法的优、缺点。方法　对 5 5 2例病人应用间接荧光免疫法测定细胞核中的特异病毒早期抗体 (PENA)和ELISA法测定IgM抗体。结果　PENA方法 :强阳性 88例 ,阳性率 15 4 9% ,弱阳性 2 73例 ,阳性率 5 9 4 6 % ;ELISA -IgM方法 :阳性 34例 ,阳性率6 16 %。结论　PENA方法操作简便 ,与ELISA方法相比较 ,可对CMV感染进行早期测定及诊断 ,并可区分既往感染和即时感染 ,具有敏感性和稳定性 ,是测定小儿CMV感染的一种较好的方法     

醛固酮对肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物1基因表达的影响

目的:探讨醛固酮(ALD)对大鼠肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物l(PAI-1)基因表达的影响.方法:(1)以不同浓度的ALD(10-11、10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L)刺激肾小球系膜细胞72 h后,用半定量RT-PCR法检测该细胞中PAI-1 mRNA的表达.(2)以10-7 mol/L的ALD刺激肾小球系膜细胞不同时间(12、24、48、72 h)后,用半定量RT-PCR法检测该细胞中PAI-1 mRNA的表达.结果:半定量RT-PCR结果显示,ALD促进培养的大鼠肾小球系膜细胞PAI-1mRNA的表达,且具有浓度依赖性和时间依赖性的特点.结论:ALD促进大鼠肾小球系膜细胞PAI-1 mRNA的表达,从而抑制细胞外基质的降解,促进肾小球疾病进展.     

荧光定量PCR检测宫颈脱落细胞和组织标本人乳头瘤病毒感染的比较分析

目的探讨利用宫颈标本建立快速、灵敏检测宫颈人乳头状瘤病毒(HPV)16.18型感染的方法.方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,检测165例异常宫颈脱落细胞和宫颈活检组织标本HPV 16.18型感染状况.结果 FQ-PCR检测宫颈细胞标本LSIL 60例,HSIL51例,ASC 40例,鳞状细胞癌13例.HPV16.18型DNA阳性率分别为31%、68%、30%、12/13.活检组织标本:CIN Ⅰ级阳性率42%(38/39),Ⅱ为12/19,Ⅲ级为11/15,鳞癌为74%(23/31).结论 FQ-PCR方法检测宫颈细胞标本HPV16.18型感染,具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,适用于大规模筛查和在临床日常工作中采用.     

脂质、血红蛋白、胆红素标本对乙肝病毒DNA荧光定量测定的影响

目的:探讨脂血、高胆红素和溶血标本对乙肝病毒DNA(HBVDNA)荧光定量测定结果的影响。方法:将乙肝大三阳高脂血和非脂血、溶血血清和未溶血血清同时作HBVDNA荧光定量检测;将HBVDNA阴性黄疸血清和HBVDNA阴性正常血清与来自同一份乙肝大三阳血清混合,在相同条件下进行HBVDNA荧光定量。结果:乙肝大三阳溶血与未溶血样本HBVDNA含量都在同一数量级。乙肝大三阳高脂血的HBVDNA含量明显低于对照标本。高黄疸血清、正常对照血清与相同的HBVDNA阳性模板组合后所测得的HBVDNA结果无差异。结论:脂血对HBVD-NA定量测定有严重干扰;溶血样本、高胆红素样本对HBVDNA测定结果无影响。     

分子定量方法在病毒学中的应用新进展

近年来对生物样品中核酸失发子水平定量技术已开始应用于基础与临床研究中，本文介绍体内导向试验应用成功所获得的主要资料，用以表明这些方法在更详细地了解病毒性疾病自然史和实施监控特异性抗病毒疗效中的价值，并着重讨论已获得的病毒学资料中几种持续病毒感染的定量，直接体内研究，包括ＨＩＶ，ＨＢＶ和ＨＣＶ。     

人体神经定量电流感觉检测系统的研制

电流感觉阈值测试是人体神经感觉功能的定量感觉测试方法的一种．它采用特定频率的正弦恒电流刺激人体神经末梢感受器，检测人体对电流刺激的最小感受量，用于定量评估神经功能。本文回顾了国际上电流感觉阈值测试技术的发展与现状，介绍了我们开发的人体神经定量电流感觉检测系统。该系统采用生理心理统计算法过滤人体主观感受的影响，具有双盲全自动测量功能，测量结果具有很好的重复性。     

荧光钙离子指示剂在活细胞钙利用研究中的应用

细胞钙的转运和利用及其与某些疾病发生和发展的关系是当前生理功能微观研究中的重点之一。是生命科学和基础医学研究中的前沿课题。应用荧光钙离子指示剂研究单个活细胞中钙的变化是近年兴起的一门新技术,具有广阔的应用前景。本刊特请加拿大McMaster大学教授关超然博士撰写此文并译出,以飨读者。     

β-1,4-半乳糖基转移酶Ⅱ、Ⅴ表达的亚细胞结构定位研究

为了研究β-1,4-半乳糖基转移酶 和 (β-1,4-Gal T- and )蛋白表达的亚细胞结构定位 ,本实验构建了β-1,4-Gal T- 和 融合绿色荧光蛋白 (GFP)表达质粒 ,分别将构建的质粒转染到 PC12细胞和肝癌 772 1细胞中 ,在荧光显微镜下观察β-1,4-Gal T- 和 在其中表达的亚细胞结构定位。发现 ,β-1,4-Gal T- 和 主要表达在这两种细胞的细胞核旁的 Golgi复合体 ,说明它们主要分布在 Golgi复合体上。提示它们可能是在 Golgi复合体参与蛋白质的糖链修饰     

间质性肺疾病患者呼吸困难的定量评价研究

目前由于对人脑机能的认识尚不完备 ,呼吸困难的产生机制尚不完全清楚 ,而对于呼吸系统疾病 ,客观定量评价呼吸困难 ,明确其产生原因 ,并采取相应的治疗对策 ,则具有现实的临床意义。评价呼吸困难的方法主要有Ｈｏｕｇｈ -Ｊｏｎｅｓ方法 ,Ｂｏｒｇｓｃａｌｅ ,ＢＳ法 ,视觉类比分度 (ｖｉｓｕａｌａｎａｌｏｇｓｃａｌｅ,ＶＡＳ) [13] 。由于为定性或半定量的方法 ,临床科研中不能满足需要。近年来由于运动负荷试验研究的深入 ,产生了应用运动负荷试验中每分钟氧摄取量 ( ＶＯ2 )定量评价呼吸困难的方法 ,使呼吸困难定量评价有了实用的客观…     

川赤芍实时荧光定量PCR内参基因的筛选与验证

川赤芍与芍药共同作为《中国药典》著名药材赤芍的基原植物,具有重要的药用价值,且在花卉市场的潜力巨大。筛选稳定可靠的内参基因是开展川赤芍分子研究的必要前提。该研究从川赤芍的转录组数据中选取Actin和GAPDH 2个内参基因作为候选基因,利用实时荧光定量技术(qRT-PCR)检测2个候选基因在川赤芍的不同组织(韧皮部、木质部、茎、叶、叶柄、子房)和不同生长时期(萌动期、开花期、休眠期)的表达水平,然后利用geNorm、NormFinder、BestKeeper、ΔCT和RefFinder综合分析2个内参基因表达的稳定性,结果表明Actin和GAPDH在川赤芍不同组织和不同生长时期中的表达模式均稳定。该研究进一步检测川赤芍转录组数据中8个基因(Pv-TPS01、Pv-TPS02、Pv-CYP01、Pv-CYP02、Pv-CYP03、Pv-BAHD01、Pv-UGT01、Pv-UGT02)在不同组织中的表达水平,结果表明,以Actin和GAPDH分别作为内参基因,8个基因在川赤芍不同组织部位的表达趋势均一致,验证了Actin和GAPDH作为川赤芍内参基因的可靠性。综上,该研究发现Actin和...