质粒型单纯疱疹病毒载体的构建及其在真核细胞中的表达

利用基因工程技术构建成功质粒型Ⅰ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－１）载体ｐＨＳＶ，其中含有ＨＳＶ－１包装信号序列和ＨＳＶ－１复制起点，以及ＨＳＶ－１ＩＥ６８启动子。为验证其构建是否成功，在其ＩＥ６８启动子下游的多克隆位点上插入了Ｅ．ｃｏｌｉＬａｃＺ基因，构建成ｐＨＳＶＬ质粒。用ＨＳＶ－１温度敏感株（ｔｓＫ株）超感染传代细胞后，将这种质粒转染入该细胞，ｐＨＳＶＬ可在辅助病毒ＨＳＶ－１ｔｓＫ（允许温度为３１℃）存在的条件下被包装成病毒颗粒，由此得到的混合病毒含有ＨＳＶ－１ｔｓＫ和ｐＨＳＶＬ假病毒颗粒，收获后再感染培养的Ｖｅｒｏ细胞，原位检测β－半乳糖苷酶活性呈阳性。同时用ｐＨＳＶＬ病毒接种体外培养的ＳＤ大鼠胚胎脊髓运动神经元，用Ｘ－ｇａｌ原位检测β－半乳糖苷酶的活性，亦发现有阳性的神经元存在。说明载体ｐＨＳＶＬ携带的报告基因ｌａｃＺ在这两种真核细胞中均得以正确表达。报告基因可为其它目的基因所代替，可用于神经生理、病理以及神经系统疾病基因治疗的实验研究。     

双侧甲状腺转移性肾透明细胞癌1例

患者女性,56岁,因颈前无痛性肿物1个月入院。初诊:甲状腺双侧肿瘤。患者于7年前因肾癌行右肾癌切除术。查体:一般情况好,双侧甲状腺可触及一表面光滑,随吞咽上下移动的肿物;甲状腺功能正常。X线示气管向左移位。腹部(B超、彩色多普勒)超声示:甲状腺右叶内探及一4·7cm×3·2cm椭圆形低回声团块,边界清,规整,内部滋养层血管增多,血流丰富;左叶内探及一3·0cm×2·0cm的低回声区,边界欠规整,内部回声不均匀,血流较丰富呈“花环征”。SPECT示甲状腺位置正常,两叶明显肿大,形态不完整,双侧甲状腺示踪剂分布不均匀,右叶中下部见一较大示踪剂缺…     

晚期结肠癌病人肠系膜淋巴结高内皮微静脉超微结构观察

目的：探讨晚期结肠癌病人肠系膜淋巴结内高内皮微静脉超微结构的变化及其对淋巴细胞进入肠系膜淋巴结的影响。方法：采用透射电镜观察晚期结肠癌病人肠系膜淋巴结内高内皮微静脉的超微结构。结果：晚期结肠癌病人的肠系膜淋巴结内，高内皮微静脉管壁内皮细胞的细胞核出现大量齿状切迹，细胞膜出现大量脂状突起。质膜小泡，AWeibel-Palade小体，高尔基复合体减少，线粒体多出现肿胀，扩张，部分基膜不完整。高内皮微静脉管壁内少见淋巴细胞穿越。结论：晚期结肠癌病人肠系膜淋巴结内，高内皮微静脉的超微结构受到不同程度的影响和破坏，导致淋巴细胞进入肠系膜淋巴结的能力减弱。     

αvβ3与恶性肿瘤的侵袭和转移

αvβ3 是整合素家族中的一员 ,可表达于多种不同组织来源的恶性肿瘤 ,通过诱导肿瘤血管的生成 ,调节肿瘤细胞凋亡和水解细胞外基质等作用 ,参与肿瘤的侵袭和转移过程。深入研究αvβ3 在恶性肿瘤中的表达与功能 ,有助于进一步认识恶性肿瘤侵袭转移的分子机制 ,也为恶性肿瘤的诊断和预后判断提供了新的指标     

伴玻璃样间质的透明细胞癌二例

例1男,76岁。因双下肢浮肿2个月余,声嘶1周于2000年3月12日入院。体检:一般情况差,左颈部触及肿大淋巴结约2cm×2cm大小,血生化检查提示肾功能及呼吸功能衰竭,后因呼吸困难作气管插管时舌根部见一菜花状肿瘤约3.0cm×2.5cm大小,行颈淋巴结及舌根部肿瘤活检术。术后1个月患者死于慢性肾炎所致肾功能及呼吸功能衰竭。病理检查:切除淋巴结大小2cm×2cm,切面灰白色,质硬。舌根部肿瘤大小3.0cm×2.5cm,表面呈菜花状,切面灰白色,质硬。镜下观察:舌根部肿瘤细胞形态较一致,排列呈互相吻合的小梁状、岛状或片状。巢间有大量玻璃样变的纤维性间质。瘤…     

结肠癌细胞表达的细胞外基质Reelin在淋巴结转移中的作用

探讨一种由结肠癌细胞表达的细胞外基质Reelin在淋巴结转移中的作用.构建了99例结肠癌及其癌旁组织的组织芯片进行免疫组织化学染色,探测其表达强度并结合临床资料进行分析.结果显示,Duke's A,B,C,D分期与结肠癌细胞Reelin表达强度无关,结肠癌细胞Reelin表达强度与其淋巴结转移潜能相关,结肠癌细胞Reelin表达强度每增加一个单位,其转移进入淋巴结的能力将增加3.523倍.结肠癌细胞表达Reelin与其淋巴结转移密切相关,Reelin可以作为结肠癌淋巴结转移预测的一个新指标.     

荷瘤小鼠红细胞免疫功能观察

本实验利用小鼠可移植性组织细胞型淋巴瘤ＬⅡ接种于近交系６１５小鼠右后肢爪垫皮下，按宿主荷瘤时间以及肿瘤生长发展的不同阶段分期分批处死动物，每批动物均从眼房静脉窦取血，检测荷瘤小鼠红细胞Ｃ３ｂ受体花环率（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ），红细胞免疫复合物花环率（ＲＢＣ－ＩＣＲ），观察荷瘤动物在肿瘤发展的几个不同时期红细胞免疫功能的变化情况。结果显示，荷瘤小鼠的ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ明显低于正常，并且随着肿瘤的发展呈下降趋势。在肿瘤侵袭早期和中期ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲＲ下降十分迅速，而到肿瘤转移开始至转移晚期以后，其下降速度减慢。荷瘤小鼠的ＲＢＣ－ＩＣＲ高于正常，在肿瘤侵袭中期急骤增高，以后稳定在较高水平。本实验结果提示，肿瘤侵袭转移可能与宿主红细胞免疫功能有一定的关系，这些改变可作为评估肿瘤发展程度的参考指标之一，而且对于研究肿瘤转移机理有着十分重要的意义。     

体外不同比例再生肝细胞与结肠癌细胞的共培养

Objective To investigate the proliferation potential of colon cancer cells co-cultured with different proportions regenerating hepatocytes and role of the cell growth factors related to liver regeneration in vitro.Methods Active regenerating hepatocytes were obtained by collagenase perfusion in situ of rats models underwent 70% liver resection after 24 hours.Co-cultures with different proportions of hepatocytes to human colon cell line SW480 were performed respectively.The proportion of hepatocytes to human colon cell line SW480 Was 10:1 in group A,1:1 in group B.There was only human colon cell line SW480 in group C(control group).Proliferation capacity was assessed with the percentage by 3H-thy incorporation.Concentration of epidermal growth factor(EGF),insulin-like growth factor-1(IGF-1)and hepatocyte growth factor(HGF)was analyzed by ELISA.Results There was no significant difference among the 3 groups in 3H-thy incorporation percentage,and concentration of EGF,IGF-land HGF after 24 hours' culture(P>0.05).3H-thy incorporation percentage(15.9±1.4,13.2±1.5),and concerntration of EGF [(722.9±55.4)ng/L,(498.2+41.5)ng/L]and IGF-1[(755.2±35.7)ng/L,(538.1±37.5)ng/L]in Group A and B were higher than that in group C after 72 hours(P<0.05).Especially the indexes above in group A were higher than that in group B(P<0.05).there was no significant difference in concerntration of HGF among the 3 groups after 72 hours(P>O.05).Conclusions These results imply that the regenerating hepatocytes contribute to the hyperproliferative state of co-culturing colon cancer cells.The mechanism maybe have relationship with EGF and IGF-1 high expression in colon cancer cells caused by growth signals coming from hepatocytes.     

血管内皮生长因子受体-1促进肝癌细胞侵袭和转移的初步研究

目的 检测不同转移潜能的肝癌细胞中有无血管内皮生长因子受体-1(VEGFR-1)及其配体(VEGF)的表达以探讨VEGFR-1在肝癌侵袭转移中的作用.方法 分别用RT-PCR、ELISA和/或Western blot法检测四种肝癌细胞株MHCC97-H、MHCC97-L、SMMC 7721和HepG 2有无VEGFR-1 mRNA和蛋白表达,用VEGFR-1的特异性配体VEGF-B处理MHCC97-H细胞以研究VEGFR-1活化对肝癌细胞迁移、侵袭和增殖等的影响.结果 MHCC97-H、MHCC97-L和SMMC 7721有VEGFR-1 mRNA和蛋白表达,但4种肝癌细胞都有VEGFR-1的配体VEGF-A和VEGF-B的表达;VEGFR-1活化能促进肝癌细胞MHCC97-H侵袭和迁移;VEGFR-1依赖的侵袭和迁移能被VEGFR-1的中和抗体18F1阻断,VEGFR-1活化不能促进细胞增殖和存活.结论 VEGFR-1及其配体的表达与肝癌细胞的侵袭转移有关,肝癌中的VEGF过表达可以自分泌的方式激活表达VEGFR-1的肝癌细胞,VEGFR-1及其配体可能是防治原发性肝癌侵袭转移的新靶点.     

环磷酰胺和LAK细胞联合应用对SHR大鼠乳腺癌肺转移的抑制作用

本实验研究了环磷酰胺和LAK细胞被动输入联合应用对SHR大鼠乳腺癌肺转移的影响。结果表明当投给50mg/kg环磷酰胺和被动输入LAK细胞(4×10~7/只)可以明显地抑制SHR大鼠乳腺癌的肺转移(P<0.01),并且能有效地延长荷瘤动物的生存时间(P<0.01);半治疗量的LAK细胞和环磷酰胺具有协同抗转移作用(P<0.05)。提示此方法是一个有效的免疫化学疗法。