MMP与妊高征胎盘血管重铸

滋养细胞重铸障碍是妊娠高血压综合征(PIH)发病的重要环节,基质金属蛋白酶(MMP)是滋养细胞在重铸过程中分泌的重要酶类,其分泌的改变可能是PIH滋养细胞分化异常的外在表现.     

人胚胎神经干细胞体外培养及其增殖与分化的研究

目的 建立神经干细胞分离、培养及分化的鉴定技术，观察神经干细胞增殖、分化的特点。方法 从人胚胎海马区分离神经干细胞，采用无血清培养基，进行体外扩增培养、传代。采用免疫细胞化学法鉴定神经干细胞和分化的神经细胞；利用流式细胞仪和细胞生长曲线检测神经干细胞的增殖能力。结果 从人胚胎脑海马区分离的细胞具有增殖和多向分化潜能，可进行传代培养，获得的细胞团中大部分为nestin表达阳性细胞。贴壁分化后可以出现NSE、GFAP表达阳性的细胞。结论 用上述方法分离培养的细胞能表达nestin蛋白，具有自我更新和增殖能力，并具有向神经元、星形胶质细胞分化的潜能，具备神经干细胞的特征，可用于细胞移植等相关研究。     

1,25-二羟维生素D3对OS-732人成骨样细胞增殖与分化的影响

目的观察1,25-二羟维生素D3对体外培养的人成骨样细胞增殖与分化的影响,以进一步探讨其治疗骨质疏松的机制。方法采用MTT比色分析法检测1,25-二羟维生素D3对体外培养OS—732人成骨样细胞增殖的作用与效价。采用培养细胞匀浆上清测单位蛋白下的碱性磷酸酶活性,培养基中骨钙素(BGP)含量分析方法检测1,25-二羟维生素D3对OS—732人成骨样细胞分化的影响。结果培养第4天,10-7mol/L1,25-二羟维生素D3显著抑制成骨样细胞增殖(P<0.05),10-8mol/L、10-9mol/L1,25-二羟维生素D3对成骨样细胞的作用不明显。培养4天后培养基中BGP水平在10-7mol/L组变化不大,在10-8mol、10-9mol/L1,25-二羟维生素D3组BGP水平显著增高(P<0.05,P<0.01)。结论1,25-二羟维生素D3抑制成骨样细胞增殖在高剂量时作用显著,促进成骨样细胞分化作用在较低剂量显著。     

苦参碱诱导K562细胞分化的基因组DNA甲基化模式变化

目的：我们在已建立的较稳定的苦参碱诱导人白血病K562细胞分化模型基础上，利用基因表达谱芯片扫描发现0．1mg／ml苦参碱作用K562细胞24小时后，277条基因表达下调，84条上调。为进一步探明苦参碱诱导K562细胞分化时基因表达变化发生机制，本文拟从表观遗传学角度研究苦参碱诱导K562细胞分化时基因组DNA甲基化模式的变化。方法：采用对5’-甲基胞嘧啶敏感的限制性核酸内切酶salI和SmaI以及不敏感的HaeⅢ分别消化K562细胞以及0．1mg／ml苦参碱作用24小时和96小时后细胞的基因组DNA，观察限制性核酸内切酶对对照组与药物处理组细胞DNA的不同酶切效果。结果：苦参碱作用K562细胞24小时后，基因组DNA对5’-甲基胞嘧啶敏感的限制性核酸内切酶的敏感性下降。提示苦参碱诱导K562细胞分化的基因表达变化同基因组DNA甲基化模式改变有关。     

视黄酸依赖反义cyclin D1对HL-60细胞增殖和分化的影响及其机制

目的 :探讨视黄酸 (retinoicacid ,RA)及其诱导的反义 (anti sense ,AS)cyclinD1对肿瘤细胞的协同抑制增殖与诱导分化效应及其机制。方法 :通过构建的含有视黄酸反应元件 (retinoicacidresponseelement ,RARE)的反义cyclinD1RNA表达载体 pCI neo/RARE3 TK/AscyclinD1,使反义cyclinD1的表达可受RA诱导调控。以脂质体转染HL 60白血病细胞后 ,运用生长曲线、MTT比色法和流式细胞仪分析检测细胞增殖功能 ,NBT还原实验和透射电镜观测细胞分化状况 ,western blot检测p16基因蛋白表达水平。结果 :反义cy clinD1转染和未转染的HL 60细胞经RA处理后 ,生长减慢 ,细胞被阻滞在G0 /G1期 ,分化能力明显增强 ,p16基因蛋白表达增加 ,其中 ,以反义cyclinD1转染细胞经RA处理后变化更为明显。结论 :RA及其诱导的反义cyclinD1可协同抑制HL 60细胞增殖和诱导细胞分化成熟 ,上调p16基因表达可能是其分子机制之一。     

皮肤来源的前体细胞培养和向神经元分化的观察

目的　研究皮肤来源的前体细胞 (SKPs)的体外培养方法 ,为神经移植提供一种新的细胞来源。方法　分离培养小鼠皮肤组织的细胞 ,在无血清的培养基中培养 ,用机械方法对细胞进行传代 ,免疫细胞化学方法对细胞进行鉴定。结果　从成年和幼年的小鼠皮肤组织中分离培养出SKPs ,这种细胞在体外可以长期增殖和传代 ,体外培养可超过 8代 ,这种细胞大部分表达纤维粘连蛋白 ,约50 %的细胞表达巢蛋白。在有血清的培养基中培养 ,约 5%的细胞分化为神经元样细胞 ,表达神经元特异性烯醇化酶和神经微丝 ,部分细胞分化为脂肪细胞 ,其余的细胞分化为成纤维细胞样细胞。结论　皮肤组织中存在的前体细胞可在体外稳定增殖 ,能够分化为神经细胞、脂肪细胞和成纤维细胞样细胞。这种前体细胞有潜力成为神经移植的一种细胞来源     

细胞因子与树突状细胞分化诱导

树突状细胞(DC)是一类非常重要的抗原递呈细胞，在肿瘤、慢性感染和自身免疫疾病等治疗方面应用前景乐观。通过不同细胞因子诱导不同的前体细胞分化以获得可供利用的DC是目前研究热点。现综述GM-CSF、IL4、IL-3、IL-13、IL-10、TNF-α、G-CSF、SCF、FL、TGF-β等各类细胞因子在DC诱导分化及成熟中的应用和作用机制。     

VM-26对人多形性胶质母细胞瘤BT-325细胞分化诱导效应的研究

目的：研究替尼泊苷（VM－26）对人多形性胶质母细胞瘤BT－325细胞的分化诱导效应。方法：应用免疫组化、Westem-Blotting等方法，观察BT－325细胞经不同剂量VM－26（1ug/ml,5ug/ml)，不同时间（24小时，48小时）作用后胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达，并通过克隆形成率及绘制细胞生长曲线等方法观察细胞恶性增殖能力的变化。结果：（1）BT－325细胞经VM－26作用后，出现明显的分化特征，表现为胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达升高，与对照组比较差别有高度显著性（P＜0．01）；（2）克隆形成率实验显示VM－26作用后克隆形成率降低，与对照组比较差别有高度显著性（P＜0．01）；（3）参照剂量以5ug/ml，作用时间以48小时为实验最佳条件。结论：VM－26可显著抑制BT－325细胞恶性增殖，并促进GFAP的表达，提示VM－26可诱导BT－325细胞的分化。     

骨髓间充质干细胞生物学特性及中药对其生物学行为的影响

目的：综述骨髓问充质干细胞(MSCs)的生物学特性及中药对其生物学行为的影响，探讨中药在MSCs研究中的应用前景。方法：查阅国内外检索类期刊，归纳骨髓MSCs的生物学特点及中药对其影响。结果：骨髓MSCs容易获取、可以体外大量扩增、干细胞特性不易丧失，是组织工程和细胞治疗中理想的种子细胞，中药可诱导骨髓MSCs定向分化成神经元。结论：中药对骨髓MSCs的生物学特性有影响，并有待深入研究。