运用血清药理学初步探讨毛蕊异黄酮苷的血管新生作用＊

目的 首次运用血清药理学方法，并借助体外细胞实验，初步探讨毛蕊异黄酮苷在血管新生方面的作用，为后期深入研究该物质诱导内皮祖细胞（EPCs）参与脑缺血后血管再生修复机制提供重要帮助。方法 健康雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为两组：一组大鼠预先实施假手术并作为空白血清供体，采用生理盐水灌胃；另一组大鼠预先实施右侧大脑中动脉阻塞再灌注手术以复制缺血性脑卒中疾病模型，并将造模成功动物作为含药血清供体，术后按照50mg/kg?bw的剂量灌胃毛蕊异黄酮苷溶液。各组动物每天早晚各给药1次，连续3天，末次给药1 h后腹主动脉采血。配置不同血清含量（5%、10%、15%）的培养基并对大鼠骨髓来源的内皮祖细胞进行培养，观察不同含药血清对EPCs形态数量的影响，进而选择适宜的含药血清，借助Transwell小室和Matrigel分别考察内皮祖细胞的迁移能力和形成管腔的能力的变化，并采用聚合酶联免疫反应（ELISA）对血清中血管内皮生长因子（VEGF）、基质细胞衍生因子1（SDF-1）、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）以及促红细胞生成素（EPO）含量进行检测。结果 5%和10%含药血清均能促进内皮祖细胞增值且对细胞形态无影响；15%含药血清使细胞形态改变，生长受到显著抑制。10%含药血清能够显著促进内皮祖细胞的迁移作用和形成管腔的能力（P < 0.01）。ELISA结果显示，含药血清中内皮祖细胞动员因子（VEGF、SDF-1、G-CSF、GM-CSF、EPO）含量与空白血清中的各参数相比均显著升高（P < 0.01）。结论 体外实验初步表明，毛蕊异黄酮苷吸收入血后，能够调动多种内皮祖细胞动员因子进入血循环，这些物质对激活内皮祖细胞参与机体脑缺血后的血管再生修复过程起到非常关键的作用。     

EGCG和黄芩苷协同mTOR依赖性抑制小鼠牙周炎巨噬细胞M1向极化

目的:初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)和黄芩苷(baicalin)是否有协同治疗小鼠牙周炎的作用及其机制.方法:将C57/BL6小鼠随机分为空白对照组、牙周炎组、EGCG组、EGCG+黄芩苷组.苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察牙周组织学改变和牙槽骨丧失量(alveolar bone loss,ABL);抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察破骨细胞数目;免疫组织化学法观察总巨噬细胞、各亚型巨噬细胞数和哺乳动物雷帕霉素靶向蛋白(mTOR)的表达.结果:丝线结扎联合局部接种牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)成功诱导小鼠实验性牙周炎.单独使用EGCG或联合使用黄芩苷减轻牙周组织炎症,减少破骨细胞数量和牙槽骨吸收量,减少牙周组织总巨噬细胞、M1型巨噬细胞数量及M1/M2比例,抑制牙周组织mTOR的表达.且EGCG和黄芩苷联合使用比单独使用EGCG效果好.结论:EGCG和黄芩苷可以协同治疗小鼠牙周炎,可能与下调mTOR信号通路抑制巨噬细胞M1向极化有关.     

HPLC法同时测定桑枝中桑皮苷A和桑皮黄素的含量

目的:建立同时测定桑枝中桑皮苷A和桑皮黄素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Cosmosil C18-AR-Ⅱ,流动相为乙腈-1%乙酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为303 nm,柱温为30℃,流速为1.0 ml/min,进样量为10~20μl。结果:桑皮苷A和桑皮黄素的质量浓度分别在0.101 5~2.029、0.020 42~0.408 4 mg/ml范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 8、0.999 7);精密度试验的RSD<2%,重复性、稳定性试验的RSD<3%;平均加样回收率分别为98.2%、97.5%,RSD分别为1.39%、1.29%(n=6)。在早春采集的样品中桑皮苷A和桑皮黄素的含量较高。结论:该方法操作简便、结果准确,可为桑枝的合理采收和开发利用提供参考。     

木豆叶HPLC指纹图谱建立及2种成分测定

目的建立木豆Cajanus cajan(L.)Millsp.叶HPLC指纹图谱,并测定荭草苷和木犀草素的含有量。方法木豆叶65%甲醇提取液的分析采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-1%醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长260 nm。结果 10批样品(S1~S10)HPLC指纹图谱中有21个共有峰,除S3(0.516)外,其相似度均大于0.950。荭草苷和木犀草素分别在0.089 5~3.960μg和0.015 5~0.408μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.43%(RSD=1.32%)和98.50%(RSD=0.82%),3个产地(广东、云南、海南)样品中2种成分含有量有明显差异。结论该方法简单准确,重复性好,可用于木豆叶的质量控制。     

雷公藤多苷片联合火针治疗结节性痒疹临床观察

目的研究雷公藤多苷片联合火针治疗结节性痒疹(PN)的临床疗效及对生活质量的影响。方法按入选标准和排除标准将150例患者随机等分2组,对照组:雷公藤多苷片口服,20 mg/次,3次/d;治疗组在对照组基础上皮疹处加每周1次火针,治疗周期4周,记录和分析临床治疗起效时间及生活质量影响。结果对照组及治疗组2周有效率为26.67%、48.00%(P=0.0113),4周有效率为60.00%、90.66%(P=0.0003);治疗后2组皮肤病生活质量分数P<0.05。2组疗效及治疗前后皮肤病生活质量指数(DLQI)评分差异有统计学意义。结论雷公藤多苷片联合火针治疗PN在疗效、起效时间、提高生活质量等方面优于单独应用雷公藤多苷。     

神经节苷脂联合银杏达莫治疗脑梗死后遗症的效果分析

目的分析神经节苷脂联合银杏达莫治疗脑梗死后遗症的临床效果。方法100例脑梗死后遗症患者,采用随机数字表法分为常规组和联合用药组,每组50例。常规组患者给予神经节苷脂治疗,联合用药组在常规组基础上增加银杏达莫治疗。比较两组患者治疗效果及治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、日常生活能力量表(ADL)评分。结果治疗前,两组患者NIHSS评分及ADL评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组NIHSS评分低于治疗前,ADL评分高于治疗前,且联合用药组NIHSS评分(5.56±0.21)分低于常规组的(8.78±0.78)分,ADL评分(82.19±5.50)分高于常规组的(72.34±5.01)分,差异有统计学意义(P<0.05)。联合用药组总有效率92.00%高于常规组的74.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论神经节苷脂联合银杏达莫治疗脑梗死后遗症可获得良好的临床效果,可有效提升患者神经功能和生活能力,是一种值得推广的联合用药方案。     

神经节苷脂（GM-1）用于高血压脑出血术后的临床效果分析

目的：探讨分析神经节苷脂（GM-1）用于高血压脑出血术后的临床效果。方法：将我院66例高血压脑出血术后患者纳入研究，在常规术后干预基础上对其中33例患者给予GM-1+生理盐水静脉滴注，观察1个疗程后GM-1治疗患者和常规治疗患者的NIHSS、ADL评分差异及临床疗效。结果：治疗后观察组NIHSS评分为（5.36±2.02）分，显著低于对照组（9.13±2.52）分（P＜0.05）， ADL评分为（52.35±10.51）分，显著高于对照组（39.58±9.25）分，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；观察组总有效率为90.9%，与对照组的63.63%比较显著较高（P＜0.05）。结论：高血压脑出血术后应用神经节苷脂可显著改善患者的神经功能，提高生活质量，具有较高的临床应用价值。     

中西医结合治疗非暴露部位白癜风42例疗效观察

目的:观察复方甘草酸苷、驱白巴布期片联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)照射等治疗非暴露部位白癜风的临床疗效。方法:将72例确诊病例随机分为治疗组42例和对照组30例,治疗组采用复方甘草酸苷、驱白巴布期片联合NB-UVB照射,同时配合激素乳膏外用治疗;对照组不服用复方甘草酸苷、驱白巴布期,其他治疗方法同治疗组。结果:治疗组总有效率64.3%,对照组总有效率46.7%,两组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:中西医结合是治疗白癜风的有效方法。     

三香颗粒质量标准研究

目的:建立三香颗粒的质量标准。方法:采用显微鉴别法对三香颗粒中红花、香附、没药等进行显微鉴别,采用TLC法对三香颗粒中黄芩、冰片进行定性鉴别,采用HPLC法对三香颗粒中木香烃内酯和去氢木香内酯进行定量分析。结果:显微特征明显;薄层色谱斑点清晰、阴性液无干扰;木香烃内酯在0.258 0~2.580 0μg内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.8%;去氢木香内酯在0.267 5~2.675 0μg内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为98.1%。结论:本方法准确、可靠,能有效控制三香颗粒的质量,为三香颗粒质量控制提供依据。     

牛蒡子苷元抗哮喘小鼠气道炎症作用及机理研究

目的:观察牛蒡子苷元对哮喘小鼠气道炎症的影响并探究相关作用机制。方法:将30只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组和牛蒡子苷元组。采用卵清白蛋白与氢氧化铝致敏,并雾化吸入卵清蛋白激发制备小鼠支气管哮喘模型,81天后检测小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数和炎症细胞数;采用HE染色在光镜下观察各组小鼠肺组织病理学变化;采用RT-PCR和Western blot分别对肺组织E选择素的mRNA和蛋白表达进行测定;采用Western blot对肺组织中NF-κB p65活化水平(p-NF-κB p65/total NF-κB p65)进行检测。结果:与模型组相比,牛蒡子苷元组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞和巨噬细胞数明显降低;小鼠肺组织病理变化明显减轻;此外,与模型组相比,牛蒡子苷元组哮喘小鼠肺组织E选择素mRNA和蛋白的表达降低,哮喘小鼠的NF-κB p65活化水平显著下降。结论:牛蒡子苷元10 mg/kg可能通过抑制NF-κB的活化从而降低OVA诱导的哮喘小鼠气道炎症水平,为牛蒡子苷元进一步应用于哮喘的治疗奠定了一定的实验基础。