细胞免疫与烧伤创面愈合的实验研究

为探讨免疫低下对烧伤创面愈合的影响,设计了用低剂量钴源照射的方法建立的免疫抑制模型,并在该模型的基础上观察了免疫抑制大鼠Ⅱ度烧伤创面愈合的情况。结果表明:①大鼠接受2Gy~(60)Co 照射后20天内,Th/Ts 比值和 T 细胞肿瘤花环率持续下降。照射后皮肤组织 DNA 含量及细胞周期均无明显改变。②免疫抑制大鼠胶原修复能力下降,创面愈合百分率低于正常大鼠。由此证实了免疫功能低下对创面愈合的抑制作用。     

离心法制备的胶原膜及其成份对眼创伤的预防和治疗效果

目的 研究离心法制得的胶原膜及其成份对眼创伤 的预防和治疗作用。方法 从物理,化学指数,药物输送方式及效果等方面比较了离心法制备的胶原膜及美国BI0—COR的胶原膜,分析比较了它们的社会和经济效益。结果 离心法制备的角膜胶原膜与类似国际先进产品的特点相同(含较多Ⅰ型胶原,较少Ⅲ型胶原,形状与Bausch ＆Lomb Bio—cor产品相似直径14.5mm,底部曲度9.0mm,泪液中深解时间为12/24/72h)。结论 离心法制备的胶原膜有良好的效果和效益。     

Reconstituted bovine skin collagen enhances healing of bone wounds in the rat calvaria

Summary The value of reconstituted fibrillar collagen (Zyderm Collagen Implant I, a concentrated solution of pepsin-solubilized, bovin skin collagen) as a bone graft material was tested in 4 mm diameter surgically created defects of rat calvaria. All wounds were allowed to heal for 4 weeks, and were assessed both qualitatively and by computer-assisted morphometry. The fibrillar collagen was found to produce significantly more new bone than no graft or than heat-denatured fibrillar collagen. The fibrillar collagen was generally well tolerated, appeared to act as a hospitable osteoconductor, and became incorporated into the newly formed bone. The effect of collagen concentration was also tested by comparing the fibrillar collagen at 3.5% (Zyderm Collagen Implant I) with 6.5% suspension of collagen (Zyderm Collagen Implant II). There were no significant differences observed, but a definite trend was evident for Zyderm II to encourage more bone formation than Zyderm I. It is concluded that reconstituted fibrillar collagen is a hospitable, osteoconductive substance that enhances bone healing of calvarial defects in the rat.     

Alport syndrome,basement membranes and collagen

Alport syndrome, an inherited disorder of the kidney, eye and ear, has fascinated nephrologists, pathologists, and geneticists for nearly a century. With the recent application of molecular biochemical and genetic techniques, this mysterious disease has begun to yield some of its secrets. Alport syndrome can now be viewed as a generalized disorder of basement membranes that appears to result from mutations in an X-chromosome-encoded basement membrane collagen chain. This chain, along with two other novel collagen chains, is absent from Alport basement membranes, in contrast to the classical chains of collagen IV. Phenotypic heterogeneity in Alport syndrome probably arises from allelic mutations at a single genetic locus. The phenomenon of post-transplant anti-glomerular basement membrane nephritis may be a manifestation of specific mutations at the Alport locus that prevent synthesis of the gene's protein product and the establishment of immunological tolerance.     

外源性胶原对人工活性肌腱影响的体外形态学观察

目的探讨外源性胶原在人工活性肌腱的构建中对细胞功能的影响. 方法将人发、碳纤维(carbon fiber, CF)及聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)3种材料复合外源性胶原(实验组)及不复合外源性胶原(对照组),与密度为3×106/mm3的转化人胚腱细胞进行体外联合培养,于培养后2小时、3天和5天3个时间点行倒置显微镜观察,以及培养5天行扫描电镜观察细胞数量及形态. 结果有胶原复合的实验组人工活性肌腱培养2小时后,细胞向材料周围聚集,附着于材料的部分细胞呈圆形;3天时附着的细胞增多,细胞与材料相容性好,细胞密度大.而无胶原复合的对照组3种材料上细胞附着较少.5天后实验组细胞形态由圆形→椭圆形→梭形演变,对照组细胞形态大部分仍为圆形及椭圆形,细胞数量仍少于实验组. 结论外源性胶原有助于细胞对材料的附着以及细胞自身的增殖.     

增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞生长差异比较

【目的】探讨增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞基因表现型的差异以及EGF、PDGF和bFGF对其的影响。【方法】测定细胞生长曲线;应用液闪计数测定成纤维细胞胶原蛋白的合成。【结果】增生性瘢痕成纤维细胞增殖速度比正常皮肤成纤维细胞慢;胶原蛋白的合成高于正常皮肤成纤维细胞。EGF、PDGF和bFGF均对两种成纤维细胞的增殖具有强烈的刺激作用。EGF和bFGF可减少增生性瘢痕成纤维细胞的胶原蛋白合成,PDGF可以使两种成纤维细胞的胶原蛋白合成增加。【结论】增生性瘢痕成纤维细胞是一种特殊基因表现型的成纤维细胞,它具有自己特殊的生物学特性。EGF、PDGF和bFGF在增生性瘢痕的形成过程中可能具有重要作用。     

成纤维细胞移植促进人工真皮内血管新生的研究

目的观察成纤维细胞与人工真皮共同移植对移植床及真皮海绵内微血管形成、胶原沉积的影响,促进人工真皮海绵内类真皮组织形成,缩短"二期植皮"的间隔时间.方法 Wistar大鼠18只,背部两侧各制作2.5 cm×2.5 cm全层皮肤缺损创面,在移植人工真皮之前分为两组,即成纤维细胞移植组(A组):向创面喷洒混入密度为1.0×105/cm2的同种真皮成纤维细胞的纤维蛋白胶0.5 ml;对照组(B组):只喷洒纤维蛋白胶0.5 ml.于移植后5和10天分别切取移植的真皮及周围组织,进行HE染色、Masson染色、VEGF免疫抗体染色和墨汁灌注染色,观察移植床及真皮海绵内微血管新生及胶原沉积状态;于移植后5天行伊文蓝组织灌注,分光光度计测定真皮海绵内染料含量,定量检测真皮海绵内循环渗透情况.结果移植后5天,新生血管主要集中在真皮下移植床,A组新生血管较B组明显增多,A组(9.64±2.36)个/高倍视野,B组(3.88±1.62)个/高倍视野,差异有统计学意义(P＜0.05);VEGF阳性细胞亦明显增多.移植后10天,移植床及真皮内均有微血管形成,A组血管数量和管径均较B组增加,胶原沉积量也明显增加.A组(46.04±8.90)个/高倍视野,B组(30.08±7.76)个/高倍视野,有统计学意义(P＜0.05).结论同种成纤维细胞移植可明显加快人工真皮内及移植床的血管新生和胶原沉积,加快真皮海绵内类真皮组织的形成.     

可注射性人胎盘胶原豚鼠皮内、皮下注射实验研究

目的 研究可注射性人胎盘胶原的理化性质及临床应用特点.方法 将实验豚鼠随机分为两组,并将浓度为8mg/ml及30mg/ml的两种胶原分别注于两组豚鼠的皮下和皮内,以生理盐水作对照.实验鼠分别在注射后1、3、5、7、14、28、49、91、196天作大体观察和组织切片观察.结果 显示可注射性人胎盘胶原不引起明显的过敏反应及炎症反应.注入宿主皮内后,能较长期稳定留存,并逐步被宿主的自身胶原替代,共同进入宿主的生命代谢过程.它还能使真皮的胶原纤维增加,真皮增厚,延缓了真皮的衰老.结论 可注射性人胎盘胶原在整形美容外科中作为改善皮肤衰老中出现的皱褶及修复皮肤浅表凹陷性缺损具有实用价值.     

PLGA/Ⅰ型胶原复合支架用于组织工程化骨再造的研究

目的:采用PLGA/Ⅰ型胶原复合改良生物支架,构建组织工程化骨组织.方法:采用Ⅰ型胶原和聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)复合,制作改良的生物支架,将原代培养的成骨细胞接种于复合支架上,培养1周,扫描电镜观察成骨细胞在支架上的生长及黏附情况;同时,将细胞-支架复合体自体异位植入,并取材观察其成骨情况.结果:经鉴定,原代培养的细胞符合成骨细胞的特征;扫描电镜:在生物支架上大量成骨细胞呈簇状生长,并形成多个细胞突起;大体标本:4个月时可见骨块形成;自体异位植入后1个月可见新生骨组织形成,周围有多个活性成骨细胞和骨母细胞,至4个月时骨组织渐趋成熟.结论:Ⅰ型胶原和PLGA复合支架是一种理想的生物可降解支架,可用于组织工程化骨再造的研究.