Epidemiology and biology of nematodofauna affecting Testudo hermanni, Testudo graeca and Testudo marginata in Italy

Tortoises of the genus Testudo living in Italy are Testudo hermanni, Testudo graeca and Testudo marginata. Although a great deal of information has been acquired on the internal medicine and surgery on these animals, little is known of their parasitological fauna. A survey on the presence of gastro-intestinal parasitic nematodes in tortoises bred in Italy was carried out to acquire extensive epidemiological data. Stool samples of 62 tortoises (37 T. hermanni hermanni, 13 T. graeca, 6 T. hermanni boettgeri and 6 T. marginata) were macroscopically examined and subjected to qualitative (flotation and Baermann techniques) and quantitative (McMaster technique) microscopic examinations. Adult nematodes were identified using morphological keys. Eggs of oxyurids (species indistinguishable) and adults of Alaeuris numidica, Mehdiella microstoma, Mehdiella uncinata, Tachygonetria longicollis, Tachygonetria conica and Tachygonetria palearcticus (Oxyurida, Pharyngodonidae); larvae and adults of Atractis dactyluris (Ascaridida, Atractidae); and eggs and adults of Angusticaecum holopterum (Ascaridida, Ascarididae) were identified in all animals >1 year, whereas all tortoises <1 year of age were parasite-free. Moreover, this study reports for the first time A. numidica and M. microstoma in T. marginata. This work shows that nematodes affecting tortoises are diffused in Italy and highlights the need to investigate their epidemiology more in depth.     

菲立磁标记大鼠骨髓基质干细胞对其生物活性的影响

目的 观察菲立磁(Feridex)标记对大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的增殖及向肝细胞分化能力的影响,探讨Feridex标记大鼠BMSCs的最佳标记方案.方法 SD大鼠BMSCs按Fefi-dex浓度11.2、14.0、16.8、19.6mg/L分组并进行标记,设空白对照组(无Feridex标记的BMSCs).采用普鲁士兰染色和透射电镜鉴定Feridex标记后各组BMSCs的标记效率.噻唑蓝(MTY)比色法检测Feridex标记后各组BMSCs的增殖水平.逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测Feridex标记后各组BMSCs经肝细胞生长因子(HGF)、表皮细胞生长因子(EGF)共同诱导后ALB和AFP基因的表达水平.结果 11.2、14.0、16.8、19.6 mg/L组的标记率分别为71%、83%、91%、96%.16.8 ms/L和19.6 mg/L组的标记率显著高于11.2 ms/L和14 mg/L组(P<0.05).11.2、14.0、16.8 mg/L组的细胞增殖水平及诱导后ALB、AFP基因表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而19.6 mg/L组的细胞增殖水平及诱导后ALB、AFP基因表达水平显著低于空白对照组(P<0.05).结论 Fefidex浓度16.8mg/L可能是Feridex标记BMSCs最适标记浓度,该浓度既能使Fefidex对BMSCs的标记达到较理想效果,同时不影响BMSCs的增殖及向肝细胞分化的能力.     

RNA干扰抑制Cyr61表达对人脑胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的 观察RNA干扰技术沉默Cyr61基因表达对人脑胶质瘤U251细胞生物学行为的影响.方法 针对Cyr61 mRNA的序列设计合成小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建pRNAT-Cyr61重组质粒,转染人脑胶质瘤U251细胞;RT-PCR和Western blot检测其对U251细胞内源性Cyr61表达的影响;用噻唑蓝(MTT)比色法观察U251细胞体外增殖活性的变化;用Transwell 小室法检测U251细胞体外侵袭能力的改变;流式细胞仪检测U251细胞凋亡并用透射电镜观察凋亡后的细胞形态学变化.结果 pRNAT-Cyr61重组质粒在mRNA及蛋白水平分别显著抑制Cyi61基因表达,抑制率分别最高达到74.87%和78.23%;U251细胞的体外生长抑制率最高达68.15%,侵袭细胞数下降至(46.00±2.82)个;U251细胞凋亡率最高达53.16%.结论 pRNAT-Cyt61可抑制Cyr61在人脑胶质瘤U251细胞中的表达,并抑制细胞的增殖活性和侵袭能力,促进细胞凋亡.     

大隐翅虫生物学特性及其对蝇类捕食作用的观察

在22～25℃室温条件下,大隐翅虫卵期约4天、幼虫期约14天、蛹期约16天。大隐翅虫主要孳生与活动于禽类尸体堆、皮毛堆、杂骨堆等有肉食类蝇幼孳生的场所,但成虫栖息于附近的潮湿土壤中,栖息深度3～8 cm,群居,每群有成虫5～10只。成虫产卵于1.5cm 深的潮湿土中,每次产卵约40粒,一生产卵3～5次。在食物不足时,成虫捕食其幼虫,幼虫之间相互捕食。实验室内观察,在加以肉质情况下,对其成虫捕食蝇幼影响不大。饥饿24小时的成虫每只24小时平均捕食丝光绿蝇3龄幼虫13～15条。幼虫喜食蝇蛹,在加肉质条件下,每只24小时平均食丝光绿蝇蛹3.8条。     

肺癌相关基因LSCC-3对肺癌细胞形态特征和生物学活性的作用

目的 观察肺癌相关基因LSCC-3的表达对肺腺癌细胞PAa形态学特征及生物学活性的作用.方法 构建含有LSCC-3基因全长开放阅读框架(ORF)片段之真核表达载体并转染肺癌PAa细胞;显微镜及倒置荧光显微镜下观察LSCC-3基因的表达及其对于肺癌PAa细胞的形态学特征的影响;采用四甲基氮唑盐(MTT)比色法研究LSCC-3基因的转染对于肺癌PAa细胞生物学活性的作用.结果 以pLPS-LSCC-3-3'EGFP真核表达载体成功转染肺癌PAa细胞,显微镜下观察显示细胞质内有大量LSCC-3基因表达的肺癌PAa细胞出现了细胞脱水、核膜皱缩,核小体形成乃至细胞结构破坏等典型的细胞凋亡、破坏迹象.转染LSCC-3基因后第1～5d肺癌PAa细胞的增殖活性(以A490值表示)较对照组细胞受到明显抑制,始终维持在较低水平(0.1157、0.1257、0.1297、0.134、0.145 Vs.0.1165、0.1300、0.1677、0.1935、0.2058);而细胞凋亡率则明显增加,尤其是转染后前3d,实验组细胞的凋亡率几乎呈线性增长,与对照组细胞间差异有统计学意义(0、12.1%、33.2%、37.8%、38.7% Vs 0、9.1%、13.7%、10.3%、13.1%;P<0.01). 结论 LSCC-3基因的表达在体外可以明显地促进肺癌细胞的凋亡,从而抑制肺癌细胞的增殖,其或许可被应用于肺癌的基因或生物治疗.     

血清CA19-9在胆道系统疾病中的临床意义

目的 评价CA19-9对胆道系统疾病的诊断价值.方法 回顾分析第二军医大学东方肝胆外科医院621例胆道疾病病例,测定血清CA19-9值,分析了血清CA19-9和临床诊断、血清胆红素水平、手术方式、病理及预后结果的关系.结果 在取37U/ml为阳性界值时,CA19-9具有最好的诊断准确率(93.9%),在胆道恶性肿瘤中的阳性率较良性疾病组增高有显著的意义;黄疸病例CA19-9阳性率较无黄疸对照组显著增高,而特异性降低.结论 血清CA19-9在胆道疾病的诊断、治疗监视及预后判断上具有较高的临床价值.     

GSE74602芯片数据中直肠癌关键基因与治疗药物的生物信息学筛选

目的:通过生物信息学方法探寻结直肠癌的诊断标志物及潜在的治疗靶点与治疗药物。方法:从美国国立生物技术信息中心(NCBI)公共数据平台基因表达大棚车(GEO)下载芯片数据GSE74602,包括60个样本,其中30例结直肠癌样本,30例正常结直肠组织样本。用R语言中的Limma包对正常组织和癌症组织进行差异表达分析,用DAVID在线数据库对筛选出来的差异表达基因进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科(KEGG)信号通路分析,同时通过STRING在线数据库构建差异表达基因的蛋白互作网络,利用Cytoscape软件进行可视化编辑,并且通过MCODE插件进行子网络模块分析,筛选出结直肠癌发生过程中的核心基因。最后,用连通图数据库(c Map)分析具有潜在治疗结直肠癌的小分子药物。结果:总共筛选出231个差异表达基因,包括122个上调基因,109个下调基因。GO分析结果表明,表达上调的基因富集的生物学过程主要包括细胞周期、细胞分裂等,而表达下调的基因富集在免疫反应,细胞内信号级联和防御反应等生物学过程。KEGG通路分析发现表达上调的基因主要参与细胞中氮及矿物质的代谢和细胞中相关物质的分泌(胆汁、胰液)的信号通路,而表达下调的基因主要参与药物代谢、细胞循环以及p53信号传导通路。子网络模块分析发现了一些在结直肠癌发生的调控中起着重要作用的关键基因,如KIF20A、CENPF、NCAPG、PYY、IQGAP3;蛋白互作网络中的差异表达基因被映射到c Map上,筛选出若干个潜在治疗结直肠癌的小分子药物,如紫霉素、去甲骆驼蓬碱、斑鸠霉素等。结论:所发现的关键基因可能会成为诊断结直肠癌新的肿瘤标志物或者治疗结直肠癌的新的靶点;此外,筛选出的小分子药物有可能成为治疗结直肠癌的新型药物。     

表皮生长因子受体与乳酸脱氢酶在胰腺癌中的表达及意义的TIMER数据库分析

目的:应用生物信息学方法探讨表皮生长因子受体(EGFR)及乳酸脱氢酶(LDHA)在胰腺癌局部免疫微环境中的表达及意义。方法:运行TIMER(Tumor IMmune Estimation Resource)数据库,获取178例胰腺癌患者的临床信息,以及患者组织标本中EGFR、LDHA、胰腺癌相关信号分子的表达以及各亚群免疫细胞浸润数据,通过人类蛋白表达图谱,搜索EGFR、LDHA以及胰腺癌相关信号分子的蛋白表达丰度。采用Log-rank检验及Cox比例风险回归模型分析EGFR与LDHA表达以及各亚群免疫细胞与其他临床因素对患者预后的影响,并分析EGFR与LDHA与两者与胰腺癌相关信号分子的关系。结果:胰腺癌组织中EGFR与LDHA mRNA的表达水平均明显高于正常胰腺组织(均P0.05);在胰腺癌组织中,EGFR和LDHA mRNA呈正相关(P0.001)。EGFR mRNA高表达、LDHA mRNA高表达、低水平CD4~+T细胞的胰腺癌患者总体生存率较差(均P0.05)。LDHA是胰腺癌的独立预后因素(P0.001)。EGFR与胰腺癌相关信号分子P38、FOXM1、PD-L1、CSF1、CSF1R表达呈明显正相关,而LDHA与FOXM1、CSF1、CSF1R表达呈明显正相关(均P0.001)。EGFR、LDHA、P38、FOXM1和CSF1R蛋白在胰腺癌组织的表达丰度高于正常胰腺组织。结论:在胰腺癌组织中,EGFR与LDHA的表达升高,两者尤其是LDHA,可能通过对胰腺癌相关信号分子表达及局部免疫微环境的调控,从而影响患者预后。     

Effect of alpha-glucosidase inhibitor on human pancreatic and salivary alpha-amylase

The mode of inhibition of a new complex oligosaccharide that inhibits the alpha-glucoside hydrolase activity of pancreatic and salivary alpha-amylase was studied. Kinetic analysis revealed a non-competitive type of inhibition with a Ki of 1.47 +/- 0.03 micrograms when tested against human pancreatic alpha-amylase and 3.89 +/- 0.08 micrograms against human salivary alpha-amylase. The inhibitory action of alpha-glucoside hydrolase inhibitor (alpha-GHI) on pancreatic amylase was observed over a wide range of pH (6.0--7.9), whereas the inhibition of salivary amylase was optimal at pH 6.5. Column chromatographic investigations suggested the possible formation of an enzyme-inhibitor complex because the mixture of alpha-GHI and pancreatic alpha-amylase was eluted as a single component through a Sephadex G200 column. However, this enzyme-inhibitor complex was easily separated into each component and the enzyme activity was fully recovered after electrophoresis.