从人软骨提取总RNA和CDMP－1成熟肽片段的克隆

目的 克隆人软骨来源形态发生蛋白－１（ＣＤＭＰ－１）成熟肽编码区的基因片段。方法 用异流氰酸胍一步法从人软骨组织和酶消化法原代培养的软骨细胞中分别抽提总ＲＮＡ,利用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出人ＣＤＭＰ－１成熟区的基因片段（约１．０ｋｂｐ）,将所得基因片段插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ）质粒载体,重组质粒ＤＮＡ,通过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。结果 从罗骨组织直接取到总ＲＮＡ,其质量与从等重量软骨     

杞菊合剂对压力负荷性高血压大鼠左室肥厚的作用

探讨杞菊合剂对压力负荷性高血压大鼠左室肥厚的防治作用和机理。方法 :用腹主动脉缩窄法造成压力负荷性高血压大鼠模型 ,以苯那普利作为对照 ,观察杞菊合剂对血压、左心室重量、微结构以及心肌中胶原含量和钙调神经磷酸酶活性的影响。结果 :杞菊合剂可以减轻左心室重量 ,降低血压 ,减少胶原的增生 ,并且使心肌中钙调神经磷酸酶活性降低 ,微结构稳定。结论 :杞菊合剂可以防治心肌肥厚 ,其作用机制与其降低血压和降低钙调神经磷酸酶活性有关。     

雌孕激素合用对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用

目的　观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用。方法　 4个半月龄大鼠双侧卵巢去除术后预防用药 90d。用骨组织形态计量学方法 ,测定大鼠胫骨近端松质骨静态参数和动态参数 ,观察骨和尿中有机质和无机质的含量 ,血清生化指标和器官指数。结果　炔诺酮6 0 μg·kg-1·d-1和炔雌醇 3 5 μg·kg-1·d-1联合应用可抑制去卵巢大鼠的破骨细胞活性 ,完全对抗其骨转化率增高和骨量丢失的骨质疏松症状 ,同时可使去卵巢大鼠的骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少。结论　炔诺酮和炔雌醇联合应用可预防去卵巢大鼠骨质疏松     

微波-EDTA脱钙技术在免疫组织化学染色中的应用研究

目的探讨微波(MW)—乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法根据实验条件将待脱钙组织分为4组，即MW—EDTA(15℃)，Jenkins脱钙-固定液(20℃)，10％EDTA(20℃)和10％硝酸(20℃)，其中Mw—EDTA方法中EDTA的浓度分别是4％、7％、10％、13％和16％。应用免疫组织化学路AB染色，光镜观察免疫组织化学染色结果。结果MW—EDTA脱钙的免疫组织化学染色阳性细胞显著高于Jenkins脱钙—固定液(20℃)、10％ED—TA(20℃)及10％硝酸脱钙(20℃)3种脱钙方法，其时间明显缩短。其中用10％和13％浓度的EDTA脱钙的组织，其免疫组织化学染色阳性细胞又明显多于EDTA浓度为4％、7％和16％者。结论以Mw—10％EDTA技术进行组织脱钙，其脱钙时间短、免疫组织化学染色效果好。     

D-半乳糖性雄性大鼠骨和睾丸微细结构的变化

目的 探讨D-半乳糖对雄性大鼠骨的影响及产生原因。方法 三月龄雄性SD大鼠16只，按体重随机分成4组。对照组，D-半乳糖低、中、高三个剂量组。分别皮下注射生理盐水、不同浓度的D-半乳糖。两个月后心脏取血处死老鼠。取出左侧股骨和胫骨。股骨消化测钙磷。胫骨脱水塑料包埋切片。镜下观察，并测量骨静态参数。同时取出睾丸称重。固定脱水石蜡包埋切片。镜下观察。结果 大鼠骨小粱分布稀疏．分离度明显增大，呈现骨质疏松的表现。睾丸组织发生明显变化。睾丸曲细精管排列紊乱，管腔增大，管壁变薄，间质增厚。结论 D-半乳糖可使雄性大鼠产生骨质疏松。其原因可能是睾丸发生变化，雄激素产生降低引起。     

大块骨组织体视学研究的图像采集与分析

大块骨组织由于不脱钙切片制作技术难度高,应用体视学对大块骨组织整体形态进行图像定量分析的研究资料较少。随着生物材料、人工金属植入材料在骨科临床的大量应用,如何获取高质量的大块骨组织整体图像,并应用体视学原理进行较为精确的图像分析变成了迫切需要解决的问题。目的:寻求大块骨组织实用和有效的数字图像采集方法,使之应用体视学原理进行较为精确的图像分析。材料与方法:普通玻片上的大组织标本、硬组织切片机切取的不脱钙塑料包埋大块骨组织标本及旋转切割机切取的含金属植入物的塑料包埋磨片标本。分别采用普通显微镜、大视野显微镜、自动显微镜及图像拼接软件采集,同时采用胶片扫描仪、台式背透扫描仪及高分辩数码相机进行采集比较。结果:上述各方法在一定程度均能满足大块骨组织图像采集及体视学分析需求,同时在标本适应性、视野规模、成像质量方面总结出各自优、缺点以及相应技术方法。     

原发性骨质疏松骨组织c-fos、c-jun和p53基因的表达

目的 研究原发性骨质疏松时骨组织中原癌基因c-fos、c-jun和抑癌基因p53的表达情况,以探讨c-fos、c-jun和p53与原发性骨质疏松症的关系及其在骨质疏松中所起的作用. 方法 采用人的新鲜松质骨作为实验标本(骨质疏松组和对照组),分别用兔抗人c-fos、c-jun多克隆抗体和鼠抗人p53单克隆抗体通过免疫组化方法来检测标本中c-fos、c-jun和p53基因的蛋白产物,了解c-fos、c-jun、p53基因的表达情况。结果 骨质疏松组的骨细胞和成骨细胞中c-fos、c-jun、p53基因的阳性表达率均为100％,与对照组相比显著增高,P<0.01。结论 原发性骨质疏松时骨组织中c-fos、c-jun、p53基因的表达增高,提示癌基因c-fos、c-jun和抑癌基因p53与原发性骨质疏松的关系密切,原发性骨质疏松时c-fos、c-jun、p53表达增高与骨细胞和成骨细胞的凋亡有关。     

骨重建过程"四环素活体标记"骨组织形态计量学指标在骨质疏松中的应用

扼要结合骨组织形态计量学指标与实验动物数据介绍影响骨质疏松中骨重建过程的动态指标变化及意义,讨论各指标间的关系及变化所代表的实验意义,还介绍了一系列骨计量学观测指标的标准名称,以及利用体视学和图像分析方法进行测量的公式、单位,并扼要介绍一组实验数据与骨计量学指标的相关分析意义,便于今后分析例样的应用查阅。     

滋阴泻火中药为主对改善性早熟儿童骨骼发育作用及机理的探讨

对女性特发性性早熟患儿50例采用滋阴泻火中药与甲地孕酮联合治疗,32例单纯使用甲地孕酮治疗,对照组25例不用药物治疗。对照组于1年后骨龄差/年龄差值从1.39±0.24上升为1.54±0.20(P<0.01),最终身高预测值从154.2±5.3cm下降至149.4±4.8cm(P<0.01)。单纯使用甲地孕酮治疗,对患儿骨龄提前及最终身高预测值下降趋势无明显影响。而联合治疗的患儿生长速率减慢,△BA/△CA值从1.36±0.19下降为0.65±0.16(P<0.001),最终身高的预测值从153.6±3.8cm增加至158.8±4.4cm(P<0.01)。研究结果表明,滋阴泻火中药可明显减慢性早熟儿童的骨骼生长,延缓其骨骼成熟,从而防止骨骺过早融合并改善最终身高。