缝隙连接通讯抑制剂对Cx43cDNA转染后化疗旁观者效应的影响

背景与目的:有研究通过转染Cx43cDNA观察到C6细胞化疗过程中存在旁观者效应,并推测缝隙连接细胞间通讯可能为化疗旁观者效应机制之一,本研究旨在探讨脑胶质瘤化疗旁观者效应与缝隙连接细胞间通讯功能的关系。方法:(1)质粒扩增,提取纯化及酶切鉴定:氯化钙法将质粒转入JM109菌株扩增,提取纯化后酶切鉴定;(2)基因转染:LipofectAMINE2000介导C6细胞质粒DNA转染,G418筛选,半定量RT-PCR及划痕荷载染料传输实验(SLDT)鉴定。(3)将转染后细胞分为实验组和对照组:将VM-26处理细胞与VM-26未处理细胞按不同比例在无VM-26环境混合培养,培养液中加入缝隙连接细胞间通讯功能抑制剂18α-次甘草酸(AGA)为实验组,不加AGA为对照组,以MTT法及流式细胞仪技术观察AGA对Cx43cDNA转染后化疗旁观者效应的影响。结果:(1)获得转染了相应质粒的细胞株C6-Cx43及C6-Non;(2)C6-Cx43细胞Cx43mRNA表达显著增加,染料传输能力较C6-Non明显增强;(3)C6胶质细胞缝隙连接细胞间通讯功能低下;(4)当转染Cx43cDNA,明显上调C6细胞缝隙连接细胞间通讯功能后...     

缝隙连接蛋白43对双自杀基因系统旁观者效应的影响

Objective： To observe the influence of connexin 43 （Cx43） on the bystander effect induced by cytosine deaminase （CD） and herpes simplex virus thymidine kinase （HSV-tk） coexpression suicide genes system in human cholangiocarcinoma QBC939 cells and transplantation tumors in nude mice. Methods： In vitro, the CD＋tk＋ and CD＋tk＋Cx＋ cells were respectively treated with 5-fluorocytosine （5-Fc） and Ganciclovir （GCV）. The cytotoxic effect was evaluated by MTT method. In order to investigate the influence of Cx43 on the bystander effect, the size of transplantation tumors of the CD＋tk＋ and CD＋tk＋Cx＋ cells was measured before and after application of 5-Fc and GCV. Results： CD and tk genes were stably expressed in transfected QBC939 cells. The increased expression of Cx43 was determined by testing for the presence of Cx43 mRNA by RT-PCR and the presence of Cx43 protein by Western Blot in CD＋tk＋Cx＋ cells. The killing effect of 5-Fc and GCV on CD＋tk＋Cx＋ cells was more effective than that on CD＋tk＋ cells both in vitro and in vivo. Conclusion： Double suicide genes system CD/5-Fc＋tk/GCV could induce remarkable killing effect on cholangiocarcinoma cells in vitro and transplantation tumors in vivo. The cotransfection of Cx43 gene could enhance the bystander effect and hence the inhibition of carcinoma cells.     

混合效应线性模型与单因素方差分析在重复测量数据中的应用比较

目的:通过混合效应线性模型与单因素方差分析在重复测量资料中的应用比较,旨在说明两方法在处理重复测量资料时的应用特点。方法:用混合效应线性模型和单因素方差分析处理重复测量资料并比较。结果:混合效应线性模型和单因素方差分析都是处理重复测量资料的重要统计方法,前者在选择协方差结构下可对重复测量资料的固定效应和随机效应参数及协方差矩阵进行参数估计和统计检验,后者可对重复测量资料的固定效应做出统计推断。结论:混合效应线性模型是处理重复测量资料的有力方法,它对资料的协方差结构要求宽松,且结论可靠;单因素方差分析对资料的协方差结构有严格的限定。     

口服及静脉胺碘酮的临床应用异同

胺碘酮起初作为血管扩张剂用于治疗心绞痛．近年来研究认为，胺碘酮是一种较为独特的抗心律失常药。既往因它能延长动作电位及复极时间而归为Ⅲ类抗心律失常药。但目前发现，它具有全部四类抗心律失常药物的特性：能抑制心肌细胞膜上的Na、K、Ca通道。除能有效抗心律失常。抗纤颤及抗交感神经等多种电生理效应外，导致心律失常的作用很小，远不同于其它三类心律失常药如索它洛尔，因此它在临床应用中日益受到重视。但慢性口服胺碘酮与静脉用胺碘酮的临床药理及作用有异同．在此简单阐述一下。     

世界药物新闻(七十九)

1阿巴他塞获准治疗顽固性风湿性关节炎2005年12月27日美国FDA批准施贵宝公司阿巴他塞(abatacept,商品名Orencia)注射剂用于中重度活动性类风湿性关节炎的成年病人,可延缓结构性损伤的进程,改善躯体功能,并产生主要的临床效应,减少其体征和症状。阿巴他塞适用于已经使用过一个或多个诸如甲氨喋呤或肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)拮抗剂缓解疾病的抗风湿药(disease-modifying antirheu-matic drugs,DMARDs)疗效不佳的病人。该药可以单独使用,也可与DMARDs合用,但是不能与TNF拮抗剂合用,也不推荐与阿那白滞素(anakinra)合用…     

氟西汀致眩晕1例

1病例男,20岁,门诊号857646,主诉心烦、情绪低落和悲伤3年。诊断为神经性抑郁,先后用过阿米替林、丙咪嗪、碳酸锂、文拉法辛和氟伏沙明,病情仍不稳,最后用帕罗西汀10 mg,情绪稳定,但终日困倦,缺乏精神,病人希望改善活力,改用氟西汀(开克,常州市第四制药厂,批号:060220NO·80)治疗。因既往有焦虑史,故从小量10 mg用起,早服,当日无焦虑,睡眠好,次日晨起呕吐、眩晕,感到房子旋转,不敢起床,睡觉2~3 h起床后眩晕消失,继续服10 mg·d-1,至第8天,不再出现眩晕。2讨论该病人无眩晕史,由于单用氟西汀次日出现眩晕,故考虑可能为氟西汀首剂效应。氟西…     

丹参注射液对自杀基因tk/GCV系统的协同增效作用

目的探讨丹参注射液联合自杀基因系统对大鼠肝癌细胞和小鼠移植瘤的作用。方法①丹参注射液以不同浓度与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk-细胞,以及含5%tk+的tk+、tk-混合细胞,MTT法检测各组存活率,用Q值(实测药效与理论药效的比值)分析中药与自杀基因系统联合的相互作用是否有协同性,0.85≤Q<1.15为相加;Q≥1.15为协同。②把小鼠肝癌细胞H22/tk(tk+)与H22(tk-)细胞按1∶4混合,再按2×106细胞/只接种到Balb/c纯系小鼠腋下皮下组织内,随机分为模型组、丹参(注射液)组、tk/GCV组、tk/GCV联合丹参注射液治疗的联合组,n=9~11;中药治疗从d 2起共15 d,自杀基因系统治疗从长出肿瘤后开始共10 d,进行疗效观察。结果①各组存活率tk/GCV组为63.10%±2.17%,GCV组为67.03%±2.81%,5 ml.L-1丹参联合tk/GCV组为26.67%±4.23%(Q=1.22),5 ml.L-1丹参+GCV组为42.17%±5.36%(Q=1.04);10 ml.L-1丹参联合tk/GCV组为18.10%±5.56%(Q=1.26),10 ml.L-1丹参+GCV组为33.84%±9.84%(Q=1.06)。②接种后各组均在d 7触摸到肿瘤,成瘤率100%。联合组在治疗后肿瘤生长呈现明显抑制,最终肿瘤体积(1.53±0.88)cm3,比模型组(3.19±1.76)cm3减少52.01%(P<0.05);肿瘤质量(1.32±0.80)g,比模型组(2.28±1.20)g减少42.11%(P<0.05),差异有统计学意义。丹参组、tk/GCV组肿瘤体积、瘤块质量与模型组比较差异均无统计学意义。结论丹参注射液能提高自杀基因系统对大鼠肝癌细胞的杀伤力和对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制作用,两者联合作用的协同性提示丹参注射液能增强自杀基因旁观者效应。     

紫杉醇PLGA微球制备及工艺优化

目的：以乳酸-羟基醋酸共聚物[-poly（lactic-co-glycolic acid），PLGA3为材料，制备用于肿瘤内注射的紫杉醇PLGA长效缓释微球。方法：采用改良溶剂蒸发法制备，使用星点设计一效应面法优化处方，并对药物体外释放进行评估。结果：以投药比（％）和聚乙烯醇（PVA）浓度为自变量，载药量、包封率、粒径和跨距为因变量进行多元线形回归和二次多项式拟合，结果表明二次多项式拟合的效果较好，较优工艺条件为投药比1．6％、PVA浓度2％。照优化工艺制得的微球形态圆整，载药量、包封率、平均粒径和跨距分别为1．53％，97．29％，42．72胛和0．95，与方程预测值的偏差分别为4．08％，1．91％，6．48％和-4．9HD％。微球体外释放30d累计释放率达56．19％。结论：本实验所得的紫杉醇PLGA微球满足缓释长效的要求，所建立的模型预测性良好。     

家兔“肺经大肠经”常用经穴测定及脏腑效应验证

目的 :客观确定家兔“肺经、大肠经”常用经穴。方法 :应用皮肤导电量测定及声测经络技术 ,将导电量较大、声波波幅值较高点确定为经穴点。并通过经穴一脏腑效应实验 ,验证其生理功能。结果 :家兔经穴处皮肤导电量较经穴旁对照点大 ,P <0 0 1;声波波幅值较经穴旁对照点高 ,P <0 0 1;经穴能够产生脏腑效应。结论 :家兔有类似人体的经穴 ,其经穴与人体经穴具有相同的生物物理学特性 ,并有相应的生理功能     

肿瘤患者放射治疗后淋巴细胞rDNA转录活性分析及临床意义

42例恶性肿瘤患者 ,其中单纯放疗组 2 6例 ,术后放疗组 1 6例 ,分别在放疗前后均行外周血淋巴细胞rDNA转录活性分析并随访 3年 ,单放组中放疗前无比值 >7病例 ,放疗后比值 >7者 1 6例 ,3年生存率为 68 8% ;术后放疗组中放疗前比值 >7者 3例 ,放疗后比值 >7者 1 3例 ,3年生存率为 76 9%。研究提示 ,肿瘤患者放疗前后淋巴细胞rDNA转录活性变化可用来评价放疗效果