反义端粒酶基因表达对肝癌细胞生长抑制的研究

目的：观察端粒酶基因hTRT反义表达对癌细胞生物学行为的影响,探讨人端粒酶逆转录酶反义基因治疗对肝癌细胞恶性表型的逆转作用.方法：含620bp端粒酶反义hTRT基因的PBSTRT质粒用Sal Ⅰ、BamH Ⅰ酶切后,插入真核表达载体pCDNA3 BamH Ⅰ、Xho Ⅰ酶切位点,构建成含反义hTRT基因的真核表达重组子.反义hTRT基因转染肝癌细胞株HepG1-6,观察其对肿瘤细胞生长的影响.结果：成功构建hTRT反义真核表达载体,并导入肝癌细胞株HepG1-6中,获表达hTRT反义基因的细胞系（HepG1-6/pCDNA3-反义hTRT）,该细胞系出现显著生长抑制现象,端粒酶活性明显下降,G0/G1期细胞增加,S和G2M期细胞减少,而HepG1-6/pCDNA3细胞则无明显变化.结论：反义hTRT基因治疗可以明显抑制HepG1-6细胞的增殖,部分细胞受阻于G1期,提示hTRT基因可以作为治疗肿瘤的靶基因.     

hTERT基因表达在肝细胞肝癌发生发展中的作用及意义

目的　研究端粒酶催化亚单位 (h TERT)基因表达在肝细胞肝癌 (HCC)发生发展中的作用及意义。方法　应用免疫组化 (SP法 )和半定量逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)同步检测 6 2例 HCC及其对应癌旁组织、8例正常肝组织中 h TERT及 h TERTm RNA的表达情况 ,分析 h TERT基因表达与 HCC临床病理参数的关系。结果　 h TERT蛋白主要定位于肝癌细胞胞浆内 ,偶见核内染色。h TERT和 h TERTm RNA在 HCC中的阳性率分别为 88.71%、82 .2 6 % ,分别明显高于癌旁肝组织的阳性率 9.6 8%、6 .4 5 % ,差异具有非常显著性 (P <0 .0 1)。 h TERT及其 m RNA在 8例正常肝组织均未见表达。统计学分析显示 ,HCC中的 h TERT基因表达与肿瘤分期分级、门静脉有无癌栓、血清中甲胎蛋白表达水平、是否合并 HBV感染等有关 (P <0 .0 5 )。结论　h TERT基因可能在 HCC的发生发展中起着重要作用 ,其表达有望成为 HCC的重要分子生物学指标。     

川牛膝多糖的抗肿瘤作用初探

目的:观察川牛膝多糖对S180荷瘤小鼠、H22肝癌小鼠的肿瘤抑制作用以及川牛膝多糖对环磷酰胺(Cy)所致小鼠(正常及荷瘤小鼠)外周白细胞减少的影响.方法:以动物移植性肿瘤荷瘤S180、肝癌为模型,环磷酰胺(Cy)为阳性对照,生理盐水为阴性对照,观察川牛膝多糖抗肿瘤作用;通过白细胞计数观察川牛膝多糖对环磷酰胺(Cy)所致外周白细胞减少的回升作用.结果:川牛膝多糖对S180荷瘤小鼠的抑瘤率为10.00-48.08%;对肝癌H22实体瘤的小鼠肝癌H22的抑制率为21.99-42.21%;对环磷酰胺(Cy)所致正常或荷瘤小鼠外周血白细胞减少有极显著的回升作用.结论:川牛膝多糖不仅有较强的抗肿瘤作用,还能对环磷酰胺(Cy)所致小鼠(正常及荷瘤小鼠)外周白细胞减少有明显的回升作用.