鼻咽癌p16和CyclinD1表达及其临床意义

[目的]探讨鼻咽癌组织中p16基因缺失和蛋白表达,以及CyclinD1蛋白表达的相关性及其临床意义。[方法]PCR检测151例鼻咽癌标本中p16基因缺失情况,免疫组化SP法检测鼻咽癌和正常鼻咽组织中p16蛋白和CyclinD1蛋白的表达。[结果]鼻咽癌组织中p16第2外显子的缺失率为35.76%（54/151）。p16蛋白在鼻咽癌组织中低表达（P〈0.0001）,但与鼻咽癌患者的性别、年龄、临床分期无相关性（P〉0.05）。CyclinD1蛋白在鼻咽癌组织中高表达（P〈0.0001）,但与鼻咽癌患者的性别、年龄、临床分期均无相关性（P〉0.05）。[结论]鼻咽癌组织中p16第2外显子缺失,p16蛋白低表达而CyclinD1蛋白高表达,两者间呈负相关性（P〈0.0001）。     

p53、CyclinD1和Ki67在双原发癌第二原发癌中的表达及其意义

目的:探讨双原发癌第二原发癌中p53、CyclinD1和Ki67表达的意义及其与双原发癌临床病理特征的相关性。方法:采用免疫组化法对43例符合标准并确诊为双原发恶性肿瘤的第二原发癌标本进行p53、CyclinD1和Ki67的检测。结果:p53、CyclinD1、Ki67在双原发癌第二原发癌标本的阳性表达率分别为60.5%、30.2%、65.1％。p53的阳性表达与间隔时间、病理分级、淋巴转移密切相关（P＜0.05）,CyclinD1及Ki67阳性表达与病理分级、淋巴转移密切相关（P＜0.05）;p53与CyclinD1、Ki67的表达均呈正相关性（r=0.313,P=0.041;r=0.319,P=0.037）。结论:p53、CyclinD1、Ki67蛋白高表达与双原发癌第二原发癌的恶性生物学行为密切相关,联合检测p53、CyclinD1、Ki67在双原发癌中的表达对评估预后具有指导意义,并提示第二原发癌在基因水平上可能出现了某种程度的异常,尚需进一步研究。     

Ras、MAPK、CyclinD1与皮肤病理性瘢痕癌变相关性研究

目的探讨Ras/Raf/MAPK信号通路及其通路下游靶基因CyclinD1与病理性瘢痕癌变的相关性。方法 (1)激光扫描共聚焦显微技术,对病理性瘢痕和瘢痕癌组织进行K-ras、H-ras、N-ras免疫荧光双标记。(2)免疫组织化学SP法分别检测正常皮肤、病理性瘢痕和瘢痕癌三组组织中MAPK、Cy-clinD1蛋白的表达。(3)原位杂交技术检测三组组织中MAPK mRNA、CyclinD1 mRNA的表达。(4)用基因测序技术,检测病理性瘢痕上皮中K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变。结果 (1)免疫荧光双标记:K-ras、H-ras、N-ras在病理性瘢痕上皮中呈现较弱荧光,为弱阳性表达;在瘢痕癌组织中呈现较强荧光,为强阳性表达。(2)MAPK及其mRNA和CyclinD1及其mRNA在正常皮肤表皮均呈阴性或弱阳性表达,在皮肤病理性瘢痕上皮中呈弱阳性表达,在瘢痕癌组织中呈强阳性表达。瘢痕癌组表达水平(阳性面积)、表达强度(平均吸光度)与正常皮肤、病理性瘢痕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但正常皮肤组与病理性瘢痕组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)在病理性瘢痕中未发现K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变。结论 (1)Ras、MAPK、CyclinD1蛋白及其MAPK mR-NA、CyclinD1 mRNA不是瘢痕上皮癌变的早期信号。(2)K-ras、H-ras、N-ras第12、13位密码子突变与病理性瘢痕上皮癌变无关。     

CyclinD1在卵巢上皮性及生殖细胞肿瘤中的表达

目的 :探讨癌基因 CCND1的蛋白表达产物 Cyclin D1在卵巢上皮性肿瘤、生殖细胞肿瘤中的表达及临床意义。方法 :采用免疫组化 PAP方法研究 10 0例卵巢上皮性肿瘤组织、生殖细胞肿瘤组织中 Cyclin D1蛋白的表达情况。结果 :Cyclin D1蛋白在卵巢良性、交界性、恶性肿瘤中的表达具有显著性差异 (P<0 .0 5 )。Cyclin D1蛋白的表达率随着临床分期的增高呈现出具有统计学意义的增高。在有淋巴结转移、腹水细胞学检查癌细胞阳性、远处脏器转移的患者中 Cyclin D1蛋白阳性表达率 ,与无转移者比较差异具有显著性意义 (P<0 .0 5 )。结论 :Cyclin D1蛋白的过度表达 ,在卵巢肿瘤的发生、发展过程中起作用 ,与卵巢癌的临床分期、淋巴结转移、远处脏器转移有关。通过检测卵巢肿瘤组织中 Cyclin D1蛋白的表达可用来预测肿瘤患者的预后     

PTEN,Ki-67和CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨PTEN,Ki-67和CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌发生发展中的作用及意义。方法采用免疫组化EnVision染色法检测PTEN,Ki-67和CyclinD1在30例皮肤鳞状细胞癌石蜡包埋组织、15例正常皮肤组织中的表达。结果①PTEN在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达率较对照组低(P<0.05),与肿瘤分级无相关性(P>0.05);②Ki-67在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达率较对照组高(P<0.01),与肿瘤分级相关(P<0.01);③CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达率较对照组高(P<0.01),与肿瘤分级相关(P<0.05);④PTEN与Ki-67在皮肤鳞状细胞癌中表达呈负相关(r=-0.411,P<0.05);PTEN与CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中表达呈负相关(r=-0.386,P<0.05);Ki-67和CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中表达呈显著正相关(r=0.623,P<0.01)。结论①PTEN在抑制皮肤鳞状细胞癌的发生发展中存在一定相关性,但与该肿瘤恶性分化程度的关系尚不明确;②Ki-67在皮肤鳞状细胞癌中阳性表达上调,与该肿瘤的分级呈正相关;③CyclinD1在皮肤鳞状细胞癌中阳性表达上调,与该肿瘤的分级呈正相关;④PTEN,CyclinD1与Ki-67三者中两两之间的相互关系反应了抑癌基因与癌基因相互协调、相互促进的关系。     

细胞周期调控基因与人类乳头状瘤病毒在子宫颈癌中的表达

目的分析细胞周期调控基因p16^INK4A、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）及Ki-67蛋白与人乳头状瘤病毒（HPV）16／18、31／33在子宫颈鳞状细胞癌（ISCC）中的表达,研究其在ISCC发生、发展中的作用和相关性。方法应用组织芯片结合原位杂交法和免疫组织化学法检测66例ISCC、35例子宫颈上皮内瘤变（CIN）、30例正常子宫颈鳞状上皮（NCE）中p16^INK4A、Cyclin D1、Ki-67和HPV16／18、31／33的表达。应用SPSS13．0统计软件分析结果。结果HPV16／18、p16^INK4A、Cyclin D1及Ki-67在ISCC中的表达明显高于CIN和NCE组,差异有统计学意义;p16^INK4A蛋白阳性表达率与组织学分级呈正相关;Ki-67阳性表达率与淋巴结转移和子宫颈管壁浸润深度呈正相关;Cyclin D1蛋白与临床各参数均无相关性（P〉0．05）。结论高危HPV在ISCC的发生、发展中起重要作用,p16^INK4A基因可能不是单纯作为抑癌基因在子宫颈癌中起作用,Ki-67可以作为鉴别良、恶性肿瘤的有价值的临床参考指标。     

Stat3通路相关基因在散发性大肠管状腺瘤癌变中的表达及意义

目的 探讨Stat3及CyclinD1、Bcl-xL在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法 采用免疫组化方法检测107例散发性大肠管状腺瘤异型增生及癌变组织中Stat3和CyclinD1、Bcl-xL在蛋白水平的表达情况。结果 腺瘤伴异型增生组和癌变组中的Stat3蛋白的表达明显高于正常大肠黏膜组(P=0.000),且癌变组中Stat3蛋白的表达高于腺瘤伴异型增生组(P=0.003);腺瘤伴异型增生组和癌变组中CyclinD1蛋白的表达均明显高于正常大肠黏膜组(P=0.000),且癌变组中CyclinD1蛋白的表达高于腺瘤伴异型增生组(P=0.000);大肠管状腺瘤伴异型增生组和癌变组中Bcl-xL在蛋白水平的阳性表达率均明显高于正常大肠黏膜组（P=0.000),而且癌变组中Bcl-xL的表达明显高于腺瘤伴异型增生组(P=0.000);Stat3、CyclinD1和Bcl-xL均随腺瘤异型增生程度的增高呈递增趋势。Stat3与CyclinD1、Bcl-xL 的表达存在正相关关系。结论 Stat3、CyclinD1和Bcl-xL可能在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中起一定的作用。     

人喉鳞癌组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达

目的:探讨喉鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16型E7、CyclinD1和Rb蛋白表达的变化.方法:采用免疫组织化学SABC法检测80例喉鳞癌、30例声带息肉组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达状况.结果:声带息肉组织中HPV16E7未见表达,喉鳞癌组织中的表达率为34/80(P＜0.000 1);声带息肉与喉鳞癌组织中Cy-clinD1的表达率分别为2/30和42/80(P＜0.000 1),Rb的表达率分别为25/30和42/80(P＜0.05).HPV16E7与CyclinD1的表达与临床分期、淋巴结转移情况和5 a生存率有关(P＜0.05或0.01).喉鳞癌组织中HPV16E7与Rb的表达相关(P＜0.01).结论:HPV16感染和Rb、CyclinD1的异常表达与喉鳞癌发生、发展有关.HPV16E7与CyclinD1可作为判定喉鳞癌预后的指标.     

细胞周期蛋白D1在环加氧酶-2诱导的大鼠神经细胞死亡中的作用

目的探讨环加氧酶-2诱导的大鼠神经细胞死亡的分子发病机制。方法原代培养大鼠胎鼠皮质神经细胞,给予缺氧再加氧处理;实验随机分为对照组、缺氧再加氧组及选择性抑制剂 缺氧再加氧组;用噻唑蓝比色法测定神经细胞生存率,用Western印迹法检测蛋白质的表达。结果环加氧酶-2及细胞周期蛋白D1(Cy-clinD1)在缺氧再加氧后神经细胞表达呈平行性、一致性增高;COX-2选择性抑制剂NS398能明显降低CyclinD1的表达;而CyclinD1选择性抑制剂flavopiridol对COX-2的表达则没有影响;flavopiridol还能明显改善缺氧再加氧后神经细胞的生存率(P<0.001)。结论COX-2诱导的缺氧性神经细胞死亡的分子发病机制可能是通过CyclinD1表达的增加使成熟神经细胞重新进入细胞周期而实现的。     

CyClinD1及MDR1在NSCLC中的表达研究

目的 :探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)中细胞周期蛋白D1 (CyclinD1 )及多药耐药基因 (MDR1 )的表达及临床意义。方法 :用鼠抗人CyclinD1 及鼠抗人MDR1 单克隆抗体对 4 0例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色 ,并与 10例肺良性病变比较。结果 :CyclinD1 及MDR1 在NSCLC中均有较高的表达 ,其阳性率分别为 6 7.5 %和4 7.5 % ;而在肺良性病变中 ,CyclinD1 无 1例表达 ,而MDR1 有 1例表达 ,阳性率为 10 % ;在NSCLC中 ,CyclinD1 表达与肿块大小 ,有无淋巴结转移 ,分化程度及临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ;而MDR1 表达则在肿块≥ 3cm高于肿块 <3cm(P<0 .0 5 ) ;有淋巴结转移高于无淋巴结转移 (P <0 .0 5 ) ,低～中度分化高于中～高度分化 (P <0 .0 5 ) ;Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期 (P <0 .0 5 )。结论 :CyclinD1 的过表达与肺癌的发生有关 ,是NSCLC的早期分子蛋白之一 ,而与NSCLC的发展和预后无关 ,可作为NSCLC早期诊断的指标之一。MDR1 的过表达与NSCLC的发展与预后有关 ,可作为NSCLC预后的指标之一 ,同时 ,有利于进行NSCLC耐药的监测与评价。