离体淋巴细胞经低氧及低氧预处理后免疫指标的变化

目的　观察急性低氧及低氧预处理后淋巴细胞 [Ca2 ]i的变化及与淋巴细胞增殖活化的关系。　方法　取正常人外周静脉血 ,用Ficoll Hypaque密度梯度离心法分离淋巴细胞。实验分 3组 :正常对照组、急性低氧组和低氧预处理组。用Fura 2 /AM荧光分光光度法检测 [Ca2 ]i。用ELISA法检测上清液中IgG和IL 2的分泌量。用MTT法检测淋巴细胞增殖率。　结果　急性低氧后淋巴细胞 [Ca2 ]i明显下降 ,与对照组比较差异有非常显著性意义 (P <0 0 1) ,同时淋巴细胞IgG和IL 2的分泌量以及淋巴细胞增殖反应也明显下降 ,与各自的对照组相比差异有非常显著性意义(P <0 0 1) ;低氧预处理后再进行急性低氧时 ,淋巴细胞 [Ca2 ]i、IgG和IL 2的分泌量以及淋巴细胞增殖反应均恢复到与对照组相近的水平 ,且与急性低氧组比较差异有非常显著性意义 (P <0 0 1)。　结论　急性低氧后淋巴细胞免疫功能下降 ,低氧预处理能改善淋巴细胞的免疫功能 ,其中 [Ca2 ]i的适应性变化发挥了重要作用。     

慢性心力衰竭患者外周淋巴细胞核因子-κB的活化及卡维地洛的干预作用

目的:研究慢性心力衰竭(CHF)患者外周淋巴细胞核因子(NF)-κB活化水平与CHF程度之间的关系,从NF-κB调控炎性细胞因子表达的角度,探讨β-受体阻滞剂治疗CHF的可能机制。方法:将40例CHF患者(CHF组)分成卡维地洛干预亚组(卡维地洛亚组,在传统CHF治疗的基础上加用卡维地洛,卡维地洛从3·125mg,bid开始,如无明显不良反应每1~2周剂量倍增,直至最大耐受剂量;14例)与非卡维地洛干预亚组(非卡维地洛亚组,除β-受体阻滞剂外的传统药物治疗;26例);以同期20例健康体检者作为正常对照组。应用免疫细胞化学法测定外周血淋巴细胞NF-κB活化的阳性率;同时测定高敏C反应蛋白(hs-CRP)、血沉(ESR)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVED)等指标。结果:①CHF患者外周血淋巴细胞NF-κB阳性率(66·95±2·81)%以及hs-CRP(6·61±1·11)mg/L、ESR(9·58±1·16)mm/h等炎性相关指标均显著高于正常对照组分别为(23·25±2·44)%、(1·34±0·20)mg/L、(5·10±0·44)mm/h,均P<0·01;②卡维地洛亚组患者NF-κB阳性率(55·64±3·34)%、hs-CRP(3·56±0·67)mg/L均较非卡维地洛亚组患者分别为(73·04±3·41)%、(8·25±1·59)mg/L有显著降低(均P<0·01),而ESR(7·00±0·80)mm/h也显著低于非卡维地洛亚组患者(10·58±1·54)mm/h,P<0·05;③CHF患者的外周淋巴细胞NF-κB的阳性率与LVED(r=0·414,P<0·05)、LVEF(r=0·356,P<0·05)、NYHA分级(r=0·584,P<0·01)、hs-CRP(r=0·650,P<0·01)、ESR(r=0·354,P<0·05)等均有显著相关性。结论:NF-κB的活化可能参与了CHF的恶化,卡维地洛治疗CHF的作用机制部分地与抑制NF-κB的活性而减轻炎性反应有关。     

淋巴细胞转移抗病毒活性的机理研究

本文研究了人淋巴细胞与FL细胞共同培养后干扰素介导的抗病毒活性转移的机理。受者FL细胞表达的抗病毒转移活性具有下述特点:①用PHA封闭FL细胞膜上的干扰素受体后,不影响FL细胞表达转移的抗病毒活性;②混合培养时存在的抗2-5P_3A_3抗体不影响FL细胞表达抗病毒活性;③用放线菌素D抑制FL细胞的mRNA合成,能抑制FL细胞表达抗病毒活性。据此我们认为,干扰素活化后淋巴细胞膜上形成的第二信使分子可能是介导细胞之间密切接触转移抗病毒活性的重要介质。     

急性化脓性扁桃体炎证候层次与T淋巴细胞亚群变化的相关性研究

目的探讨急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证患者外周血中T淋巴细胞亚群数目及比值变化。方法对85例急性化脓性扁桃体炎患者和30例健康体检儿童用采用流式细胞技术检测外周血中T淋巴细胞亚群的数目及比值。结果与正常对照组比较,卫分证组CD3+、CD4+细胞数目、CD4+/CD3+和CD4+/CD8+比值显著升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);气分证组CD3+、CD4+细胞数目、CD4+/CD3+和CD4+/CD8+比值明显升高,CD8+/CD3+比值显著降低,差异有统计学意义(P0.01);营分证组CD4+/CD3+和CD4+/CD8+比值显著升高,CD8+/CD3+比值显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。与卫分证组比较,气分证组CD3+、CD4+、CD8+细胞数目变化差异无统计学意义(P≥0.05);营分证组CD3+、CD4+、CD8+细胞数目均显著降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。与气分证组比较,营分证组CD3+、CD4+、CD8+细胞数目均显著降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论 T淋巴细胞亚群数目与比值的改变可能是急性化脓性扁桃体炎卫-气-营3个不同阶段传变的内在原因之一。     

氯丙嗪和氯氮平对小鼠生殖细胞和人淋巴细胞的诱变效应

为探讨氯丙嗪和氯氮平在使用临床治疗剂量时的遗传毒理效应，研究了两药对小鼠生殖细胞和小鼠子代体细胞的影响，以及对人体淋巴细胞姊妹染色单体互换（ＳＣＥ）频率及微核率的影响。结果显示：（１）连续给药５天后第１周两药高、中、低三个剂量组均能引起小鼠精子头部畸形率明显增高，但停药４周后对精子的致畸作用基本消失；（２）两药对小鼠睾丸细胞及子代体细胞的染色体结构畸变率均无明显影响；（３）两药在治疗剂量时对人淋巴细胞的ＳＣＥ频率及微核率无明显影响，治疗前后的自身对照研究亦未见两频率有明显改变；（４）两药的血药浓度与ＳＣＥ频率及微核率之间无量效关系。研究结果提示，两药在临床治疗剂量时对小鼠生殖细胞染色体结构以及对人体遗传物质均无明显损伤作用。     

葛根素对淋巴细胞P-糖蛋白表达的影响及降低激素耐药的作用

目的：探讨葛根素对淋巴细胞P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的影响及降低糖皮质激素耐药的作用,为提高糖皮质激素耐药患者的临床疗效提供新的思路和方法。方法：取健康志愿者静脉血10ml,密度梯度离心法分离淋巴细胞,贴壁培养去除单核细胞。予小剂量甲基泼尼松龙（2μg/ml）诱导细胞耐药,用非细胞毒浓度（80μg/ml）的葛根素干预,MTT试验检测激素耐药倍数和葛根素逆转倍数,流式细胞术检测淋巴细胞P-gp和200μg/ml甲基泼尼松龙刺激24h后AnnexinⅤ。结果：小剂量甲基泼尼松龙刺激72h可诱导淋巴细胞P-gp显著升高,甲基泼尼松龙耐药倍数为2.45±0.42。葛根素干预可显著降低耐药细胞P-gp,使甲基泼尼松龙对细胞的半数抑制率IC50显著降低,对激素耐药的逆转倍数为1.55±0.30;葛根素干预可使甲基泼尼松龙诱导细胞的AnnexinⅤ显著增高。葛根素独立干预无显著诱导细胞凋亡作用。结论：葛根素干预可显著降低淋巴细胞糖皮质激素耐药性,显著增强激素诱导淋巴细胞凋亡的作用。葛根素显著下调P-gp表达的作用可能是其降低激素耐药的重要机制之一。     

吲哚美辛对阻塞性黄疸病人外周血淋巴细胞IL-10、IL-2活性的影响

目的研究吲哚美辛对阻塞性黄疸病人外周血淋巴细胞IL-10、IL-2活性和血浆中前列腺素E2(PGE2)水平的影响。方法于阻塞性黄疸病人用药前及口服吲哚美辛(25mg,3次/d)7d后取周围血,分别用放射免疫和ELISA法测定其血浆中的PGE2水平及外周血淋巴细胞IL-10、IL-2活性。结果用药前,阻塞性黄疸病人血浆中PGE2水平及外周血淋巴细胞IL-10活性明显升高,而IL-2活性明显下降,且IL-10、IL-2的活性与PGE2水平显著相关;用药后,病人血淋巴细胞IL-2活性明显升高,而IL-10活性及血浆中PGE2水平明显下降,且与用药前相比有显著性差异。结论阻塞性黄疸病人存在细胞免疫功能受损,吲哚美辛能够明显改善其免疫功能状态,有可能成为临床上降低阻塞性黄疸病人易感性的有价值的药物之一。     

手术方式与T2期胆囊癌预后的关系

目的探讨手术方式与肿瘤侵犯胆囊壁全层但未穿透浆膜的他期胆囊癌预后的关系。方法回顾性分析1990-2004年收治的24例佗期胆囊癌的临床资料，采用Kaplan-Meier法分析胆囊癌根治组（14例）和单纯胆囊切除组（10例）的生存率和无瘤生存率。结果根治组和单纯胆囊切除组术后的1、3、5年生存率分别为100％、71％、54％和70％、30％、20％，两组生存时间的差异有统计学意义（x^2=4．659，P=0．031）。根治组和单纯胆囊切除组的中位临床无瘤生存时间分别为45和13．5个月，两组临床无瘤生存时间的差异有统计学意义（x^2=3．854，P=0．049）。结论对佗期胆囊癌应积极行胆囊癌根治手术，胆囊癌根治术是提高佗期胆囊癌长期生存率及临床无瘤生存率的有效手段。     

氟比洛芬酯与吗啡术后镇痛对消化道肿瘤患者淋巴细胞亚群的影响

目的观察氟比洛芬酯与吗啡术后镇痛对消化道肿瘤患者淋巴细胞亚群的影响。方法选择消化道肿瘤手术患者60例,随机均分为三组。术前氟比洛芬酯组(Ⅰ组)、术后氟比洛芬酯组(Ⅱ组)、单纯吗啡组(Ⅲ组),分别于麻醉诱导前即刻(T1)、术后24h(T2)、术后48h(T3)抽取外周静脉血2ml,测定T细胞分化抗原(CD3 )、辅助性T细胞(CD4 )、抑制性T细胞(CD8 )、CD4 /CD8 表达及淋巴细胞(Lcell)总数。结果Lcell总数三组T2时均低于T1时(P<0·01),Ⅲ组T3时与T1时比较仍明显减少(P<0·05),CD4 Ⅲ组T2时明显低于T1时(P<0·05)。CD3 在T2时Ⅲ组与Ⅰ组比明显减少(P<0·05),CD4 在T1时Ⅲ、Ⅱ组与Ⅰ组比明显减少(P<0·05)。结论三组免疫系统在术后均有不同程度的抑制,但使用氟比洛芬酯对免疫系统有明显的保护作用。     

长期混合淋巴细胞培养-细胞毒实验模型的建立

目的：建立一种能较逼真地模拟移植排斥反应的体外实验模型。方法：利用EB病毒转化的BI林巴母样细胞系作为刺激细胞,诱导同种异体或异种外周血单个核细胞增殖,并分化为效应细胞,然后检测效应细胞对刺激细胞源靶细胞的杀伤活性,建立长期混合淋巴细胞培养,细胞毒实验模型。结果：用不同刺激细胞诱导产生的效应细胞能有效杀伤刺激细胞来源的靶细胞,进一步克隆实验证实这种杀伤效应是由CD8^ 细胞毒性T淋巴细胞（CTL）所致,结论：长期混合淋巴细胞培养－细胞毒实验模型能较逼真地模拟器官移植受者体内发生的由CTL介导的急性排斥反应。