谷氨酰胺对内毒素血症幼年大鼠心肌肌动蛋白及其mRNA表达的影响

目的通过观察谷氨酰胺（glutamine,Gln）对内毒素血症幼年大鼠心肌肌动蛋白（alpha sarcomeric actin,α-SA）及其mRNA表达的影响,探讨Gln在大鼠内毒素血症中对心肌收缩功能的保护作用。方法选健康18日龄Wistar大鼠121只,按腹腔注射药物不同分为：0h对照组（Ctrl：生理盐水,n=11）,内毒素组（LPS,n=55）、谷氨酰胺组（Gln,n=55）;后两组又分为2．4、6、24及72h共5个时点,每个时点11只,在各指定时点分别将大鼠断头分离心脏,8只用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定α-SA mRNA表达,另3只左心室肌用甲醛固定,制成石蜡切片,用免疫组化方法测定α-SA蛋白质表达。结果（1）内毒素血症大鼠心肌α-SA及其mRNA与对照组相比较均有显著下降（P〈0．01）,LPS组在6～24h降至最低;而Gln组则延至24h为最低,72hGln组α-SA已与对照组差异不明显（P〉0．05）。（2）LPS与Gln组同一时点相比较,Gln组α—SA各时点均高于LPS组,而α-SA mRNA在4～72h高于LPS组,早期相差不明显（P〉0．05）。结论（1）α-SA及其mRNA表达在内毒素血症明显受到抑制,收缩蛋白合成减少,而非破坏增加,心肌收缩功能受损。（2）谷氨酰胺可以减轻LPS对α-SA及其mRNA表达的抑制作用,而且恢复较快。     

缺血再灌注损伤对新生鼠肾小管上皮细胞calpain的影响

calpain是一种钙依赖性半胱氨酸蛋白酶,钙离子浓度升高使其激活。细胞骨架蛋白和膜蛋白都是calpain的水解底物。过去calpain被认为介导了缺氧对心脏、肝脏和大脑所致的损伤。现在的研究发现其在缺血再灌注导致肾小管上皮细胞损伤过程中也起了重要的作用。2002年1月-2003年3月,我们进行实验研究,探讨新生大鼠肾小管上皮细胞在缺血再灌注不同时段calpain变化的特点,calpain对细胞骨架蛋白α-辅肌动蛋白（α-actinin）、F-肌动蛋白（F-actin）和细胞膜黏合分子β1-整合素（β1-integrin）的水解作用以及探讨calpain抑制剂对上述蛋白的保护作用。     

内皮细胞白细胞黏附分子-1对猪眼小梁细胞形态和细胞骨架的作用

目的研究内皮细胞白细胞黏附分子-1(ELAM-1)对猪眼小梁细胞形态和肌动蛋白细胞骨架的作用,探讨青光眼的发病机制。方法原代培养的猪眼小梁细胞,经白细胞介素1(IL-1)刺激活化后,结合ELAM-1抗体或IgG进一步交联,观察细胞形态、细胞间连接的动态改变及肌动蛋白和细胞厚度的改变。结果未经IL-1作用的猪眼小梁细胞不表达ELAM-1,IL-1作用后猪眼小梁细胞表达ELAM-1。经过IL-1活化的猪眼小梁细胞,结合ELAM-1抗体或IgG进一步交联后,细胞间隙扩大,细胞变圆、变厚,细胞立体感增强;肌动蛋白变稀疏,荧光弥散,细胞的刚性降低,细胞厚度增加。结论猪眼小梁细胞能表达ELAM-1,表达的ELAM-1通过与抗体结合或同时通过IgG交联影响肌动蛋白细胞骨架,改变细胞形态。     

小鼠日本血吸虫病肝纤维化肝脏CTGF的表达及意义

目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏中的表达状况及意义。方法用昆明小鼠感染尾蚴复制小鼠日本血吸虫病肝纤维化模型;RT-PCR和免疫组化分别检测小鼠肝脏CTGFmRNA和蛋白的表达,免疫组化方法观察各阶段肝脏α-SMA阳性细胞的表达。结果模型组10周时形成典型的肝纤维化,此时模型组小鼠肝脏CTGFmRNA和蛋白表达、α-SMA 细胞数达高峰,10周、14周、18周时与治疗组相比均有明显的统计学差异(P均>0.05);CTGFmRNA和蛋白表达水平与α-SMA 细胞数均呈直线相关性。结论CTGF基因和蛋白表达增高与小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成有密切关系;CTGF在小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成过程中的作用可能主要通过作用于活化的肝星状细胞来实现的。     

肾小球硬化大鼠肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白的表达特点及其与肾功能的关系

目的 探讨肾小球硬化大鼠肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达特点及其与肾功能的关系.方法 40只雄性8周龄Wistar大鼠随机分为假手术组及模型组,每组20只.采用单侧肾切除加l周后尾静脉注射多柔比星(5 mg/kg)的方法 建立肾小球硬化大鼠模型,检测12周末各组大鼠24 h尿蛋白、血清肌酐(Scr)、BUN水平,肾脏病理切片采用常规苏木索-伊红(HE)染色,观察肾脏组织病理改变,评估肾小球硬化程度,并计算其肾小球硬化指数.应用免疫组织化学染色方法 (Supervision TM)检测其肾小球及肾小管α-SMA蛋白表达.应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其肾脏组织α-SMA mRNA表达.应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白、scr和BUN的水平显著增高(P.<0.01);肾小球硬化指数显著增高(t=13.82 P<0.01);免疫组织化学染色及RT-PCR显示模型组大鼠肾小管、肾小球α-SMA mRNA表达水平均较假手术组显著增高(t=23.86,19.87,8.49 P.<0.01).模型组大鼠肾小球和肾小管α-SMA蛋白表达水平与肾小球硬化指数间存在显著正相关(P.相似文献   

糖尿病心肌病心肌纤维化病理变化的研究

目的研究糖尿病大鼠不同病程心肌纤维化及其相关病理的变化。方法①制造糖尿病大鼠心肌模型随机分组；②氯胺T法测定羟脯氨酸含量，代表心肌胶原总含量。心肌免疫组织化学染色测定心肌胶原蛋白（CollagenⅠ、CollagenⅢ）和心肌型α肌动蛋白（α-actin）及转化生长因子β1平均积分光密度；③心肌病理改变的光镜和透射电镜观察。结果糖尿病病程6个月组心肌胶原总含量明显高于病程3个月以内组（P〈0．01）。病程3个月之后CollagenⅠ表达伴随TGF-β1的表达开始较健康鼠明显增加（P〈0．01）。α-actin蛋白表达较健康鼠明显减少（P〈0．01）。病程3个月后α-actin蛋白表达明显减少，有糖原沉积现象。结论CollagenⅠ呈现持续性增加是糖尿病鼠心肌纤维化的主要原因。TGF—β1参与了心肌纤维化发生的早期过程。糖原沉积和心肌型actin表达减少是糖尿病心肌病病理基础。     

PAX2在肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的 揭示核转录因子（PAX2）在肾小管上皮细胞转分化过程中的可能作用。方法 38例病例组肾组织按间质病变程度分为轻、中、重3组，其中轻度病变15例，中度病变11例，重度病变12例；对照组为5例外伤后肾切除组织。采用免疫组化法评定肾组织PAX2的表达率和肾小管上皮细胞转分化率。对肾间质病变轻、中、重3组组内肾小管上皮细胞转分化率、PAX2表达率作方差分析，对PAX2表达量与肾小管上皮细胞转分化率作相关分析。结果 正常对照组肾小管上皮细胞只表达角蛋白（CK），不表达平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及PAX2。病例组肾间质病变轻、中、重3组肾小管上皮细胞均不同程度表达α-SMA及PAX2；不同肾间质病变组，肾小管上皮细胞转分化率及PAX2表达量差异均有统计学意义。相关分析表明，PAX2表达量和肾小管上皮细胞转分化率呈正相关（r=0．886，P〈0．05）。结论 PAX2回归表达可能导致肾小管上皮细胞转分化。     

肝硬化中肝脏祖细胞的激活与扩增

为证实肝硬化组织中存在人肝脏祖细胞（HPCs），探讨HPCs分布及激活的强度与肝脏炎症程度的关系，提供HPCs向肝细胞分化的依据。对30例肝硬化及3份正常组织标本进行常规组织学观察，对门静脉炎症程度进行评分，并用胆管上皮标志物（细胞角蛋白7）和肝星状细胞激活标志物（a平滑肌肌动蛋白）进行免疫组织化学染色，对符合HPCs、中间型肝细胞以及小管样反应的细胞进行计数和半定量评分。结果，在正常肝组织中无门静脉周围HPCs和小管样反应增殖。在肝硬化组织中，增殖的HPCs起源于肝门静脉区域，随着门静脉炎症程度加重，     

血管平滑肌细胞移行及表型转换的分子机制

在动脉粥样硬化发生、发展的不同阶段,血管平滑肌细胞表型转换具有重要且可能是不同的病理生理学意义。文章复习了近年动脉粥样硬化病损内膜中血管平滑肌细胞来源、血管平滑肌细胞表型转换的分子机制及鉴别不同平滑肌细胞表型的标志性分子,以期为深入理解动脉粥样硬化的发病机制和相关研究提供有益认识。