转基因过表达肌浆网钙ATP酶基因治疗慢性心力衰竭的实验研究

目的研究肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)转基因在非缺血性和缺血性心力衰竭中的治疗价值。方法构建含SERCA2acDNA的重组腺病毒和腺相关病毒载体,制备腹主动脉缩窄和心肌梗死心力衰竭两种心衰大鼠模型,分别采用经膈将病毒液(2×1011病毒颗粒)注入心包腔,和局部心肌注射方法导入病毒,术后10~30d经颈动脉插管至左心室进行血流动力学检测。结果重组腺相关病毒rAAV2-SERCA2a导入主动脉束扎心衰大鼠心包腔后10d、30d其血流动力学与对照治疗组(rAAV2-EGFP)组相比有明显改善,30d左室收缩压(LVSP)、左室内压最大上升速率(+dp/dt)、左室内压最大下降速率(-dp/dt)分别提高57%(94mmHgvs147mmHg)、110%(5350mmHg/svs11225mmHg/s)和99.8%(4198mmHg/svs8390mmHg/s),左室舒张末压(LVEDP)则降低60%(22mmHgvs9mmHg)。转导SERCA2a后,rAAV-SERCA2a导入组在30d时SERCA2a蛋白质表达明显高于心衰组和rAAV2-EGFP导入组,达到对照组大鼠水平。重组腺病毒rAV-SERCA2a导入心肌梗死心力衰竭心衰大鼠心肌后21d血流动力学明显优于rAAV2-EGFP导入组,LVSP、+dp/dt和-dp/dt分别提高28%(86mmHgvs110mmHg)、41%(4272mmHg/svs6026mmHg/s)和71%(2789mmHg/svs4756mmHg/s),LVEDP则降低70%(3.89mmHgvs-5.34mmHg),但未能纠正至对照组水平。结论重组腺相关病毒rAAV2-SERCA2a和腺病毒rAV-SERCA2a,介导SERCA2a在大鼠心肌过表达,可有效改善心衰大鼠模型血流动力学状况。     

槲皮素逆转白血病细胞株HL-60/ADM多药耐药的研究

目的探讨槲皮素(Que)逆转白血病细胞多药耐药在膜转运蛋白方面的机制。方法通过四唑蓝体外药敏法,检测Que对柔红霉素(DNR)的增敏作用,并以不同浓度作用于HL-60／ADM耐药株及相应敏感株HL-60;运用逆转录多聚酶链式反应和流式细胞术,检测HL-60／ADM和HL-60细胞株多药耐药相关基因1(MRP1)及其膜蛋白产物MRP1蛋白的表达情况;借助激光共聚焦显微镜,观察DNR在亚细胞水平的分布变化。结果20～40μmol／L终浓度的Que在体外能明显提高DNR对HL-60／ADM耐药株的敏感性,并能下凋MRP1基因及其膜蛋白产物MRP1的表达,使DNR回归于细胞核内,从而逆转多药耐药,而且对细胞本身无明显毒性作用。结论Que有可能成为蒽环类药物治疗白血病的有效且低毒的化疗增敏剂。     

电针对MCAO大鼠侧脑室微量注射5-硫D-葡萄糖、环孢菌素A阻滞剂后的干预机制

<正>目的:通过研究针刺对局灶性脑缺血(MCAO)大鼠侧脑室微量注射Glut-1、P-gp阻滞剂(5-硫D-葡萄糖、环孢菌素A)后微血管内皮细胞转运功能的影响,探讨针刺是否通过影响微血管内皮细胞的Glut-1和P-gp表达,减轻缺血后神经细胞损伤,保护缺血脑组织。为针刺治疗脑缺血性疾病提供实验及理论依据。方     

HER-2、HIF-1a、GLUT-1及VEGF表达在乳腺浸润性导管癌淋巴结转移中作用

目的 研究人表皮生长因子2(HER-2)与乏氧诱导因子1a(HIF-1a)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺浸润性导管癌组织中的表达,探讨它们在乳腺浸润性导管癌淋巴结转移中的作用.方法 应用免疫组化SP法检测80例乳腺浸润性导管癌(腋淋巴结转移者36例、无腋淋巴结转移者44例)的HER-2、HIF-1a、GLUT-1及VEGF的表达情况,统计分析HER-2、HIF-1a、GLUT-1及VEGF与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移的作用及其相关性.结果 HER-2、HIF-1a、GLUT-1及VEGF在乳腺浸润性导管癌腋淋巴结转移组比无腋淋巴结转移组明显高表达(P<0.05);HER-2与HIF-1a的表达呈正相关(r=0.411,P=0.000);HIF-1a与GLUT-1的表达呈正相关(r=0.389,P=0.000);HIF-1a与VEGF的表达呈正相关(r=0.425,P=0.000).结论 HER-2、HIF-1a、GLUT-1及VEGF在乳腺浸润性导管癌淋巴结转移中发挥重要作用,HER-2可能通过HIF-1a对GLUT-1、VEGF进行调控.     

HIC介导HIV-1 Rev在核定位信号区的分子间掩蔽——调控Rev核输入的新见解

人免疫缺陷病毒(HIV-1)调节蛋白Rev是病毒复制中调节非拼接转录本出核转运所必需的。Rev核功能需要活跃的核质穿梭,Rev核输入由它的核定位信号介导,并受多种因素影响,其中包括转运蛋白和输入蛋白B。爱尔兰科学家的研究工作确认细胞蛋白HIC(human Ⅰ-mfa domain-containing protein)能与HIV-1 Rev蛋白相互作用。HIC选择性干扰Rev在核定位     

阻断胰腺癌平衡型核苷转运载体对5-氟尿嘧啶诱导细胞凋亡及细胞周期改变的影响

目的研究应用潘生丁(DP)阻断平衡型核苷转运载体(hENTs)后,5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌细胞株Panc-1凋亡及细胞周期的影响。方法将Panc-1细胞分为hENTs未阻断组和hENTs阻断组,hENTs阻断组再根据DP浓度分为5μmol/L DP组和10μmol/L DP组。各组细胞分别在含有1.5×106ng/L 5-FU或不含5-FU的培养液中培养24 h后,流式细胞仪检测细胞的凋亡率和细胞周期改变。结果①各组细胞凋亡检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,5μmol/L及10μmol/L DP组的细胞凋亡率明显高于未阻断组(P<0.05),10μmol/L DP组又明显高于5μmol/L DP组(P<0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组之间细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。②各组细胞周期检测结果:在含有1.5×106ng/L 5-FU培养液中培养24 h后,未阻断组细胞进入合成期(S期)的比例减少,停滞在合成前期(G1期),5μmol/L DP组及10μmol/L DP组的细胞进入合成期(S期)的比例较未阻断组进一步减少(P<0.05),且随着DP浓度的增加,细胞进入合成期(S期)的比例减少得更多(P<0.05),5μmol/L DP组和10μmol/L DP组进入合成期(S期)的比例分别是未阻断组的87.09%和74.06%。5-FU对细胞合成后期(G2期)的影响较小,除5μmol/L DP组较未阻断组G2期细胞数量增加有统计学意义(P<0.05)外,其余各组之间差异均无统计学意义(P>0.05);在不含5-FU的培养液中培养24 h后,各组细胞周期中各期无明显改变,各组之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在胰腺癌细胞株Panc-1中,DP阻断细胞膜上hENTs后,能显著增强5-FU对胰腺癌细胞促凋亡作用及抑制胰腺癌细胞分裂增殖的作用,这种增强作用可能与阻断hENTs后细胞内5-FU浓度提高有关,而与DP本身作用无关。     

低氧预处理对大鼠BMSCs葡萄糖代谢的影响

目的观察低氧预处理对BMSCs葡萄糖代谢的影响,探讨其潜在机制,为干细胞疗法的优化提供理论依据。方法取1～3日龄SD大鼠骨髓,采用密度梯度离心法获得BMSCs,取第4代细胞用于实验。根据处理方法不同将细胞分为4组:A组采用常氧培养24 h;B组以1%低氧浓度培养24 h;C组于低氧预处理前用20μmol/L甲氧雌二醇处理24 h;D组于低氧预处理前用50μmol/L缺氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor 1,HIF-1)特异的siRNA处理12 h。采用MTT法、生化分析仪及实时荧光定量PCR检测各组BMSCs活力、葡萄糖代谢以及HIF-1αmRNA及葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,Glut-1)mRNA的表达。结果 MTT检测示A、B、C、D组吸光度(A)值分别为387.67±58.92、322.50±50.60、297.00±53.00、286.00±41.00,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。与A组相比,B组葡萄糖摄取量和乳酸生成量显著增加(P<0.05);C、D组略高于A组,但差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05);C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与A组相比,B组HIF-1αmRNA和Glut-1 mRNA表达均显著上调(P<0.05);C、D组HIF-1αmRNA和Glut-1 mRNA表达较B组大幅度降低(P<0.05),但仍显著高于A组(P<0.05);C、D组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论低氧预处理可上调大鼠BMSCs的葡萄糖摄取和代谢能力,其机制涉及HIF-1 mRNA及其下游基因Glut-1 mRNA的表达上调。     

遗传性肾小管转运缺陷的诊治进展

遗传性。肾小管疾病是指因遗传因素所致的以肾小管重吸收、分泌及排泄功能障碍为主要特征的肾脏疾病。常以一种或多种肾小管的转运功能障碍为主要表现或使动环节。目前包含的疾病种类繁多,累及的突变基因各异,遗传方式不一,尚无统一分类方法。由于其临床及实验室复杂多变,虽发病率低,但漏诊、误诊不少,故应引起临床重视。本文就常见的遗传性肾小管疾病的诊治进展做一综述。     

批量烧伤患者现场急救与转运过程中的护理体会

各种自然灾害及突发大型伤害事件会导致批量伤亡患者的出现。联合国对批量伤亡的定义是：一个突发情况需处理大量伤员,导致医源不足,因此患病和死亡的可能性将上升。科学的急救方法及合理的转运方式可以降低伤亡率,并为后续治疗创造条件。现结合我院收治的两批批量烧伤患者的救治情况,总结批量烧伤患者现场急救与转运过程中的护理方法,报告如下。