HSV-TK/GCV系统在难治性卵巢癌裸鼠移植瘤模型中的实验研究

目的:建立人难治性卵巢癌荷瘤裸鼠模型,用HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗模型动物,观察疗效及协同因素。方法:常规培养携带HSV-TK基因的重组逆转录病毒包装细胞PA317,测定病毒滴度。在移植瘤内多点注射包装细胞,观察GCV、ATRA、TPT对移植肿瘤独立及协同治疗后的肿瘤体积变化。治疗结束后分析移植肿瘤组织病理,PCR检测TK基因在NIH3T3细胞及移植肿瘤组织的转导。结果:人卵巢癌标本裸鼠原代移植成功率16.7%,鼠间传代移植成功率89.7%;重组逆转录病毒滴度为6×104cfu/ml;HSV-TK/GCV系统或TPT治疗后肿瘤生长受到抑制(P<0.05),两者联合治疗后,抑制更明显(P<0.05);ATRA灌胃未显示独立或协同治疗作用(P>0.05);HSV-TK/GCV组、TPT组及两者联合组有明显的治疗反应;PCR检测证实,TK基因在NIH3T3细胞及肿瘤组织中的转导。结论:HSV-TK/GCV系统及TPT对人难治性卵巢癌荷瘤裸鼠有单独及协同治疗作用,全反式维甲酸灌胃对人难治性卵巢癌荷瘤裸鼠疗效不明显。     

遗传性乳腺癌-卵巢癌综合征

卵巢癌是严重威胁妇女健康的常见恶性肿瘤之一，是妇科恶性肿瘤致妇女死亡的首位疾病。近年来的研究发现，遗传因素是卵巢癌发病最重要的危险因素。有学者将卵巢癌和乳腺癌分为散发性、家族性和遗传性3类。散发性癌多是指在患者的一级或二级亲属中没有乳腺癌或卵巢癌发生；家族性癌是指有2个或以上的一级或二级亲属患有乳腺癌或卵巢癌，但不具有明显的遗传倾向；遗传性癌则是在家族中有卵巢癌或乳腺癌聚发，并符合常染色体遗传特征，多有基因突变。约有5％～7％的乳腺癌以及10％的卵巢癌有遗传倾向。已经确定的3个遗传性卵巢癌综合征包括：遗传性位点特异性卵巢癌综合征，遗传性乳腺癌．卵巢癌综合征（hereditary breast-ovarian cancer syndrome，HBOC）及遗传性非息肉性结直肠癌。其中，以HBOC最常见。HBOC是指一个家族中有2个一级亲属或1个一级亲属和1个二级亲属患乳腺癌或卵巢癌，并具有遗传倾向。了解和研究HBOC在临床上对于发现具有卵巢癌高发风险的人群，并进行严密的观察、咨询、预防、早期诊断和治疗具有重要意义。     

腺苷对大鼠缺血性急性肾衰竭的干预作用

目的探讨腺苷对大鼠肾缺血再灌注(IR)损伤的干预作用。方法用无损伤动脉夹钳夹大鼠双侧肾蒂40 min制成缺血性急性肾衰竭(IARF)动物模型。早期腺苷干预组于IR前2 h腹腔注射腺苷(10 mg/kg),晚期干预组于缺血40 min后同样剂量腺苷。观察IR 2、6、12 h后各组血清肌酐(Scr)、肾小管上皮细胞凋亡水平及肾脏病理组织学改变。结果1.IR组12 h后的Scr和肾小管上皮细胞细胞凋亡细胞数分别为(198.56±13.35)μmol/L、26.50±2.07,明显高于假手术组(P<0.01);早期腺苷干预组及晚期腺苷干预组Scr和肾小管上皮细胞细胞凋亡细胞数分别为(113.85±12.90)μmol/L、14.67±3.44及(218.79±37.65)μmol/L、20.83±5.27,均较假手术组显著升高(P均<0.01);2.早期腺苷干预组肾脏病理组织学、Scr及肾小管上皮细胞凋亡水平均较IR组、晚期干预组明显降低(P<0.01);而晚期腺苷干预组肾脏病理组织学、Scr及肾小管上皮细胞凋亡水平与IR组比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。结论缺血前予腺苷对大鼠肾脏IR性急性损伤具有保护作用,其机制可能是通过降低能量消耗,减少细胞凋亡。     

ERK信号转导通路蛋白在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及与肿瘤恶性程度的相关性研究

目的研究细胞外信号调节激酶p-ERK1/ERK2在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达与临床的病理关系。方法应用免疫组织化学方法检测p-ERK1/ERK2在33例卵巢上皮细胞癌,21例良性卵巢上皮性肿瘤标本中的定性表达情况,采用Image-ProPlus图象分析系统对表达强度行半定量分析。结果①p-ERK1/ERK2在良性上皮性肿瘤中的表达率为33.3%,在卵巢上皮细胞癌中的表达率为72.7%,其中Ⅳ期、Ⅲ期的表达明显高于Ⅱ期、Ⅰ期(P<0.05);②p-ERK1/ERK2表达强度与肿瘤组织病理学分期有关(P<0.05),良性肿瘤的表达明显低于恶性肿瘤(P<0.05)。结论p-ERK1/ERK2在卵巢上皮细胞癌中高表达,且表达强度与卵巢上皮细胞癌的分期相关;ERK蛋白的表达在卵巢上皮细胞癌患者的发生、发展中可能起重要促进作用,可以作为预测卵巢上皮细胞癌恶性程度及预后的指标。     

小分子干扰RNA诱导卵巢上皮性癌细胞凋亡的实验研究

表皮生长因子受体2（HER-2）是HER-2原癌基因编码的一种酪氨酸蛋白激酶，研究表明，过度表达的HER-2基因通过激活瑚等信号分子，导致细胞过度增殖和恶性变，抑制细胞凋亡，与肿瘤的恶性程度和转移能力密切相关。已有研究证明，30％的卵巢上皮性癌（卵巢癌）存在HER．2基因的高表达。RNA干扰（RNA interference，RNAi）是生物进化过程中保留的一种防御机制，可以介导互补基因的靶向性降解。本研究拟应用RNAi技术，合成针对HER-2基因的特异性小分子干扰RNA（small interference RNA，siRNA），转染卵巢癌细胞株SKOV3细胞，探索siRNA诱导卵巢癌细胞凋亡的机制。     

宫颈癌患者末梢血腺苷脱氨酶活性表达57例初步分析

目的:探讨宫颈癌患者末梢血腺苷脱氨酶(ADA)活性水平。方法:采用干燥全血ADA活性测定法对57例宫颈癌患者及117例正常对照者末梢血ADA活性进行了测定。结果:宫颈癌患者ADA活性值为198.46±22.72 U/L明显低于正常对照组323.84±32.64 U/L,二者有显著差异性(P<0.01)。Ⅰa期宫颈癌组ADA活性值为176.32±18.20 U/L,明显低于宫颈原位癌组220.58±20.12 U/L;二者差异有显著意义(P<0.01)。结论:末梢血ADA活性表达与宫颈癌明显相关并随病程变化而有明显差异。     

重组人活化蛋白C对大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用

目的探讨重组人活化蛋白C(rhAPC)对急性胃黏膜损伤的保护机制。方法SD大鼠24只,随机分为四组:A组为正常组,B组为模型组,C组为rhAPC预处理组,D组为生理盐水对照组。采用浸水束缚应激(WRS)的方法制备大鼠急性胃黏膜损伤的模型,C组在WRS开始前半小时通过鼠尾静脉注入rhAPC(100μg/kg),D组在同一时间点注入同等量的生理盐水。计数各组大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)。分离胃黏膜上皮细胞,并制成细胞浓度为1×106/ml的单细胞悬液,加入荧光染料DiOC6,上流式细胞仪检测胃黏膜线粒体跨膜电位。采用ELISA法检测各组血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6的浓度。结果B组胃黏膜UI,血清TNF-α、IL-6的浓度均较A组明显升高(P<0.001),胃黏膜线粒体跨膜电位较A组明显下降(P<0.001)。C组胃黏膜UI,血清TNF-αI、L-6的浓度均较B组显著下降(P<0.001),胃黏膜线粒体跨膜电位较B组显著升高(P<0.001)。结论rhAPC可抑制TNF-αI、L-6的释放,抑制线粒体跨膜电位降低,从而对胃黏膜急性损伤起保护作用。     

腺苷蛋氨酸治疗新生儿黄疸202例

目的观察腺苷蛋氨酸(SAMe)治疗新生儿黄疸的疗效,探讨其作用机制。方法新生儿黄疸患儿278例,随机分为两组。对照组76例予以肝酶诱导剂、光疗等综合治疗;治疗组202例在综合治疗基础上加用SAMe 30~60 mg/(kg.d),静脉注射。动态检测血清总胆红素(T-BILI)、直接胆红素(D-BILI)、间接胆红素(I-BILI)。结果治疗组用药6 d后血清T-BILI、D-BILII、-BILI明显下降。治疗组较对照组治愈率明显高,与对照比较应用血液制品、清蛋白(Alb)次数及应用血液制品、Alb血浆的比例明显减少。治疗组以葡萄糖注射液溶解药物者2.68%发生浅表血管静脉炎。结论SAMe能有效地加快新生儿黄疸的消退,减少血液制品应用,是新生儿黄疸可靠、安全的治疗药物。     

系统性红斑狼疮患者CD62p表达的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者血小板膜表面CD62p的表达水平，了解患者血小板功能的变化。方法：用荧光素标记的单克隆抗体和流式细胞仪测定SLE患者CD62p的表达水平．用全自动血细胞分析仪进行血小板计数（BPC），用全自动血凝仪测定血浆凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）及纤维蛋白原（Fg）。结果：SLE患者CD62p的表达水平明显高于对照组，BPC低于对照组，CD62p的变化与BPC无关。结论：SLE患者CD62p表达水平明显升高，提示大量血小板活化，参与炎症反应及血栓形成，患者体内存在血小板数量与功能双重变化。     

咪喹莫特治疗哮喘作用机制的实验研究

目的：观察咪喹莫特对小鼠哮喘模型气道炎症和肺组织n2型胸腺和活化调节趋化因子（thymus and activation regulated chemokine，TARC）和其受体CCR4表达的影响。方法：建立哮喘模型．自第14天雾化吸入OVA前0．5h．干预组分别雾化吸入咪喹莫特30min及腹腔注射地塞米松。OVA雾化结束后24h，每组小鼠眼球摘除采血收集血清，采用酶联免疫吸附法测定血清中TARC水平；收集肺泡灌洗液进行细胞计数和分类；HE染色观察肺组织炎症改变；用免疫组化方法检测肺组织CCR4和TARC的表达；用逆转录．聚合酶链反应半定量检测肺组织IL-4、IFN-γ、CCR4和TARC mRNA表达水平。结果：①哮喘小鼠HE染色可见气道上皮不完整，黏膜下有大量的炎细胞浸润，以淋巴细胞为主。地塞米松组和咪喹莫特组炎症程度减轻。②哮喘组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及各种炎症细胞较正常组显著增加。眯喹莫特治疗组的嗜酸性粒细胞、单核细胞租淋巴细胞比哮喘组明显减少。③哮喘组小鼠血清TARC水平较正常组升高，咪喹莫特治疗组小鼠血TARC水平较哮喘组降低，与正常组比较差异无显著性。④CR4和TARC均在气道上皮细胞表达．咪喹莫特和地塞米松治疗组能减少CCR4和TARC的表达。⑤哮喘组小鼠肺组织IL-4、CCR4和TARC mRNA表达较正常组增强。咪喹莫特和地塞米松治疗组小鼠肺组织IL-4、CCR4和TARCmRNA表达较哮喘组降低，比正常组表达增加。结论：雾化吸入咪喹莫特可在一定程度上减轻哮喘小鼠的气道炎症。抑制肺组织CCR4和TARC蛋白和mRNA的过度表达。