以思维能力培养为核心的生物化学教学设计与体会

目的思维能力是世界各国学校教育的主要目标之一,也是医学生综合素质与能力的重要体现,在高等教育尤其是医学院校教育中起着举足轻重的作用。我们拟通过多方位改进生物化学教学设计和实施,以实现培养本科生的思维能力。方法利用我校医学整合课程和模块化教学改革的条件,结合我教研室多年开展本科生生物化学讨论课的实践基础,我们在生物化学教学中采取拓展延伸物质代谢课、系统优化讨论课、设立指导性自学课、设置发散性问题等,全方位改进教学设计和实施。结果通过上述举措,我们构建了以思维能力培养为核心的医学生物化学教学模式,该模式能够全面培养与提高学员的思维能力和综合素质,同时极大地促进了教学相长。结论以思维能力培养为核心的生物化学教学设计与实施是提高教学效果的有效方法和手段,值得进一步完善和推广。     

女性原发性生殖道恶性黑色素瘤的临床病理特征及预后分析

目的:探讨女性原发性生殖道恶性黑色素瘤的临床病理特点及鉴别诊断,分析影响预后的因素.方法:收集女性原发性生殖道恶性黑色素瘤21例,观察其临床病理特点,进行免疫组织化学染色,并用寿命表分析法和Kaplan-Meier法分析影响预后的因素.结果:免疫组化结果显示,S-100、HMB45,Melan-A和Vim均呈阳性表达.预后分析显示,中位生存时间为42个月,5年生存率为24%.外阴、阴道和宫颈恶性黑色素瘤患者的中位生存时间分别为43、60和34个月.外阴恶性黑色素瘤患者单纯手术治疗的生存时问长于手术加其他辅助治疗或单纯辅助治疗.差异有统计学意义,χ2=11.592,P=0.003;阴道恶性黑色素瘤惠者手术加其他辅助治疗的生存时间长于单纯手术治疗或单纯辅助治疗,差异有统计学意义,χ2=10.368,P=0.006.Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期患者平均生存时间分别为88、53和27个月,Ⅰ期患者的生存时间长于Ⅲ期患者,差异有统计学意义,χ2=4.947,P=0.026.原发肿瘤部位、肿瘤大小、复发及转移与生存时间无相关性,P>0.05.结论:女性原发性生殖道恶性黑色素瘤恶性程度高,预后差.S-100、HMB45、Melan-A和Vim联合标记可提高诊断恶性黑色素瘤的准确率.     

PHA-CD3AK细胞的体外诱导及其生物学特性初步研究

目的:研究PHA-CD3AK细胞的体外诱导方法及其生物学特性,并与LAK细胞进行比较.方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),采用植物血凝素(PHA)、单克隆抗体(anti-CD3McAb)和基因重组人白细胞介素2(rhIL-2)、共同诱导制备PHA-CD3AK细胞;应用流式法分析PHA-CD3AK细胞的免疫表型、乳酸脱氢酶法(LDH)检测PHA-CD3AK细胞的杀伤活性,并观察其形态;吉姆萨染色法观察其核型.结果:微量anti-CD3McAb(0.05μg/ml)辅以少量rhIL-2(300U/ml)和PHA(100μg/ml)共同培养,即能诱导和大量扩增PHA-CD3AK细胞,其扩增倍数显著高于LAK细胞,维持高扩增的时间也远较LAK细胞持久;当效靶细胞比为80:1时,PHA-CD3AK细胞对体外肿瘤细胞(K562)杀伤的百分率为56.5%;免疫表型检测PHA-CDB AK细胞中CD3+、CD4+、CD8+细胞的比率分别为(86.5±5.89)%、(38.20±5.27)%、(42.63±3.50)%;核型为正常二倍体,染色体数目为46条.结论:PHA-CD3AK细胞是以CD3+、CD4+、CD8+细胞为主的异质细胞群,并具有淋巴母细胞样特征,PHA-CD3AK细胞为正常二倍体细胞.PHA-CD3AK细胞是易于体外诱导、扩增能力强,体外存活时间长、杀瘤活性高的一种具有广阔应用前景的肿瘤过继免疫效应细胞.     

基于生物信息学分析的结肠癌枢纽基因筛选及调控网络构建

目的:联合多种生物信息学分析方法筛选结肠癌枢纽基因,进一步对枢纽基因进行分析并构建调控网络,以期探索结肠癌的发病机制。方法:从GEO基因芯片数据库筛选结肠癌组织的基因表达数据集,利用在线工具GEO2R筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEG),对差异基因进行Gene Ontolog(GO)分析、KEGG通路分析、蛋白相互作用网络构建等。结果:共纳入2个结肠癌GEO数据集（GSE41258和GSE44076）,筛选出在这2个数据集中有交集的差异表达2倍以上的基因120个,其中表达上调的基因29个,表达下调的基因91个。对上述120个差异表达基因进行KEGG通路分析发现近端小管碳酸氢钠回收、氮素代谢、胰液分泌、PPAR信号通路等与结肠癌的发生密切相关。利用STRING及Cytoscape软件筛选得到包括趋化因子1（CXCL1）、基质金属蛋白酶1 （MMP1）、MMP7等在内的10个调控结肠癌发生的枢纽基因,进一步在TCGA数据库中验证这些基因的表达。结论:通过生物信息学方法有效地筛选出与结肠癌发生密切相关的枢纽基因,为进一步研究其机制提供了理论依据。     

miR-21通过靶向SOX2增强胃癌细胞的迁移能力

目的:探讨miR-21在胃癌细胞系中对SOX2的调控作用及其对胃癌细胞迁移的影响。方法:在胃癌细胞系AZ-521、AGS中通过转染miR-21 mimic或者miR-21 antagomir构建miR-21过表达和低表达模型,RT-qPCR检测转染效果,并通过蛋白免疫印迹法检测SOX2在转染细胞中表达的变化。构建miR-21双荧光素酶报告基因,在工具细胞HEK293T中检验miR-21是否通过直接结合SOX2的3′-UTR区域来对其实现调控。应用Transwell迁移实验检测miR-21及SOX2对胃癌细胞迁移能力的影响。结果:miR-21直接结合于SOX2的3′-UTR区域来抑制SOX2在胃癌细胞系中的表达。迁移实验发现上调miR-21或者下调SOX2都能促进胃癌细胞的迁移。结论:miR-21可促进胃癌细胞的迁移能力,其机制可能通过抑制SOX2的表达而实现。     

miR-302c在胃癌中表达及对胃癌细胞侵袭和迁移影响的机制研究

摘 要：［目的］ 探讨miR-302c对人胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响及机制。［方法］ 实时荧光定量PCR法检测miR-302c在胃癌细胞系和正常胃黏膜上皮细胞中的表达情况。在SGC7901和AGS细胞中分别转染miR-302c mimic和inhibitor后,Tranwell实验检测细胞侵袭和迁移能力变化。实时荧光定量PCR和Western blot法检测转染后环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(CREB1)的变化情况。［结果］与永生化的正常胃黏膜上皮细胞GES-1相比,miR-302c在胃癌细胞系SGC7901、MKN28、N87、MKN45和AGS中表达降低。转染 mimic和inhibitor后,miR-302c在SGC7901和AGS中表达分别明显上调和下调(P＜0.001)。Transwell实验发现,上调miR-302c后,SGC7901细胞的侵袭和迁移能力明显降低,而下调miR-302c后,AGS细胞的侵袭和迁移能力明显增强。进一步研究发现,miR-302c可抑制CREB1的表达。功能挽救实验证明CREB1可部分恢复miR-302c上调对SGC7901细胞侵袭和迁移的抑制作用。［结论］ miR-302c抑制胃癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能是通过直接靶向CREB1。     

胃微生态与胃癌的研究进展

胃微生态平衡是人体健康的重要前提,幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是目前已发现的与胃癌相关的关键病原体之一,普遍存在于人胃黏膜上皮。Hp感染可引起胃内其他菌群的改变,还可引起长期慢性的胃黏膜损伤,导致一系列胃黏膜上皮恶性进展和胃癌的发生。本文就胃微生态与Hp感染的关系、Hp感染在胃癌发生中的作用、胃内其他菌群在胃癌发生中的作用及微生态制剂在胃癌治疗的作用进行综述。进一步揭示Hp感染对胃微生态平衡的影响,胃微生态平衡和Hp感染在胃癌发生发展中的作用及微生态制剂在胃癌治疗中的意义。     

PI3K/Akt途径在朊蛋白介导胃癌耐药中的作用研究

目的:探讨PI3K/Akt途径在朊蛋白(PrPc)介导胃癌耐药中的作用.方法:脂质体基因转染法建立高表达PrPc的胃癌细胞亚系.Western印迹检测转染细胞中Akt蛋白的表达.噻唑蓝(MTT) 比色法测定单独或联用PI3K抑制剂LY294002时转染细胞对化疗药物的敏感性.流式细胞仪检测单独或联用LY294002时转染细胞内阿霉素蓄积和潴留.结果:将PrPc正义载体pcDNA-PrP转入SGC7901,成功建立PrPc高表达胃癌细胞亚系并命名为PS;空载体转染细胞命名为BS.Western-Blot显示磷酸化Akt在PS中的表达较BS及SGC7901增高,而三者的总Akt则无差别.未经LY294002处理时,在阿霉素或长春新碱的作用下,PS的存活率分别为91.4%±3.4%和89.4%±3.8%,较BS(79.2%±4.3%和75.9%±2.1%)明显增高(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量分别为4.4±0.3和4.2±0.4,明显低于BS(8.2±0.5和8.0±0.3)(均 );当联合LY294002处理后,PS在两种药物作用下的存活率均随着LY294002浓度的增加逐渐降低,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量逐渐增高,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ).结论:PrPc介导的胃癌耐药与PI3K/ Akt途径活性密切相关,抑制PI3K/ Akt途径活性可逆转PrPc介导的胃癌耐药.     

晚期结直肠癌分子靶向治疗

晚期结直肠癌靶向治疗药物主要包括血管内皮生长因子抑制剂和表皮生长因子受体抑制剂.研究表明贝伐珠单抗和西妥昔单抗改善了晚期结直肠癌的预后,但在联合化疗药物方案的选择上稍有差异.西妥昔单抗和贝伐珠单抗改善K-ras野生型晚期结直肠癌患者总生存期相似.新的靶向药物阿柏西普、瑞格非尼等的出现,为晚期结直肠癌的靶向治疗提供了更多的选择.