淋巴瘤组织切片CD10全自动免疫组化最佳染色条件初探

<正>CD10又称共同型急性淋巴细胞白血病抗原，表达于上皮和非上皮组织，在粒细胞、未成熟的淋巴细胞及生发中心细胞阳性[1-2]。在病理诊断中，该抗体主要用于一些淋巴瘤和白血病的分型和诊断，如弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lym-phoma, DLBCL)、滤泡性淋巴瘤(follicular lymphoma, FL)、Burkitt淋巴瘤、前驱B淋巴母细胞性淋巴瘤/白血病、     

FOXP3表达及病理组织学特征在溃疡性结肠炎诊断和鉴别诊断中的作用

目的 探讨FOXP3表达及病理组织学特征在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)、感染性肠炎及孤立性直肠黏膜溃疡综合征(solitary rectal ulcer syndrome, SRUS)诊断和鉴别诊断中的作用。方法 收集64例UC、24例感染性肠炎和14例SRUS。采用免疫组化EnVision两步法检测FOXP3在UC、感染性肠炎和SRUS淋巴细胞中的表达，计数10个高倍镜视野(high power field, HPF)下阳性淋巴细胞数目，取平均值；评估三组病变中4项病理组织学特征：黏膜腺体结构改变、固有层慢性炎细胞增多、黏膜基底部淋巴浆细胞增多和隐窝炎、隐窝脓肿。结果 UC组中FOXP3阳性淋巴细胞数(52.60个/HPF)明显高于感染性肠炎组(11.30个/HPF)和SRUS组(9.30个/HPF),差异有统计学意义。组织学特征：与感染性肠炎组相比，UC组具有明显的黏膜腺体结构改变(UC组：61/64;感染性肠炎组：5/24)和黏膜基底部淋巴浆细胞增多(UC组：55/64;感染性肠炎组：5/24),而在固有层慢性炎细胞增多(UC组：64/64;感染性...     

检测颅脑损伤合并肺部感染患者呼吸道病原体IgM抗体谱的临床价值

目的 分析颅脑损伤并发肺部感染住院患者的11种呼吸道病原体IgM抗体联合检测结果,为临床及时制定治疗方案和合理使用抗菌药物提供依据.方法 应用间接免疫荧光法检测2014年12月至2015年12月安徽中医药大学第一附属医院神经外科151例颅脑损伤合并肺部感染患者血清中11种呼吸道病原体IgM抗体谱,分析11种病原体感染分布情况及其在性别、年龄和季节方面流行病学特征,并对其中38例进行动态检测.结果 151例患者中有82例(54.30%)至少检出1种呼吸道病原体IgM抗体,其中男性60例(55.56%),女性22例(51.16%),男女阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05);82例中34例感染1种,34例感染2种,14例感染3种及以上呼吸道病原体.感染阳性率前5位的呼吸道病原体依次是流感病毒B型、流感病毒A型、嗜肺军团菌、柯萨奇病毒A型、肺炎支原体,不受性别、年龄和季节的影响.动态检测的38例患者中,21例检测到病原体IgM抗体,经过治疗后抗体滴度逐渐降低.结论 对病原体IgM抗体谱进行动态检测,有助于进一步明确诊断和疗效观察.     

人皮肤表皮干细胞外泌体的分离培养与鉴定

目的 通过优化技术流程，探究人皮肤表皮干细胞(EPSCs)体外分离培养及表皮干细胞外泌体(EPSCs-Exo)分离纯化的方法。方法 首先通过优化人源EPSCs的分离酶，运用改良的无血清培养液，添加10种因子刺激EPSCs生长，促进其分泌EPSCs-Exo,同时维持EPSCs干性和增殖性，延缓EPSCs的分化和成熟。进一步优化差速离心的条件，高效高纯度提取人源的EPSCs-Exo。对人皮肤组织进行免疫荧光染色溯源EPSCs;对分离的EPSCs进行Western blot和免疫荧光染色检测其表面多个标志物；对EPSCs-Exo从形态、粒径大小、多个胞内和膜上标志物进行鉴定。结果 人皮肤组织分层表达表皮细胞的标志物，EPSCs高表达整合素α6(integrin-α6)、整合素β1(integrin-β1)、P63蛋白(P63)、细胞角蛋白19(CK19)等标志物，EPSCs上清液超速离心后的透射电镜显示茶托状结构，粒径大小检测直径介于30～150 nm，蛋白印迹显示Tsg101、CD9、CD63(溶酶体相关膜蛋白3)呈阳性，Calnexin、GAPDH呈阴性。结论 该研究成功在体外分离培养了...     

Ginsenoside Rg1 attenuates palmitate-induced HMCs fibrosis by inhibiting NOX4/MAPK pathways北大核心CSCD

Aim To investigate the inhibitory effect of ginsenoside Rg1 on sodium palmitate induced fibrosis in human glomerullar mesangial cells (HMCs) and its mechanism. Methods (1) HMCs were treated with different concentrations of PA for 24 h, the intracellular lipid accumulation was observed by oil red staining, and the intracellular ROS production was detected by H2DCFDA kit; (2) HMCs were divided into control, PA (160 μmol·L -1), HG (25 mmol·L -1) and PA + HG groups, then the changes in cell morphology were detected by live cell imaging technique for 24 h; (3) HMCs were divided into control, PA (160 μmol ·L -1), PA + Rg1 (5 μmol·L -1), PA + Rg1 (10 μmol· L -1), PA + Apocynin (50 μmol · L -1) groups, the expression of Col4 was observed using immunofluorescence, and the mRNA expressions of Col4, TGF-β and FN were detected by Real-time PCR; Western blot was used to determine the expression of TGF-β, FN, NOX4 and MAPK related proteins. Results Different concentrations of PA exposure could dose-dependently increase intracellular lipid deposition and ROS generation in HMCs. Both PA and PA + HG groups could lead to abnormal changes in HMCs. Apocynin and ginsenoside Rg1 (5, 10 μmol·L -1) could inhibit PA-induced intracellular lipid accumulation, ROS increase, and Col4, TGF-β and FN mRNA over-expression, and significantly downregulated the expression of TGF-β, FN, NOX4 and MAPK related proteins. Conclusions Ginsenoside Rg1 could significantly inhibit PA-induced fibrosis in HMCs, and its mechanism may be related to reducing lipid deposition, inhibiting NOX4/MAPK pathways. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

黄芦木内生真菌Talaromyces tiftonensis SN34的次生代谢产物研究

目的 研究黄芦木叶片内生真菌Talaromyces tiftonensis SN34的次生代谢产物及生物活性。方法 采用正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS等柱色谱和反相高效液相柱色谱对T.tiftonensisSN34的次生代谢物进行分离纯化，利用HRESIMS、NMR等谱学技术对化合物进行结构鉴定，并通过体外实验评价化合物抗菌、抗神经炎、细胞毒活性。结果 从T.tiftonensis SN34的大米发酵物中分离得到7个化合物，分别鉴定为（2R）-4-甲氧基-2-羟基丙烷-6-甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-硫代甲酸酯（1 ）、（R）-4-羟基-2-羟基丙烷-6-甲基-2，3-二氢苯并呋喃-5-甲酸甲酯（2 ）、赤散囊菌素A（eurothiocin A，3 ）、2，3-二氢-2-（1-甲基乙烯基）-5-苯并呋喃甲醇（4 ）、意大利鼠李素（alaternin，5 ）、1，3，6-三羟基-7-（1-羟乙基）-9，10-蒽二酮（6 ）和BK223-B（7 ）。其中，化合物5 对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureu，MRSA）菌株的最小抑菌浓度为31.25 μg/mL。20 μmol/L的化合物3 和5 对脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）诱导的BV2细胞产生一氧化氮（nitric oxide，NO）的抑制率分别为（69.90±1.34）%和（54.50±4.15）%。此外，化合物5 和7 可以抑制胰腺癌细胞PANC-1和BxPC的细胞增殖。结论 化合物1 为新型含硫苯并呋喃衍生物，命名为赤散囊菌素C；化合物2 ～7 为首次从T.tiftonensis SN34中分离得到。化合物5 对MRSA菌株具有一定的抑制作用。化合物3 和5 可以抑制LPS诱导的小鼠小胶质细胞系BV2细胞中NO的产生，具有一定的抗神经炎活性。此外，化合物5 和7 对PANC-1和BxPC细胞增殖具有抑制作用。     

赖氨酰氧化酶样蛋白1在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达

目的 观察赖氨酰氧化酶(LOX)家族中的赖氨酰氧化酶样蛋白1(LOXL1)及相关胶原蛋白在日本血吸虫感染小鼠肝脏中的动态表达，探讨其在日本血吸虫肝纤维化形成中的作用。方法 采用日本血吸虫感染的小鼠肝纤维化模型，于感染后第6、9、12周剖杀小鼠，收集其血清和肝脏标本；以HE和天狼星红两种染色方法分别观察并评价小鼠肝脏纤维化的进展程度；同时检测小鼠血清转氨酶水平。以免疫印迹(Western blot)和荧光定量PCR(qPCR)方法分别检测肝组织LOXL1、Ⅰ型胶原蛋白(Col1)及α-肌动蛋白(α-SMA)的表达并分析其含量的变化；并对血清中的可溶性和不可溶性胶原进行测定，以判断胶原交联情况。结果 HE和天狼星红染色结果显示，随感染时间延长，小鼠肝纤维化也随之进展，在感染第9周肝纤维化程度最为严重，随后进入慢性肝纤维化期，纤维化程度减轻。Western blot和qPCR结果显示，LOXL1和其他纤维化指标表达情况类似，均在感染第9周时表达量明显上调；可溶性胶原含量在感染第9周时达峰值后下降，而不可溶性胶原含量则持续上升。结论 LOXL1与血吸虫肝脏纤维化过程中纤维交联存在相关关系，可能...     

弥漫大B细胞淋巴瘤中p-STAT3的表达与临床预后及肿瘤相关巨噬细胞的关系

目的 探讨p-STAT3在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma, DLBCL)中的表达及其与预后、肿瘤相关巨噬细胞的关系。方法 采用免疫组化EnVision法检测228例DLBCL组织中p-STAT3的表达，分析其表达与临床病理特征、总生存期(overall survival, OS)、无进展生存期(progression free survival, PFS)、肿瘤相关巨噬细胞的相关性。结果 228例DLBCL中，p-STAT3阳性92例，ECOG-PS评分>1分者88例(P<0.001)、结外累积部位>1分者47例(P=0.012)、Ann Arbor分期Ⅲ+Ⅳ期者99例(P<0.001)、LDH水平>正常者63例(P<0.001)、IPI评分3～5分者69例(P<0.001)、疾病进展者71例(P<0.001)、CD68高表达者85例(P<0.001)、CD163高表达者102例(P<0.001)、non-GCB型61例(P<0.001)、BCL-2阳性者33例(P<...     

慢性感染阶段弓形虫包囊在小鼠脑组织的动态病理变化

目的 探究弓形虫慢性感染期间弓形虫包囊在感染小鼠脑部各区域的分布与病理变化对小鼠行为与神经精神的影响。方法 使用弓形虫Prugniaud株灌胃小鼠，记录感染小鼠病情；分别在小鼠感染的第10、30、40、90、120、160天取感染小鼠脑组织，分离出海马下丘脑、前额叶、纹状体和小脑区域，HE染色观察并记录各感染区域的包囊数量和神经病理变化。结果 弓形虫感染小鼠出现竖毛、弓背等症状，在第40天最为显著，随后逐渐恢复，遗留偏瘫和原地打转等症状；在各时间节点，弓形虫包囊的数量均以海马下丘脑最多，前额叶和纹状体次之，小脑最少；弓形虫包囊的直径随着时间推移均呈增大趋势。慢性感染期间，在脑组织各区域均可观察到弓形虫包囊噬神经现象等特异性病理表现，上述弓形虫脑炎的病理改变在第40天达到顶峰，后逐渐恢复，至第120天增至刺激峰，随后逐渐恢复。结论 弓形虫慢性感染期间的行为和神经精神症状与弓形虫包囊在感染小鼠脑部的定位分布有一定的相关性，并呈现动态变化。     

Role of TGF-β/Smad signaling pathway in pulmonary fibrosis after rheumatoid arthritis in mice北大核心CSCD

Aim To investigate the role of TGF-β/Smad signaling pathway in rheumatoid arthritis (RA) - associated postinterstitial pulmonary fibrosis in mice. Methods The mouse model of RA was constructed by subcutaneous administration of complete Freund's adjuvant (CFA) and chicken II collagen (Col-II) to the tail root of mice. The blank group was given the same amount of distilled water, and the control group was given the same amount of glacial acetic acid (solvent). The degree of toe swelling (joint swelling degree and arthritis index) was monitored to evaluate the mouse modeling. The pathological changes of mouse lung tissues were observed by HE and Masson staining. The expression of TGF-β in lung tissues were observed by immunohistochemical staining. The level of hydroxyproline in lung tissues was measured by chemiluminescence method. The expressions of Smad2, Smad3 and phosphorylated p-Smad2 and phosphorylated p-Smad3 in lung tissues were detected by Western blot. Results Compared with blank group and solvent group, the joint swelling and arthritis index of model group significantly increased. Twenty-one days after administration, HE staining showed inflammatory changes in lung interstitium of the model group, Masson staining showed collagen fiber deposition and obvious fibrosis in lung interstitium of the model group, and immunohistochemical staining showed that the expression of TGF-β in cytoplasm of lung interstitial cells of the model group increased, which was brown and yellow. Meanwhile, hydroxyproline was significantly raised in lung tissue homogenate of the model group. Further WB analysis showed that compared with blank group and solvent group, the expression of p-Smad2 and pSmad3 in lung tissues of the model group was significantly up-regulated (P < 0. 05, P < 0. 01). Conclusions RA can give rise to pulmonary fibrosis, and the expressions of p-Smad2 and p-Smad3 are up-regulated, which is be pivotal in pulmonary fibrosis and RA-related post-interstitial pulmonary fibrosis. © 2023 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.