沉默CDKN2B-AS1调控miR-98-5p、STAT3对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响

目的]探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2B反义RNA 1(CDKN2B-AS1)是否通过靶向miR-98-5p影响高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤。 [方法]将HUVEC分为对照组(含5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养)、模型组(含33.5 mmol/L葡萄糖的DMEM培养)、模型＋si-NC组、模型＋si-CDKN2B-AS1组、模型＋miR-NC组、模型＋miR-98-5p模拟物组、模型＋si-CDKN2B-AS1＋anti-miR-NC组、模型＋si-CDKN2B-AS1＋anti-miR-98-5p组。运用实时定量聚合酶链反应检测HUVEC的CDKN2B-AS1、miR-98-5p表达;Western blot检测信号转导及转录激活因子3(STAT3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)试剂盒检测SOD、LDH、MDA水平。双荧光素酶报告实验分析miR-98-5p与CDKN2B-AS1、STAT3的靶向结合。 [结果]高糖使HUVEC中CDKN2B-AS1、STAT3表达、凋亡率、LDH、MDA水平升高,miR-98-5p表达、SOD水平降低(P＜0.05)。沉默CDKN2B-AS1或过表达miR-98-5p后,高糖诱导的HUVEC中CDKN2B-AS1、STAT3表达、凋亡率、LDH、MDA水平降低,miR-98-5p表达、SOD水平升高(P＜0.05)。双荧光素酶报告实验显示,CDKN2B-AS1靶向miR-98-5p,miR-98-5p靶向STAT3。抑制miR-98-5p逆转了沉默CDKN2B-AS1对高糖诱导的HUVEC凋亡、氧化应激、STAT3蛋白表达的抑制作用。 [结论]沉默CDKN2B-AS1通过调节miR-98-5p/STAT3轴抑制高糖诱导的HUVEC氧化应激和凋亡,CDKN2B-AS1可作为糖尿病相关血管并发症的候选治疗靶标。     

郑州市郊区学龄前儿童营养不良现状及影响因素分析

目的了解郑州市郊区学龄前儿童营养不良的现状,分析相关影响因素,并提出有效的防治措施。方法采用整群抽样的方法,抽取郑州市郊区16所幼儿园的3~7岁儿童3 042名进行问卷调查。结果学龄前儿童营养不良检出率男童6.03%,女童4.92%,平均检出率为5.52%,检出率在性别间的分布差异无统计学意义(χ2=3.052,P0.05)。相关分析表明父亲体格与子女营养状况呈正相关。多因素Logistic分析结果显示,危险因素有疾病史(OR=2.064)、偏食(OR=2.175),保护因素有正常出生体重(OR=0.618)、母乳喂养方式(OR=0.704)、父亲BMI正常(OR=0.674)、营养知识水平较高(OR=0.567)、食欲较好(OR=0.780)、饮奶量(OR=0.682)。结论郑州市郊区学龄前儿童的营养不良检出率低于农村。营养不良是多种因素相互作用的结果,应进行综合防治。     

血浆中检测FHIT、p16、MGMT和RASSF1A基因甲基化在肺癌诊断中的价值

目的:探讨血浆中脆性组氨酸三连体基因(fragile histidine triad,FHIT)、p16基因、O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因(O6-methyl-guanine-DNA methyltransferase,MGMT)及信号转导通路基因(rasassociation domain family1A,RASSF1A)等抑癌基因启动子异常甲基化及其联合检测在肺癌筛查及早期诊断中的价值。方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specifi c PCR,MSP)法,检测53例肺癌组织和对应的血浆标本以及24例肺良性病变组织中FHIT、p16、MGMT和RASSF1A4种基因启动子区甲基化状态。结果:肺癌组织中FHIT、p16、MGMT和RASSF1A基因启动子区甲基化检出率分别为39.6%(21/53)、49.1%(26/53)、35.8%(19/53)和18.9%(10/53);其对应的血浆标本中这4个基因的甲基化检出率分别为35.8%(19/53)、49.1%(26/53)、28.3%(15/53)和17.0%(9/53),两组标本甲基化检出率存在着较好的一致性(P>0.05)。24例肺良性病变组织标本和血浆标本中分别有同1例(0.04%)出现p16基因甲基化,与肺癌组比较差异有统计学意义(P<0.05)。4项指标联合检测可显著提高肺癌检测的敏感度(73.6%)和特异度(95.8%)。p16基因在血浆中甲基化检出率与患者吸烟指数有明显相关性(P<0.05)。结论:血浆中多个肺癌相关基因甲基化联合检测有望成为肺癌筛查、早期诊断简便有效的指标。     

响应面法优化怀山药中超临界提取薯蓣皂素工艺研究

目的 探讨影响超临界CO2提取怀山药中薯蓣皂素收率的重要因素,旨在为怀山药的综合利用提供科学依据.方法 利用超临界CO2提取怀山药中薯蓣皂素.在单因素试验的基础上,采用响应面法研究超临界CO2提取的最佳工艺条件,并进行Box-Benhnken Design的中心组合试验设计,RSA法分析对试验数据进行,对拟合数学模型进行描述,筛选出超临界CO2提取怀山药中薯蓣皂素的最佳工艺条件.结果 以无水乙醇为提取溶剂,超临界CO2萃取怀山药中薯蓣皂素的最佳工艺条件：萃取温度45℃,萃取压力40 MPa,CO2流量为10 kg/h,在此最佳工艺条件下薯蓣皂素收率为3.49％.结论 超临界CO2提取怀山药中薯蓣皂素的工艺参数采用进行RSA法优化,并建立回归模型方程,该模型回归极显著,且失拟项不显著.     

鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ2生物学特性研究

目的研究鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体ZZ2的生物学特性。方法电镜观察ZZ2形态,并研究其噬菌谱、生长曲线及稳定性等生物学特性。结果ZZ2可在3株鲍曼不动杆菌（AB09V,AB0901,AB0904）菌苔上形成裂解性噬菌体所具有的完全透明的滴斑区,其中AB09V是其最敏感的宿主菌。电镜观察ZZ2具典型的有尾噬菌体目肌尾病毒科病毒的形态特征;一步生长曲线显示ZZ2感染AB09V的潜伏期为12min,裂解量为（191±5）PFU／细胞。稳定性试验显示ZZ2在pH4～9及50℃和60℃环境均具良好稳定性。结论噬菌体ZZ2能杀灭鲍曼不动杆菌,可作为生物抗菌剂使用。     

痛封灵颗粒剂的制备工艺研究

目的寻找制备痛封灵颗粒剂的最佳制备工艺。方法选用干膏得率、颗粒载药量为指标,应用正交试验对痛封灵颗粒剂的制备工艺进行优选。结果提取3次,每次1h,加15倍量水;浓缩浸膏至40％水分,加16．0ml乙醇制粒为最佳工艺条件。结论该工艺为最佳的制备工艺。     

柴胡疏肝散对阿尔茨海默病大鼠记忆功能的相关研究

目的:探讨柴胡疏肝散在阿尔茨海默病( Alzheimer's diseas,AD)治疗中的意义.方法:大鼠随机分6组,其中模型组(C),柴胡疏肝散低剂量和高剂量组(D,E),补肾组(F)均采用D-半乳糖(ip)和β-淀粉样蛋白(Aβ)双侧海马注射联合造模,Aβ造模成功后的第9d,D,E组分别ig给予柴胡疏肝散10,20 g·kg-1,F组给予脑力宝20 g·kg-1.各组均在每天上午9:00按10 mL·kg-1的容积ig给药,连续ig 28 d.ig前后分别进行水迷宫行为学检测,最后处死动物取海马进行相关指标信使RNA (mRNA)表达的相对含量测定.结果:柴胡疏肝散高剂量组ig前后迷宫寻找平台时间分别为(17.34±3.35),( 12.78±2.54)s,补肾组分别为(17.79±2.25),(14.11±2.66)s,2组ig前后比较及ig后与同期的模型组比较均有显著差异(P＜0.01).给药后,2组海马蛋白质磷酸酶-2A(PP-2A) mRNA的表达值分别为(0.230 4 ±0.035),(0.199 4±0.022 2),与模型组(0.099±0.028 8)比较明显增加(P＜0.01),而细胞周期依赖性蛋白激酶5(CDK-5)和糖原合成酶激酶3β(GSK-3β) mRNA的表达高剂量组,补肾组比较及高剂量,低剂量组比较均明显降低(P＜0.01).结论:柴胡疏肝散通过抑制动物海马GSK-3β,CDK-5表达而增强PP-2A的表达,可以逆转Aβ诱导的tau蛋白过度磷酸化,从而对记忆、认知障碍起到积极的调节作用.     

柴胡疏肝散对阿尔茨海默病大鼠海马CA1区超微结构的影响

目的:探讨柴胡疏肝散在阿尔茨海默病(Alzheimer’s diseas,AD)治疗中的意义。方法:大鼠随机分为6组,其中模型组(C),柴胡疏肝散低剂量和高剂量组(D、E),补肾组(F)均采用D-半乳糖和Aβ双侧海马注射联合造模,Aβ造模成功后的第9天,D、E组分别ig给予柴胡疏肝散10,20 g.kg-1,F组给予脑力宝20 g.kg-1。各组均在每天上午9∶00按10 mL.kg-1的容积ig给药,连续ig28 d。ig前后分别进行水迷宫行为学检测。每组取3只,在ig干预结束后的第4天处死动物取海马,Leica EMUC-7超薄切片,透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果:柴胡疏肝散高剂量组ig前后迷宫寻找平台时间分别为17.34±3.35s,12.78±2.54s,补肾组分别为17.79±2.25s、14.11±2.66s,2组ig前后比较及ig后与同期的模型组比较均有显著差异(P<0.01)。电镜显示,疏肝低剂量组神经元结构基本正常,突触前膜内突触小泡较清晰,突触间隙清晰,线粒体膜基本完整,线粒体嵴较清晰。疏肝高剂量组神经元结构正常,突触小泡及突触间隙清晰,线粒体膜完整,线粒体嵴清晰可见;而模型组电镜下神经细胞形态破坏,结构紊乱,突触密度降低且均匀不一,突触间隙变小不清,突触小泡数量减少,游离核蛋白体减少,线粒体膜不完整,线粒体嵴模糊。结论:大剂量柴胡疏肝散对AD大鼠模型脑细胞有一定的保护作用,在AD治疗中应重视疏肝理气法的应用。     

PTSD大鼠海马CA1区和前额叶皮层突触小泡蛋白的表达

目的:观察创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠海马CA1区和前额叶皮层(prefrontal cortex,PFC)突触小泡蛋白(synaptophysin)的表达,探讨PTSD大鼠空间记忆损伤的机制。方法:健康成年SD大鼠36只,随机分为正常对照组和模型组,每组18只。模型组采用单次延长应激(single prolonged stress,SPS)构建PTSD大鼠模型。Morris水迷宫实验检测2组大鼠的学习记忆能力,利用免疫组化、Western blot和免疫荧光实验检测海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达情况。结果:经过Morris水迷宫实验,模型组大鼠从第2天开始逃避平台的潜伏期较对照组均显著延长(P 0.01),目标象限的停留时间均明显降低(P 0.01),穿越原平台位置的次数也明显减少(P 0.01)。在免疫组化、Western blot和免疫荧光实验中,模型组大鼠海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达较对照组均明显减少(P 0.05或P 0.01)。结论:创伤后应激障碍大鼠空间记忆能力减退,可能与海马CA1区和PFC突触小泡蛋白的表达减少有关。     

Flash动画在PowerPoint课件制作中的应用

目的介绍Flash动画在Power Point课件制作中的应用。方法把Flash动画嵌入到Power Point2000中。丰富的课件，加强了教学段，提高了教学效果的。结论Flash可丰富课件教学的媒体，加强Power Point2000的交互功能。