角茴香中1个新的吡嗪类生物碱

采用硅胶、ODS、MCI等柱色谱以及半制备液相等现代色谱分离技术对角茴香(Hypecoum erectum L.)正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化,得到4个吡嗪类生物碱。运用现代波谱学方法(1D NMR、2D NMR、UV、IR、MS等)鉴定结构分别为hyperectpyrazin A (1)、1′S-(6-methylpyrazin-2-yl)-ethane-1′,2′-diol (2)、2-hydroxymethyl-6-methylpyrazin (3)和pyrazine-2-carboxylic acid (4)。化合物1为1个新的吡嗪类生物碱,化合物2～4为首次从角茴香中分离得到,并首次通过Mo₂(OAc)₄诱导的CD谱确定了化合物2的绝对构型。采用乙酰胆碱酯酶抑制模型和脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型,对化合物1～4进行体外活性评价,其中化合物2和4表现出一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性,在终浓度为50μmol·L^-1时对乙酰胆碱酯酶的抑制率分别为44.40%和43.99%。     

HPLC法同时测定半枝莲饮片中4种黄酮类成分的含量及主成分分析

目的:建立同时测定半枝莲饮片中野黄芩苷、野黄芩素、木犀草素、芹菜素等4种黄酮类成分含量的方法,并进行主成分分析。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent ZOXDB-C18,流动相为甲醇-乙腈(80∶20,V/V)-1%醋酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为335 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。采用SPSS 20.0、SIMCA-P 13.0软件进行主成分分析。结果:野黄芩苷、野黄芩素、木犀草素、芹菜素进样量的线性范围分别为0.131~1.446μg(r=0.999 0)、0.031~0.345μg(r=0.999 7)、0.005~0.055μg(r=0.999 2)、0.024~0.268μg(r=0.999 2);定量限分别为1.178 8、0.602 9、0.744 1、1.079 1 ng,检测限分别为0.353 6、0.106 1、0.223 2、0.323 7 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为99.38%~100.56%(RSD=0.44%,n=6)、91.01%~96.81%(RSD=2.43%,n=6)、91.44%~97.34%(RSD=2.59%,n=6)、96.21%~99.26%(RSD=1.23%,n=6)。主成分分析结果显示,主成分1和主成分2是影响样品质量评价的主要因子,2个主成分的累积方差贡献率为92.573%(>80%);S14-3样品综合评分最高,整体质量相对较好,S14-2、S14-1次之,这3批样品均系半枝莲种植基地药材加工产品,质量稳定。结论:本方法简单、快速,可用于同时测定半枝莲饮片中4种黄酮类成分的含量;主成分分析可为半枝莲饮片的质量控制提供参考。     

基于TiO_2@Fe_3O_4纳米材料的盐酸阿霉素磁性热敏脂质体制备及其理化特性、磁效应和光热效应考察

目的:制备一种包载盐酸阿霉素(DOX)的磁性热敏脂质体(MTSL),考察其理化性质、磁效应和光热效应,为肿瘤的化疗及光热/光动力治疗提供基础。方法:以DOX为模型药物,以纳米二氧化钛-纳米四氧化三铁复合材料(TiO_2@Fe_3O_4)作为光敏剂和磁性材料,采用薄膜分散法制备DOX-TiO_2@Fe_3O_4-MTSL。观察该脂质体的形态和分散性、粒径及Zeta电位,采用超滤-离心法结合高效液相色谱法考察其包封率;采用磁强针考察其顺磁性。与DOX溶液比较,采用透析法考察该脂质体的体外释放行为,并比较在不同温度(37、43℃)下的释放曲线。采用808 nm近红外激光照射,考察该脂质体的光热转换效应以及对人乳腺癌MCF-7细胞中活性氧(ROS)产生的影响。结果:制备的DOX-TiO_2@Fe_3O_4-MTSL为棕黑色,水分散性好;电镜下呈类圆球形,大小较均匀;平均粒径为250.6 nm,多分散性指数为0.107,Zeta电位为(-7.76±3.41)mV;包封率为(92.3±3.2)%;在外加磁场下可定向移动,具有明显的顺磁性。与DOX溶液比较,该脂质体释药速度较慢,具有明显的缓释特性;与37℃条件比较,该脂质体在43℃条件下的释药速度明显加快。随激光(808 nm)照射时间的增加,该脂质体的温度持续升高,具有明显的光热转换效应,并可使MCF-7细胞中ROS的产生明显增加。结论:成功制备了DOX-TiO_2@Fe_3O_4-MTSL,其外观形态均匀、理化性质良好;具有明显的顺磁性、缓释作用和光热转换性能,能在808 nm近红外激光照射下增加MCF-7细胞中ROS的含量。     

姜黄素抑制多药耐药肝癌细胞HepG2/ADM的增殖及其机制研究

目的 观察姜黄素对多药耐药(MDR)的肝癌细胞株HepG2/ADM细胞增殖的抑制作用及其机制.方法 制备、培养HepG2/ADM细胞,然后用不同浓度的姜黄素(5、10、20、40 mol/L)处理该细胞24、48、72 h.采用CCK-8试剂检测姜黄索对HepG2/ADM细胞的增殖活力的影响.流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(R-123)的浓度和阿霉素(ADM)的浓度;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞内mdr-1 mRNA的水平变化;用Western blot检测细胞内p-糖蛋白(pgp)水平的变化.结果 与空白对照组和DMSO组相比,姜黄素对HepG2/ADM细胞增殖的抑制作用更加明显(P＜0.05);更能够明显抑制细胞内Rh123的外排(P＜0.05);RT-PCR和Western blot结果分别显示,姜黄素对HepG2/ADM细胞内的mdr-1 mRNA和P-gp水平更有明显的降低(P＜0.05),且呈浓度-时间依赖性(P＜0.05).结论 姜黄素可以显著抑制多药耐药HepG2/ADM细胞的增殖,其机制可能与抑制和MDR密切相关的mdr-1基因及其编码的P-gp水平有关.     

基于网络药理学和分子对接探讨“海藻-昆布”治疗甲状腺结节的作用机制

目的： 运用网络药理学探讨"海藻-昆布"治疗甲状腺结节作用机制。方法： 利用中药系统药理学数据库和分析平台（Traditional Chinese Medicine System Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP）筛选海藻、昆布的活性成分和相关靶点,通过UniProt数据库进行靶点标准化;运用Cytoscape软件构建活性成分-靶点网络;通过Genecards数据库检索甲状腺结节相关基因;利用String数据库构建蛋白互作网络图;通过R语言和Bioconductor数据库对潜在靶点进行基因本体（Gene Ontology,GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）通路富集分析;最后通过分子对接技术将核心活性成分与核心靶点进行对接。结果： 筛选后得到海藻、昆布共11个活性成分,194个相关靶点,核心靶点有AKT1、IL-6、VEGFA、CASP3等;GO分析得到129个相关过程,KEGG分析得到155条信号通路,分子对接结果显示核心成分与核心靶点具有较好的结合能。结论： "海藻-昆布"治疗甲状腺结节是多成分、多靶点、多通路相互作用的结果,为"海藻-昆布"的临床应用以及甲状腺相关疾病临床研究提供一定的理论依据。     

九蒸九制何首乌色泽与二苯乙烯苷、蒽醌类成分的相关性分析

目的： 应用数学模型研究"九蒸九制"何首乌色泽与化学成分含量之间的变化规律,分析两者之间的相关性。方法： 通过薄层扫描仪采集图像,将采集的图像依次通过MATLAB R2018软件进行程序代码分析,使RGB色空间模型转化为HSI色空间模型,计算得到H、S、I粉末色度值,HPLC法测定二苯乙烯苷、游离蒽醌和总蒽醌的含量。采用SPSS 24.0进行粉末色度值与成分含量的相关性及多元线性回归分析,建立色度值与化学成分含量之间的定量模型,并通过多维标度分析比较不同蒸制程度何首乌样品之间的差异性。结果： 何首乌生品饮片粉末为黄白色,制后颜色加深,且随炮制时间延长,颜色逐渐由黄白色变为棕褐色,与生品相比其色度值H、I降低,S升高,颜色加深,说明色度值能够表征炮制程度,多维标度差异性分析发现,生品与炮制品色度值与化学成分差异性较大,其中一蒸一制到二蒸二制时变化明显。经相关性分析,二苯乙烯苷、结合蒽醌与色度值H、I呈正相关,与S呈负相关,游离蒽醌与色度值H、I呈负相关,与S呈正相关,建立的6个回归模型P值均小于0.05,回归模型具有较好的准确性,定量模型可用于分析二苯乙烯苷、游离蒽醌、结合蒽醌对色度值的影响程度,在84.97%程度上可根据S、I色度值预测分析二苯乙烯苷含量,在64.46%程度上可根据H值预测分析结合蒽醌含量,在73.93%程度上可根据S值预测分析游离蒽醌含量。结论： 九蒸九制何首乌色泽与化学成分含量具有显著相关性,色度值与化学成分的定量模型,可分析预测色度值与化学成分含量之间的关系,为何首乌炮制过程中色度与化学成分的动态监测提供一些参考。     

HPLC-ELSD法测定人参不同部位13种人参皂苷的含量

目的建立同时测定人参药材主根、侧根、须根、芦头中13种人参皂苷类成分含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测器(high performance liquid chromatography-evaporative light scattering detector,HPLC-ELSD)法。方法采用Venusil XBP C_(18)(L)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水梯度洗脱,流速:1 mL·min~(-1),柱温:20℃,蒸发光散射检测器参数:载气流量为2.9 L·min~(-1),压力为5.5×10~5Pa,漂移管温度为107℃,增益为1。结果人参皂苷Rg_1、Re、Rf、Rh_1、Rg_2、Rb_1、Rc、Rb_2、Rb_3、Rd、F_2、Rh_4、Rg_3分别在0.90~18.04、0.93~18.50、0.77~15.40、0.30~6.02、0.30~6.05、1.80~36.00、1.31~26.26、1.37~27.40、0.30~6.05、0.52~10.33、0.30~6.12、0.30~6.02、0.30~6.02μg内呈良好的线性关系(r>0.999 0),平均加样回收率(n=6)为97.1%~101.8%,RSD≤3.0%。结论该方法可用于同时测定13种人参皂苷的含量。     

去卵巢小鼠模型的构建比较北大核心CSCD

目的对比不同制备方法对去卵巢小鼠模型的影响。方法结扎法、电烙法完全摘除小鼠双侧卵巢,检测阴道涂片、脏器湿重、生化指标,Micro-CT检测股骨组织形态变化,HE染色观察股骨、子宫、胸腺、脾脏病理变化,对比两种不同方法对去卵巢小鼠模型的影响。结果与假手术组相比,结扎法、电烙法均可使去卵巢小鼠连续处于动情间期,子宫、脾脏、胸腺脏器湿重降低,血清中骨特异性碱性磷酸酶(bone-specific alkaline phosphatase,BALP)、骨钙素(bone gla protein,BGP)水平降低;血清性激素水平紊乱,雌二醇(estradiol,E_(2))水平降低、促卵泡生成素(follicle stimulating hormone,FSH)水平升高;小鼠股骨骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨矿物质密度(bonemineral density,Tb.BMD)、连接密度(connectivity density,Conn.D)水平降低,骨小梁分离度(trabecular spacing,Tb.Sp)水平升高,皮质骨骨矿物质密度(bone mineral density,Ct.BMD)、皮质骨厚度(cortical bone thickness,Ct.Th)水平降低;去卵巢小鼠胸腺皮质厚度、脾小结体积明显减小,子宫出现明显萎缩,股骨骨小梁排列紊乱,骨小梁结构变细,破骨细胞数量明显增多。结论结扎法、电烙法均能成功制备去卵巢小鼠模型,从制备方法上看电烙法更简便,为卵巢摘除法相关研究提供实验基础。     

盐炙对益智仁-小茴香药对止泻作用的影响

目的：探讨盐炙对益智仁-小茴香药对对脾肾阳虚型泄泻证止泻作用的影响,为中医临床合理用药提供参考。方法：将SD大鼠分为正常组,模型组,阳性药四神丸组,以及益智仁-小茴香生品及盐炙品配伍高、中、低剂量组。采用氢化可的松和番泻叶复合造模法复制脾肾阳虚泄泻大鼠模型,给药结束后测定各组大鼠脾、肾、胸腺、肾上腺、睾丸脏器指数,并采用ELISA法检测大鼠血清中胃动素（MTL）、胃泌素（GAS）和二胺氧化酶（DAO）等指标。结果：与正常组大鼠相比,模型组大鼠体质量减轻;各脏器出现不同程度的病理性变化;血清中MTL、GAS和DAO等指标均出现显著性异常。给予益智仁-小茴香生品及盐炙品后,上述症状和病理学指标均有不同程度改善。其中,盐炙品高剂量组对大鼠血清一氧化氮（NO）、5-羟色胺（5-HT）、环磷酸腺苷（cAMP）/环磷酸鸟苷（cGMP）、免疫球蛋白G （IgG）水平改善效果较好,生品高剂量组对大鼠血清MTL、GAS、DAO、D-乳酸（D-LA）水平改善效果较好。结论：益智仁-小茴香生品药对及其盐炙品药对对脾肾阳虚型泄泻均具有止泻作用,但治疗证候指标上偏重略有不同,生品药对对模型大鼠脾阳虚证候指标的调节作用较好,而盐炙品药对对肾阳虚证候指标调节作用较好;对于脾肾阳虚型泄泻证建议采用盐炙品药对入药,增强药对镇痛、调节机体能量代谢和免疫功能可能是盐炙影响益智仁-小茴香药对止泻作用的机制。     

香椿子总多酚对心肌缺血/再灌注损伤大鼠细胞凋亡的影响

目的:探讨香椿子总多酚(TSTP)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠细胞凋亡信号通路的影响。方法:采用左冠脉球囊垫扎术,缺血45 min再灌注6 h制备大鼠MIRI模型,随机分为模型组、TSTP高剂量组(100 mg·kg^-1)、TSTP低剂量组(50 mg·kg^-1)、假手术组,于造模术前7 d开始灌胃给药;采用染色法评估心肌梗死情况,FCM法检测细胞凋亡率,ELISA法检测胞浆线粒体细胞色素C(Cyt C)含量,荧光底物法检测心肌半胱氨酸蛋白酶caspase-3、caspase-8、caspase-9、caspase-12活性,RT-qPCR法测定心肌凋亡死亡受体通路指标(Fas和Fas-L)、线粒体通路指标(Bax和Bcl-2)、内质网应激通路指标(GRP78和CHOP)的基因表达。结果:TSTP高、低剂量组明显缩小心肌梗死区面积,与模型组比较差异有统计学意义;与模型组相比,TSTP高、低剂量组可显著降低心肌细胞凋亡率,可显著减少胞浆Cyt C释放量,明显降低胞浆caspase-3、caspase-9和caspase-12活性,可明显...