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971.
HBV表面抗原基因植物表达载体的构建及其在胡萝卜细胞中的表达 总被引：1，自引：0，他引：1
目的构建HBV表面抗原(HBsAg)的植物表达载体并在胡萝卜细胞中表达。方法以限制酶切M13/HB获得940bp含PreS2的HBsAg基因片段,将其插入到植物表达载体pBPC55,新质粒命名为pBPC91。将其与含除草剂抗性基因及GUS蛋白基因的筛选质粒pBPC93共同经基因枪(PDS-1000/He)转化胡萝卜悬浮细胞。经含除草剂(Bio-laphos)的MS液体培养基筛选,获得除草剂抗性胡萝卜细胞。结果纯化质粒pBPC91经酶切及序列分析表明HBsAg基因正确插入到E35S启动子下游且无密码子移位。对除草剂抗生胡萝卜细胞的组织学检测证实GUS基因有效表达;该细胞内DNA提取物PCR有940bp扩增带,蛋白萃取物的ELISA检测证实分别有HBsAg及PreS2-Ag蛋白表达。结论构建质粒pBPC91的PreS2及HBsAg基因可在转化胡萝卜细胞内表达。提示以植物细胞生产医用疫苗具有可行性。 相似文献