eIF-4E、HER-2癌基因在鼻咽癌中表达的意义及其与PCNA和LMP-1的关系

目的研究eIF-4E、HER-2与PCNA、LMP-1在鼻咽癌(NPC)中的表达,探讨它们之间的相关性及其与鼻咽癌生物学行为和预后的关系。方法应用免疫组化EnVision二步法检测61例鼻咽部非角化性癌(NKC)、18例癌旁上皮非典型性增生和20例鼻咽黏膜慢性炎症组织中eIF-4E、HER-2、PCNA和LMP-1的表达水平。结果①eIF-4E和HER-2在慢性炎症组、癌旁上皮非典型性增生组和NKC组中的强表达率依次递增;②eIF-4E和HER-2在NKC治疗后生存期<5年组中的强表达率显著高于治疗后生存期≥5年的强表达率;③eIF4E和HER2的强表达与LMP-1的阳性表达呈正相关关系;④eIF-4E和HER-2共同存在时较各自单独存在强表达时,PCNA的强表达率明显增强,而患者的5年生存率明显降低。结论检测eIF-4E、HER-2、PCNA和LMP-1的表达有助于NKC的病理诊断(尤其早期诊断)和预后评估。     

Hoechst33342/PI双荧光活染法检测氟对体外培养大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的研究氟对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法取新生Wistar大鼠肾皮质,制备细胞悬液,传代培养。给予不同浓度的氟化钠(40、80、160μmol/L)处理培养细胞48h后,用Hoechst33342/PI双荧光活染法检测细胞凋亡情况。结果倒置显微镜下发现培养细胞出现细胞碎片明显增多。Hoechst33342/PI双荧光活染法染色检测发现坏死细胞增多。紫外光激发后,40μmol/L NaF处理组出现凋亡细胞,80μmol/L NaF处理组凋亡细胞增多,160μmol/L NaF处理组凋亡细胞明显增多。绿色光激发后,发现80μmol/L NaF处理组出现染色质凝集的晚期凋亡细胞和染色质不凝集的死亡细胞,160μmol/L NaF处理组晚期凋亡细胞较以上各组明显增多。低、中、高氟浓度组凋亡率分别为15.0%、32.4%和62.2%,即随氟浓度的提高,凋亡细胞百分比增加。结论不同浓度的氟均可诱导大鼠肾小管上皮细胞凋亡,随着氟化钠浓度的增加,凋亡细胞增多。     

骨桥蛋白在低钙和燃煤污染型氟中毒大鼠肾组织中的表达

目的 观察骨桥蛋白(OPN)在低钙和氟中毒大鼠肾组织中的表达,探讨OPN与氟中毒肾损害的关系.方法 1月龄Wistar大鼠48只,雌雄各半,体质量80～100 g.按2×2析因设计将大鼠按质量随机分为4组:对照组、高氟组、低钙组、低钙高氟组,每组12只,雌雄各半.采用合成饲料喂养,高氟组和低钙高氟组饲料中的玉米来自燃煤污染型氟中毒病区,含氟量为100 mg/kg,对照组和低钙组饲料中的玉米来自于非病区,含氟量为5 mg/kg.喂养16周后处死大鼠,观察各组大鼠牙齿变化,计算大鼠氟斑牙检出率.取大鼠肾脏,采用RT-PCR技术及免疫组化技术检测大鼠肾脏OPN蛋白和OPN mRNA表达.结果 对照组和低钙组牙齿生长良好,高氟组、低钙高氟组大鼠均出现明显的氟斑牙,氟斑牙检出率为100%.免疫组化结果表明,OPN主要定位于肾组织的肾小管上皮细胞中.对照组和低钙组肾组织OPN阳性细胞淡染、散在分布,高氟组与低钙高氟组OPN阳性细胞着色较深,广泛分布在肾小管上皮细胞中.OPN蛋白表达显示,高氟组(168.64±13.21)和低钙高氟组(169.26±8.92)高于对照组(145.78±10.26,P均<0.01)和低钙组(149.60±16.84,P均<0.01);OPN mRNA表达显示,高氟组(1.89±0.37)和低钙高氟组(1.94±0.22)高于对照组(1.32±0.26,P均<0.05)和低钙组(1.30±0.18,P均<0.05).高氟影响OPN蛋白和OPN mRNA表达(F=13.821、4.24,P均<0.05),低钙不影响OPN蛋白和OPN mRNA表达(F=2.164、0.58,P均>0.05),但高氟和低钙联合作用时,二者对OPN蛋白和OPN mRNA表达有交互作用(F=6.257、4.32,P均<0.05).结论 过量氟可促使大鼠肾组织的OPN表达增加,提示OPN与氟中毒肾损害程度密切相关,可考虑作为一种氟中毒肾损害的标志,并且,高氟与低钙同时存在时,大鼠肾损害会进一步加重,提示低钙是氟化物损害肾脏的重要环节.     

慢性氟中毒所致脑损伤研究进展

慢性氟中毒对脑损伤的影响已成为当前国际氟研究中较为热门的研究问题.临床上肯定了地方性氟中毒(简称地氟病)患者有头痛、头晕、记忆力减退等中枢神经系统功能障碍症状,而实验性氟中毒动物表现有震颤、紧张、麻痹等神经毒性作用的改变.     

灯盏细辛活性部位对神经细胞α7尼古丁受体表达的影响

目的：研究灯盏细辛活性部位对SH-SY5Y神经细胞中α7神经型尼古丁受体（nAChR）亚单位在蛋白质水平的表达以及对抗β-淀粉样蛋白的毒性作用。方法：灯盏细辛经乙醇提取、乙酸乙酯及正丁醇萃取、再以反相硅胶柱分离等方式得到极性部位,选取一定浓度的灯盏细辛提取物处理神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）后,用Western blotting方法测定α7 nAChR蛋白水平的变化;再将能明显上调α7 nAChR蛋白水平的灯盏细辛提取物预处理SH-SY5Y细胞后,加入Aβ25-35处理,用比色法测定MTT还原率,观察灯盏细辛活性部位对细胞毒性的影响。结果：灯盏细辛醇提乙酸乙酯及正丁醇部位、以及该部位经反相硅胶柱分离的低极性部位均能显著上调α7 nAChR蛋白水平,并减弱β-淀粉样蛋白引起的细胞损伤。结论：灯盏细辛活性部位具有一定的神经保护作用,其机制之一可能与上调α7 nAChR有关。     

TIP30蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的：探讨TIP30蛋白在结直肠癌中的表达及其意义。方法：采用S-P免疫组织化学染色法检测58例结直肠癌组织及20例结直肠黏膜慢性炎症组织中TIP30蛋白表达。结果：TIP30蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为36.20%（21/58）,显著低于慢性炎症组的95%（19/20）,差异有显著性（P〈0.01）;TIP30蛋白在结直肠癌中的表达与淋巴结转移（P〈0.05）、浸润程度（P〈0.05）及预后（P〈0.05）有关。结论：TIP30的表达在结直肠癌中的发生、发展及预后中可能扮演着重要的角色。     

血管性痴呆大鼠海马神经型胆碱能受体的变化

目的 探讨血管性痴呆(VD)大鼠海马神经型胆碱能受体(nAChR)的变化.方法 改良四血管法建立VD大鼠模型;术后1个月,采用Morris水迷宫试验检测VD大鼠的学习和记忆功能;应用改良Ellman法测定大鼠血浆及海马乙酰胆碱酯酶(AChE)活性;Western Blot法及RT-PCR法分别检测大鼠海马nAChR亚单位α3、α4、α7蛋白及mRNA的表达水平,并与假手术组比较.结果 与假手术组相比,VD组水迷宫试验逃避潜伏期明显延长,第1次穿越平台时间延长,穿越平台次数减少(均P<0.01);血浆AChE活性降低(P<0.01),海马AChE活性升高(P<0.05);海马nAChR α3、α4、α7蛋白及nAChR α3、α7 mRNA表达水平明显下降(P<0.05～0.01),nAChR α4 mRNA表达水平明显升高(P<0.01).结论 海马神经元nAChR表达的降低可能是VD大鼠认知功能受损害的基础.     

灯盏细辛的神经保护作用及机制

灯盏细辛药性味甘温,具有散寒解表、祛风除湿、活血舒筋、消积止痛之功。现代药理研究证实,其能扩张微细血管,改善微循环,调节血脂,降低血液黏稠度,提高心肌功能及供血,改善血液流变学,抑制血小板及红细胞聚集,     

灯盏细辛提取物对痴呆大鼠学习记忆能力和胆碱酯酶活性的影响

目的 探讨灯盏细辛提取物对痴呆大鼠学习记忆能力及胆碱酯酶活性的影响.方法 Wistar大鼠42只,随机分为5组;用双侧脑室注射β淀粉样蛋白联合腹腔注射D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型.采用Morris水迷宫方法检测大鼠学习记忆能力、比色法检测乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE)活性.结果 与正常组和假手术组相比,模型组大鼠在定向航行和空间探索中逃避潜伏期时间和穿越平台时间延长,穿越平台次数减少(P＜0.05);脑组织中AChE和BuChE活性升高,血浆中AChE和BuChE活性降低(P＜0.05),经过灯盏细辛治疗后痴呆大鼠学习记忆能力有所提高,胆碱酯酶活性趋向于正常(P＜0.05).结论 灯盏细辛能够提高痴呆大鼠学习记忆能力,促进胆碱酯酶活性趋向于正常.     

克汀病人血Cu,Zn,Se含量及CuZnSOD,SeGSH—Px活性观察

测定地方性克汀病患者、病区正常成人血液中Ｃｕ、Ｚｎ、Ｓｅ含量及细胞ＣｕＺｎＳＯＤ、ＳｅＧＳＨ－ＰＸ活性，发现克汀病患者及病区正常人血Ｚｎ、Ｓｅ含量低，红细胞ＣｕＺｎＳＯＤ、ＳｅＧＳＨ－Ｐｘ活性显著低于非病区成人，克汀病人ＳＯＤ活性还显著低于病区正常成人。同时测定病区粮食、饮水、土壤中相应元素含量，发现病区居民主食Ｚｎ、Ｓｅ含量低，病区人群Ｚｎ、Ｓｅ代谢紊乱可能正是由于环境中两种元素缺乏的结果。