参灵抗癌方经 PI3K/AKT 通路调控 Bim 表达逆转胃癌细胞失巢凋亡抵抗的作用及机制

目的 观察参灵抗癌方（SLKAF）逆转胃癌细胞失巢凋亡抵抗作用，并从磷脂酰肌醇原3原激酶/丝苏氨酸蛋白激酶（PI3K/AKT）调控 Bcl-2 细胞死亡调解子抗体（Bim）表达为切入点探讨其作用机制。 方法采用梯度剂量的 SLKAF（0，1，2，4，8，16 mg/mL）与 SGC-7901 胃癌细胞共培养，MTT 法检测胃癌细胞活力，GraphPad Prism7.0 计算半数抑制浓度（IC50），并以 1×IC50、2×IC50 分别作为 SLKAF 干预 SGC-7901细胞的低剂量和高剂量。 运用 RNA 干扰技术将 Bim-siRNA 转染 SGC-7901 细胞，qPCR 技术检测 Bim 表达，观察对 Bim 表达的抑制效率曰以 SLKAF 低、高剂量分别与 SGC-7901 细胞和经 Bim-siRNA 转染的SGC-7901 细胞共培养，分别采用 qPCR 和 Western Blot 检测 PI3K、AKT 的表达，流式细胞技术检测细胞凋亡率，软琼脂克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。 结果 SLKAF 对 SGC-7901 细胞增殖有显著的抑制作用（P<0.01），并呈明显的量 效应关系，IC50 为 7.626 mg/mL，故确定 8、16 mg/mL 分别作为低剂量和高剂量。 Bim-siRNA 转染 SGC-7901 细胞可抑制 Bim 表达（P<0.05）。 SLKAF 高、低剂量均降低 SGC-7901 细胞 PI3K、AKT 表达（P<0.05，P<0.01），提高胃癌细胞凋亡率（P<0.05，P<0.01），降低胃癌细胞克隆形成能力（P<0.01）曰与低剂量比较，高剂量 SLKAF 作用下的 SGC-7901 细胞/ 经 Bim-siRNA 转染的SGC-7901 细胞表达 PI3K、AKT 均降低（P<0.01），胃癌细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞克隆形成数降低（P<0.05）曰在 SLKAF 相同剂量下，SGC-7901 细胞和经 Bim-siRNA 转染的 SGC-7901 细胞表达 PI3K、AKT 比较，差异无统计学意义（P>0.05），但细胞凋亡率和细胞克隆形成能力差异均有统计学意义（P <0.01）。 结论 SLKAF 经 PI3K/AKT 调控 Bim 表达逆转胃癌细胞失巢凋亡抵抗。     

根据“肾为先天之本”探讨多囊卵巢综合征病机演变

多囊卵巢综合征是育龄期妇女月经紊乱最常见的原因之一，对卵泡的正常发育及妇女身心健康产生不利影响，且发病率呈逐年上升的趋势，其病机复杂，病程较长，且存在由气到血的转化过程，根据“肾为先天之本”的观点及多年临床观察发现，多囊卵巢综合征总以肾虚为本，多为本虚标实，本虚为肾阴精亏虚、肾气虚、肾阴虚、肾阳虚，标邪为痰湿、湿热、血瘀，对多囊卵巢综合征的病机演变加以阐释，以期为多囊卵巢综合征之治疗提供理论基础。     

代谢综合征痰证的危险因素：EXT2基因rs11037909/rs1113132/rs3740878-T等位基因、BMI与TG

目的 探讨EXT2基因的单核苷酸多态性（SNPs）对代谢综合征（MS）痰证易感性的影响。方法 选择2013年11月—2020年12月福建中医药大学附属第三人民医院治未病中心、体检中心，福建中医药大学附属晋江市中医院内分泌科就诊的MS患者849例，运用证素辨证方法将MS患者分成MS痰证组（641例）和非痰证组（208例），采用SNPscan多重SNP分型技术检测EXT2的rs11037909、rs1113132、rs3740878基因型，对EXT2基因的SNPs、体重指数（BMI）和甘油三酯（TG）进行Logistic回归分析。结果 （1）MS痰证组的BMI、TG与痰证素呈正相关（P<0.05）。（2）携带EXT2基因rs11037909、rs1113132、rs3740878基因型（CT/TC或CT+CC）、（CC或CG+CC）、（CC或CT+CC）者患痰证的风险是携带TT、GG、TT基因型者的0.562或0.666倍、0.559或0.645倍、0.561或0.650倍。（3）携带EXT2 rs11037909 CT/TC+CC、rs1113132 CG/GC+CC、rs3740...     

加减大柴胡汤对胆固醇结石湿热证小鼠的作用机制

目的 研究加减大柴胡汤对胆固醇结石（CS）湿热证小鼠胆固醇-胆汁酸代谢相关因子的影响，探讨其作用机制。方法 将48只SPF级小鼠随机分为空白组、模型组、大柴胡汤组和熊去氧胆酸组，每组12只；空白组作为对照，其他3组采用“内湿+外湿+高胆固醇致石饲料”的模式造模12周，建立CS湿热证小鼠模型。造模成功后大柴胡汤组和熊去氧胆酸组分别给予加减大柴胡汤和熊去氧胆酸灌胃，模型组和空白组给予等量的生理盐水灌胃，连续干预4周。观察各组小鼠的结石及一般情况，进行旷场实验，NPP底物-AMP缓冲液法、GCNA底物法与钒盐酸氧化法分别检测血清碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷 氨酰基转移酶（GGT）、总胆红素（TBIL）含量，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测胆汁中总胆固醇（TC）、总胆汁酸（TBA）含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）及蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测小鼠回肠组织中法尼酯衍生物X受体（FXR）、成纤维细胞生长因子15（FGF15）和肝脏组织中成纤维细胞生长因子受体4（FGFR4）、细胞外信号调节激酶（ERK）1/2、c-Jun氨基末端激酶（JNK） mRNA及蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型组小鼠胆囊结石状况及湿热证候表现明显，胆汁TC增多、TBA减少（P<0.01），肝功能指标（ALP、GGT、TBIL）均显著升高（P<0.01），肝脏组织明显的脂肪样变性，回肠结构完整性被破坏，回肠FXR、FGF15与肝脏FGFR4、ERK1/2、JNK mRNA及蛋白表达均显著升高（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，大柴胡汤组小鼠胆囊结石状况、肝脏和回肠组织病理形态以及湿热证候表现改善明显；大柴胡汤组和熊去氧胆酸组小鼠胆汁内TC含量均显著降低（P<0.01）、TBA含量均显著增高（P<0.01），血清ALP、GGT、TBIL含量均显著降低（P<0.01）。与熊去氧胆酸组比较，大柴胡汤组血清肝功能指标和胆汁成分改善更显著（P<0.01）。与模型组比较，两用药组小鼠FXR、FGF15、FGFR4、ERK1/2、JNK mRNA和蛋白表达均呈下调趋势，其中大柴胡汤组小鼠回肠组织FXR、FGF15及肝脏组织FGFR4、ERK1/2、JNK mRNA相对表达量均显著降低（P<0.05，P<0.01）；大柴胡汤组小鼠回肠FXR蛋白表达显著下调（P<0.01）、肝脏p-JNK蛋白表达明显下调（P<0.05）。结论 加减大柴胡汤可通过调节FXR/FGF15/FGFR4通路相关因子的表达，调控胆固醇-胆汁酸代谢，发挥清热利湿、利胆消石之效。     

三种卵巢早衰大鼠造模方法比较研究

目的?探讨建立简洁稳定高效的卵巢早衰（POF）的大鼠模型。方法?将40只具有规律动情周期的SD大鼠按随机数字表法分为正常组、环磷酰胺（CTX）组、二氧化乙烯基环己烯（VCD）组、雷公藤（TG）组，每组10只。大鼠适应性喂养1周后，分别采用CTX、VCD、TG造模。在造模过程中观察大鼠的一般情况和动情周期，每周检测大鼠体重，采用HE染色在光镜下观察卵巢组织形态变化；采用TUNEL法检测卵巢颗粒细胞凋亡情况；采用ELISA检测大鼠血清促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E2）含量；采用实时荧光定量PCR法（RT-PCR）和Western Blot检测卵巢组织B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、促凋亡蛋白 Bcl-2 相关 X 蛋白（Bcl-2 assaciated X protein，Bax）mRNA及蛋白表达水平。结果?与正常组比较，各模型组大鼠出现动情周期紊乱，卵巢组织缺血苍白伴不同程度的萎缩，卵泡数减少、卵巢颗粒细胞凋亡率均升高（P<0.05，P<0.01），血清FSH含量（除TG组外）均明显升高（P<0.01），血清E2含量均明显降低（P<0.01），Bcl-2/Bax mRNA和蛋白表达均降低（P<0.05，P<0.01）；与VCD、TG组比较，CTX组大鼠体重减轻（P<0.05），成熟卵泡率明显减少（P<0.01），FSH含量显著降低（P<0.05）。结论?CTX诱导建立POF大鼠模型，造模方法简便易行，成功率较高，造模效果优于VCD和TG，是更为理想的POF造模方法。