β1肾上腺素能受体反义寡核苷酸对自发性高血压大鼠心肌间质及左室功能的影响

目的观察在自发性高血压大鼠中以阳离子脂质体载体介导的β1肾上腺素能受体反义寡核苷酸逆转其心肌纤维化及改善其左室舒缩功能的作用。方法20只雄性19周龄SHR随机分为阳性对照组(n=6),反义(AS-ODN)治疗组(n=7,尾静脉β1-AS-ODN1.0mg/kg20天内共3次),反向(IN-ODN)治疗组(n=7,尾静脉注射β1-IN-ODN1.0mg/kg20天内共3次),另选同龄雄性WistarKyoto(WKY)大鼠为正常对照(n=6)。常规方法测定尾动脉收缩压、左室血流动力学指标及左心室重量指数(LVMI),显微荧光技术观察FITC标记的寡核苷酸在心肌细胞内的摄取及分布,VanGieson染色法检测左室胶原容积分数(CVF),RT-PCR法检测左室心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达。结果(1)转染后3d,寡核苷酸被心肌细胞有效摄取,均匀分布于其胞浆内;(2)与WKY组大鼠相比较,28周龄SHR存在高血压,心肌肥大、纤维化及左室功能不全;(3)与SHR组比较,β1-AS-ODN治疗组大鼠左室心肌β1肾上腺素能受体(β1-AR)mRNA表达减少,血压及LVMI、CVF降低,左室舒缩功能得到改善。结论β1-AS-ODN通过在转录水平抑制SHRβ1-AR的表达,在持久而有效降压的同时,更能有效地逆转左室肥大、纤维化及改善左室功能。     

心房颤动:我们到底知道多少?

目前对心房颤动(房颤)的研究已经在各个层面展开,从基因到通道蛋白、从细胞器到大体解剖、从电生理到组织结构、从入心大静脉到心房特殊结构、从心房神经节丛到各种体液因子的影响、从药物治疗到非药物治疗,各个领域都有一批学者在执着地深入研究.     

冠心病患者E-选择素血清水平及其G98T、S128R基因多态性研究

目的　研究中国汉族人群E 选择素 (E selectin)基因第 2外显子G98T和第 4外显子S12 8R多态性与冠心病 (CHD)的相关性 ,以及对血清E selectin水平的影响。方法　采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术 ,检测 2 38例CHD患者和 199例健康人作对照者的E selectin基因多态性 ,同时采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测CHD患者和对照者血清E selectin水平。结果　E selectin基因S12 8R基因型频率和等位基因频率在CHD组和对照组比较差异有显著性(P <0 0 5 ) ,基因型频率的相对风险分析发现 ,SR基因型携带者患冠心病的风险是SS基因型的 2 16 2倍 (OR =2 16 2 ,95 %CI:1 0 73～ 4 35 9) ,SR基因型携带者的E selectin血清水平显著高于SS基因型(4 2 9± 8 1比 35 7± 7 7,P <0 0 1)。E selectinG98T各基因型分布在CHD组和对照组之间比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,但在心肌梗死组与心绞痛组间比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　E selectinS12 8R基因多态性与冠心病的发病有关联 ,并可影响血清E selectin水平 ,R等位基因可能是CHD发病的遗传易感基因 ;E selectin基因G98T多态性在冠心病发病中可能不起直接重要作用。     

重组人脑利钠肽对急性冠脉综合征患者炎症因子及心功能的影响

目的:观察重组人脑利钠肽对急性冠脉综合征患者心功能及炎症因子的影响。方法:选择急性冠脉综合征患者200例,随机分成重组人脑利钠肽组(120例)和硝酸甘油组(80例);两组均测定治疗前后血浆中BNP水平、血清炎症因子hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-8的含量,采用超声心动图检测射血分数(LVEF);并比较两组治疗前后上述指标的变化。结果:治疗后两组患者BNP及炎症因子hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-8的表达均显著降低(P0.05),LVEF均有显著升高(P0.05),但以重组人脑利钠肽治疗组更为显著(P0.05)。结论:人脑利钠肽治疗急性冠脉综合征能显著改善心功能,降低炎症因子水平;有助于改善急性冠脉综合征后心力衰竭的炎症应激状态。     

Fas Ligand基因转染对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的 :研究腺病毒介导FasLigand基因转染对大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响。 方法 :常规分子生物学技术构建重组腺病毒Ad FasL、Ad βgal。免疫组化方法检测转染Ad FasL的大鼠血管平滑肌细胞FasLigand蛋白表达。用TUNEL法检测转染腺病毒的血管平滑肌细胞是否发生凋亡。结果 :10 0moiAd FasL转染大鼠血管平滑肌细胞 ,10 0 %细胞表达FasLigand蛋白 ,并发生凋亡。结论 :大鼠对Ad FasL转染诱导的凋亡易感。因此可以推断Ad FasL转染损伤后血管壁将减少血管平滑肌细胞积累。Ad FasL转染可能是有效的再狭窄治疗策略     

橙皮素抗apoE-/-小鼠动脉粥样硬化作用及其机制

目的探讨橙皮素抗apoE-/-小鼠动脉粥样硬化作用及其机制。方法40只8周龄apoE-/-小鼠随机分为4组,即普通饮食组(NC)、动脉粥样硬化高脂饮食组(WD)、橙皮素高剂量(100 mg/kg)组(H-HES)、橙皮素低剂量(50 mg/kg)组(L-HES),各10只。采用灌胃方式给予橙皮素,根据每只小鼠体质量给予不同的剂量,12周后处死小鼠前眶静脉采血,全自动生化分析仪检测血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和高密度脂蛋白胆固醇浓度,并采用ELISA试剂盒检测apoE-/-小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的浓度,麻醉小鼠后左心室灌注多聚甲醛固定,主动脉树油红O染色观察斑块百分比,同时取材主动脉窦采用免疫荧光技术观察斑块巨噬细胞的浸润情况。结果与NC组比较,WD组、H-HES组及L-HES组apoE-/-小鼠血清TC、TG、LDL-C浓度显著升高,HDL-C显著降低(P<0.05),且H-HES及L-HES组TC、TG、LDL-C的水平显著低于WD组(P<0.05)。高脂高胆固醇饲料喂养12周后,WD组的主动脉树动脉粥样硬化病变非常显著,其主动脉树的AS斑块面积百分比为(0.1430±0.0604),而H-HES组、L-HES组的主动脉树AS的面积百分比分别为(0.0404±0.0175)、(0.0252±0.0195),与WD组相比,H-HES组、L-HES组主动脉树AS病变显著减轻,差异有统计学意义(P<0.05)。WD组的主动脉窦动脉粥样硬化斑块部位巨噬细胞浸润增加,经过橙皮素12周治疗后,H-HES和L-HES组主动脉窦斑块部位CD68巨噬细胞浸润减少(P<0.05)。WD组apoE-/-小鼠血清MCP-1和TNF-α的浓度分别为(807.33±122.46)、(9.87±1.75)μg/L高于H-HES及L-HES组的(365.83±66.31)、(6.34±0.65)μg/L及(405.74±46.21)、(9.48±0.82)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论橙皮素有明显的调脂降血脂作用,同时具有抗动脉粥样硬化效果,其主要通过抗炎发挥药理作用。     

早发冠心病合并糖尿病患者冠状动脉病变特点

目的探讨早发冠心病合并糖尿病患者的冠状动脉病变特点。方法收集2014年1月—2015年3月心内科经临床诊断及冠状动脉造影确诊的早发冠心病患者132例,依据是否合并糖尿病分为糖尿病组50例和非糖尿病组82例。比较2组冠状动脉病变发生率、病变部位及严重程度。结果糖尿病组的单支病变、多支病变发生率与非糖尿病组比较差异有统计学意义((40.0%vs.58.5%,28.0%vs.12.2%,P<0.05);2组冠状动脉病变部位分布比较无差异无统计学意义(x~2=4.057,P>0.05);糖尿病组冠状动脉病变支数多于非糖尿病组(1.88±0.82 vs.1.55±0.74,P<0.05),Gensini积分也高于非糖尿病组[(45.75±23.29)分vs.(31.93±19.82)分,P<0.05]。结论早发冠心病合并糖尿病患者冠状动脉病变范围较未合并糖尿病患者更广泛,且病变程度更重。     

过氧化氢通过上调高迁移率族蛋白损伤心肌的实验研究

目的探讨过氧化氢(H_2O_2)通过高迁移率族蛋白(HMGB1)介导对心肌损伤的作用机制。方法胎鼠心肌细胞培养后,分为4组:对照组,H_2O_2不同浓度组(100μmol/L、200μmol/L、500μmol/L),H_2O_2(200μmol/L)+乙酰半胱氨酸(NAC,200μmol/L)组,H_2O_2(200μmol/L)+HMGB1抗体(20μg/ml)组。检测心肌细胞活性、凋亡率、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、HMGB1表达。结果(1)细胞活性:与对照组比较,心肌细胞活性随着H_2O_2浓度的增加而降低(t=-5.81,-9.59,-14.21,P均<0.05);NAC和HMGB1抗体可以明显减弱H_2O_2(200μmol/L)对细胞活性的抑制作用(t=-2.98,-3.03,P<均0.05)。(2)LDH和CK的表达水平:与对照组比较,LDH和CK的表达量随着H_2O_2的浓度增加而增加(t_(LDH)=9.78,15.37,18.13,t_(CK)=11.29,20.35,26.17,P均<0.05)。与H_2O_2(200μmol/L)组比,NAC和HMGB1抗体可以抑制LDH和CK的表达(t_(LDH)=-4.91,-4.22,t_(CK)=-4.17,3.29,P均<0.05)。(3)MDA表达和SOD活性:H_2O_2(100,200,500μmol/L)可以抑制心肌细胞SOD活性,增加MDA表达(t_(SOD)=-4.16,-6.59,-10.76,t_(MDA)=3.98,5.16,9.47,P均<0.05);与H_2O_2(200μmol/L)组比,NAC和HMGB1抗体可以拮抗H_2O_2对SOD和MDA的影响(t_(LDH)=-4.91,-4.22,t_(CK)=-4.17,3.29,P均<0.05)。(4)HMGB1的表达:与对照组比较,H_2O_2(100,200,500μmoL/L)可明显增加心肌中HMGB1的表达(t=12.94,21.08,25.81,P均<0.05),与H_2O_2(200μmol/L)组比,NAC+H_2O_2和HMGB1-Ab+H_2O_2中HMGB1的表达明显降低(t=-10.24,-8.09,P均<0.05)。(5)心肌凋亡:与对照组比较,H_2O_2组(100、200、500μmol/L)心肌凋亡率明显增加(t=7.52,13.06,16.61,P<0.05);NAC+H_2O_2组和HMGB1+H_2O_2组心肌凋亡率较H_2O_2(200μmol/L)组明显增加(t=-4.89,-4.23,P<0.05)。结论 H_2O_2诱导的氧化应激反应可以通过上调HMGB1表达,损伤心肌。     

血管紧张素Ⅱ对心脏成纤维细胞TRPM7通道功能的影响

目的:研究心脏成纤维细胞(CFs)膜上的TRPM7通道的电生理特性。方法:将分离培养出来的乳鼠CFs用6种不同浓度的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)干预至12h,分别测量各组胶原蛋白的表达水平,从而挑选出最佳诱导纤维化的AngⅡ浓度,最佳浓度的AngⅡ分别将CFs干预至5个不同的时间,记录相应的CFs膜上的TRPM7电流及各组的胶原蛋白水平。结果:诱导心脏纤维化最大的AngⅡ浓度是1nmol/L,最佳诱导纤维化浓度干预0,6,12,24,48h后CFs的TRPM7与胶原蛋白Ⅲ的表达水平最初升高,于12h达到最高水平,之后呈现递减水平,且在CFs膜上记录到的TRPM7内外向电流也呈现相应的先增加后降低趋势,与两种蛋白的表达水平正相关。结论:CFs膜上的TRPM7电流在AngⅡ的作用下,呈现先增加后减少的趋势,是AngⅡ介导CFs增殖与凋亡从而导致心脏纤维化的重要途径之一。     

参松养心对代谢综合征大鼠心房颤动的影响及机制

目的探讨参松养心(SSYX)对代谢综合征(MetS)大鼠心房颤动(简称房颤)的影响及其机制。方法 SD大鼠40只,随机分为4组即对照(CTL)组、CTL+SSYX组、MetS组、MetS+SSYX组,每组10只。MetS组即高脂高糖喂养16周,MetS+SSYX组即高脂高糖喂养8周后加SSYX灌胃8周(0.4 g/kg)至16周。16周后分别测量4组大鼠的体重、心率、血压(收缩压、舒张压)、血糖水平;50 Hz的Burst刺激检测4组大鼠房颤诱发的情况;通过免疫蛋白印迹检测4组大鼠心房组织中酪氨酸羟化酶(TH)、生长相关蛋白-43(GAP43)的蛋白表达水平及通过免疫组化来评估交感神经的活性及其分布;通过免疫蛋白印迹检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6),白介素-1β(IL-1β),NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸酶-1(caspase-1)及IL-1β的蛋白表达水平。结果与CTL组比较,MetS组的体重、心率、血压(收缩压、舒张压)、血糖水平及房颤诱发率均明显增加(P<0.05),其左房组织的TH、GAP43、NLRP3、 caspase-1、TNF-α、IL-6、IL-1β的蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且左房组织的交感神经密度也明显升高(P<0.05)。与MetS组比较,MetS+SSYX组的体重、心率、血压(收缩压、舒张压)、血糖水平及房颤诱发率均明显降低(P<0.05),其左房组织的TH、GAP43、NLRP3、caspase-1、TNF-α、IL-6、IL-1β的蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),且左房组织的交感神经密度也明显降低(P<0.05)。结论 SSYX可能通过抑制NLRP3炎症小体活性从而抑制交感神经活性及心房炎症来降低MetS房颤。