基于Label-free技术探讨肌少-骨质疏松症与骨质疏松症患者骨组织差异蛋白的研究与分析

目的对“骨质疏松症(OP)”与“肌少-骨质疏松症(SO)”研究对象的骨组织样品进行蛋白定量检测、蛋白差异分析及差异蛋白功能富集分析,旨在筛选与鉴定出调控SO发生发展的差异蛋白。方法共收集6例SO与OP患者骨组织样品,采用Label-free定量蛋白质组技术进行鉴定与筛选;在基因本体论(GO)生物学资源库、蛋白互作网络(PPI)系统及京都基因与基因组百科全书(KEGG)对具有显著差异的蛋白开展生物信息研究。结果在SO组与OP组中共筛选出1395个差异蛋白,经差异显著性筛选其中上调表达有21个,表达下调有9个,上下调蛋白有统计学意义;两组间差异显著的蛋白分别是过氧化物酶-1、转化生长因子-β1、线粒体转录因子A和细胞色素C氧化酶等;差异蛋白主要涉及细胞氧化还原稳态、氧化磷酸化和代谢过程。结论过氧化物酶-1、转化生长因子-β1、线粒体转录因子A和细胞色素C氧化酶等差异蛋白可能参与了SO发生发展过程。     

腹腔镜子宫腺肌瘤切除术后辅助治疗对种植期内膜HOXA10及其基因启动子甲基化的影响*

目的探讨腹腔镜子宫腺肌瘤切除及术后促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)、左炔诺孕酮宫内缓释系统(曼月乐,LNG-IUS)辅助治疗对内膜HOXA10-mRNA及其基因启动子区甲基化的影响。方法选取2013年6月-2016年6月就诊的子宫腺肌瘤77例,行腹腔镜子宫腺肌瘤切除术后,相继注射长效GnRH-a 6个月及放置曼月乐12个月,于术前及曼月乐取出后黄体中期取子宫内膜;同期已生育妇女24例作为对照组;RT-PCR法检测子宫内膜HOXA10-mRNA,亚硫酸氢盐修饰后测序(BSP)检测HOXA10基因启动子区F1片段甲基化状态。结果两组患者年龄无明显差异。观察组术前子宫内膜HOXA10-m RNA为(0.5±0.1),明显低于术后观察组(0.9±0.3)和对照组术前(0.9±0.4)。观察组术前子宫内膜HOXA10启动子F1片段甲基化位点数为(6.5±3.7),明显高于术后观察组(2.8±2.0)和对照组(2.2±1.8),差异有统计学意义(P 0.05)。结论子宫腺肌瘤降低内膜HOXA10的表达,腹腔镜子宫腺肌瘤切除术联合GnRH-a及曼月乐综合治疗,可降低内膜HOXA10启动子甲基化水平,提高HOXA 10-mRNA的表达,从而改善子宫内膜容受性。     

基于Illumina高通量测序技术研究肌少-骨质疏松症与骨质疏松症患者骨组织microRNAs差异表达谱及差异分析

目的 采用高通量测序技术筛选“肌少-骨质疏松症”（sarco-osteoporosis,SO）与骨质疏松症（osteoporosis,OP）患者骨组织标本中miRNA差异表达谱,并对差异显著的miRNA进行生物信息分析。方法 运用Illumina Hiseq 2500测序技术筛查2017年至2019年期间福建省老年医院SO组与OP组患者的6对骨组织样品中miRNA表达谱;差异显著表达的miRNA运用层次聚类图和火山图分析,并结合基因本体论（GO）富集分析、京都基因与基因组百科全书 (KEGG)信号通路分析探讨miRNA参与成肌细胞、成骨细胞增殖和分化的生物过程。 结果 SO组与OP 组进行组间对比,12份骨组织中共鉴定到 3 064个（P<0.05;| log2 Fold Change |>0.0）差异表达的miRNAs,其中上调的1 432个,下调的1 632个,筛选出其中差异表达显著的22个miRNAs︱log2 Fold Change︱≥2 且P <0.05包括15个在SO组骨组织中表达上调的 miRNAs 和 7个表达下调的 miRNAs;层次聚类图和火山图分析提示,SO和OP骨组织中的miRNA差异表达谱具有统计学意义;GO 分析结果显示,miRNA的靶基因富集于成肌细胞与成骨细胞的生物过程,还参与细胞的氧化代谢、增殖和分化以及凋亡等生物过程。KEGG通路分析显示,hsa-miR-382-3p、hsa-miR-27a-5p、hsa-miR-1226-5p、hsa-miR-3934-5p和hsa-miR-451a的靶基因集合显著富集于NF-κB、Wnt、MAPK和P53 等信号通路中。结论 Illumina高通量测序技术能有效筛查出肌少-骨质疏松症骨组织中差异表达的miRNA;通过分析5个差异显著基因的下游靶基因,并结合分子生物学相关数据库与查阅大量文献发现这些差异miRNA可能参与肌少-骨质疏松症疾病状态下成骨细胞和成肌细胞多种生物活性过程。这一研究结果为后续深入研究miRNA及其靶基因调控机体骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的机制提供了新思路和理论依据。     

母乳喂养专科护士核心能力评价指标的构建

目的 构建母乳喂养专科护士核心能力评价指标,为母乳喂养专科护士的选拔、培训、认证等提供参考依据。方法 通过文献研究及专家访谈初步拟订母乳喂养专科护士核心能力评价指标体系初稿,并于2020年8—10月运用德尔菲法对18名专家进行2轮问卷咨询,完成指标的筛选、修订,并确定各级指标权重。结果 2轮专家咨询的问卷有效回收率均为100%。第1轮与2轮专家咨询中,专家权威系数分别为0.845和0.876。第2轮专家咨询一、二、三级指标专家意见协调系数分别为0.601、0.523、0.392（均P<0.001）。最终形成了由5个一级指标（母乳喂养专业能力、职业人文素养、 教育与沟通能力、自我发展能力、领导与管理能力）、11个二级指标、65个三级指标组成的母乳喂养专科护士核心能力的评价指标体系。结论 基于德尔菲法函询的母乳喂养专科护士核心能力的评价指标体系具有科学性和实用性,能为母乳喂养专科护士的选拔、任用、培训等提供参考依据。