类风湿关节炎骨破坏作用机制及中医药治疗研究进展

类风湿关节炎(RA)是一种累及多个关节的全身性自身免疫性疾病,常累及小关节,病变呈对称性、侵袭性和致残性,发病后期常易造成不可逆转的软骨、骨和其他邻近组织的破坏,最终导致严重的关节畸形甚至残疾,给患者及其家庭造成严重的身体和心理损害,严重影响生活质量。迄今为止,虽然治疗RA的药物很多,但RA仍然无法完全得到彻底根治,究其原因在于RA及其骨破坏的发病机制仍未完全明确。因此,对于RA骨破坏的发病机制及如何治疗显得格外重要。RA骨破坏的发病机制总的来说是成骨细胞与破骨细胞之间的失衡导致的,本文通过整理近年来参与RA关节软骨破坏及骨侵蚀病程的相关研究文献进行综述和讨论,分别从细胞因子/趋化因子、非编码RNA、信号通路等三个不同方面阐述了对成骨细胞与破骨细胞之间的作用造成RA骨破坏的发病机制,以期为RA骨破坏发病机制研究提供新的思路。中医药在预防RA骨破坏的发病过程中起着重要的作用,在保证疗效的前提下还能保证其安全性。因此,对于RA骨破坏的发病机制进行深入地研究及研究中医药在其治疗中的作用,为其治疗能够提供新的研究思路。     

健脾泄浊方联合芙蓉膏外敷治疗脾虚痰阻型慢性痛风的临床研究

目的观察健脾泄浊方联合芙蓉膏外敷治疗脾虚痰阻型慢性痛风的临床疗效。方法随机将70例慢性痛风患者分为治疗组与对照组,各35例,对照组给予西药非布司他片联合碳酸氢钠片治疗,治疗组在对照组的基础上加用健脾泄浊方内服联合芙蓉膏外敷治疗。比较治疗前后两组患者的中医证候积分、疼痛视觉模拟评分及血尿酸、红细胞沉降率、高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1、白细胞介素-4水平,评定临床疗效。结果与对照组相比,治疗组患者慢性痛风患者中医症状积分显著下降(P<0.05);治疗后,两组患者疼痛视觉模评分均较治疗前显著降低,且治疗组明显优于对照组(P<0.05);治疗后,治疗组患者的血尿酸、红细胞沉降率及高敏C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1水平显著低于对照组,白细胞介素-4水平显著高于对照组(P<0.05);治疗组的临床总有效率91.42%明显优于对照组74.28%(P<0.05);两组患者在治疗过程中均安全性良好,未发生明显不良反应。结论健脾泄浊方联合芙蓉膏外敷治疗脾虚痰阻型慢性痛风患者的疗效显著,能有效促进血清尿酸排泄、抑制炎症反应,明显改善患者临床症状。     

丁锷论治强直性脊柱炎的学术特点

丁锷教授从医60载,博览经典,博采众长,中西合璧,临证思辨,并不断潜心探索,对中医痹病等疑难疾病特别是强直性脊柱炎的病因病机、治则方药,提出了许多独特的见解,并结合自己的临床实践,     

UHPLC-MS/MS同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种活性成分

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种成分（黄芩苷、栀子苷、木犀草素、齐墩果酸、薏苡素、苦杏仁苷）含量的方法。方法 采用Phenomenex Luna Omega C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.6 μm）,以含10 mmol/L甲酸铵的0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸的乙腈（B）为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30 ℃,流速为0.25 mL/min,进样量5 μL,分析时间10 min。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式在负离子条件下进行检测。结果 所测6种活性成分在测定浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 0）,精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率为98.62%~103.7%,RSD≤2.70%。结论 该方法准确度高、分析速度快、检测限低、重复性高,适用于黄芩清热除痹胶囊质量控制。     

强直性脊柱炎患者外周血辅助性T细胞亚群变化及药物干预

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种慢性进行性自身免疫性疾病,发病早、病程长、致残率高,且好发于青少年。因此AS早期诊断和治疗至关重要。近年来,研究表明AS发病可能与辅助性T细胞(T help cell,Th)亚群有关。Th细胞亚群分泌促炎抑炎细胞因子失衡,机体免疫功能受损,致AS发病。当前一些针对Th细胞亚群的药物运用于临床,虽取得一定疗效,但未取得预期理想效果,因此进一步深化Th细胞亚群的研究将为揭示AS发病机制并制定相应的免疫治疗策略提供新的理论依据和思路。     

丁锷论治强直性脊柱炎的学术特点

正丁锷教授从医60载,博览经典,博采众长,中西合璧,临证思辨,并不断潜心探索,对中医痹病等疑难疾病特别是强直性脊柱炎的病因病机、治则方药,提出了许多独特的见解,并结合自己的临床实践,逐步形成了具有独特内涵的学术思想和诊疗经验,临床上运用,每每收效。笔者从师学习,受益匪浅,感受颇深。中西合参,强调本虚标实强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种     

长链非编码RNA Linc00638对类风湿关节炎患者炎症和氧化应激的影响

目的 探究类风湿关节炎（RA）患者长链非编码RNA（lncRNA）Linc00638的表达,及其对RA滑膜成纤维细胞（FLS）炎症、氧化应激的影响。方法 收集20例正常人（健康对照组）、35例RA患者（RA组）外周血单个核细胞（PBMCs）,RT-qPCR法检测Linc00638表达,并研究其与临床指标的相关性;构建Linc00638过表达质粒和小干扰RNA,转染至RA-FLS中;CCK8检测细胞活力;RT-qPCR法检测Linc00638的过表达和干扰效率。ELISA法检测细胞上清液中白介素-4（IL-4）、白介素-6（IL-6）、活性氧（ROS）、超氧化物歧化 酶（SOD）的表达。结果 与健康对照组相比,RA患者血沉（ESR）、C反应蛋白、类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸肽抗体（Anti-CCP）、IgA、 C4显著升高（P<0.05）,Linc00638表达显著降低（P<0.01）;ROC曲线下面积AUC为91.86%,Linc00638的最佳截断值为0.74。Spearman相关性分析表明Linc00638与年龄、病程、DAS28、ESR、C反应蛋白、RF、anti-CCP呈负相关,与IL-4,SOD呈正相关（P<0.05）。关联规则分析表明Linc00638的下降与年龄（>60岁）、病程（>10年）、ESR、RF、anti-CCP的升高,与IL-4、SOD的降低具有强关联。过表达Linc00638能够抑制细胞活力,干扰Linc00638能够提升细胞活力。过表达Linc00638组能够显著升高Linc00638、IL-4、SOD水平（P<0.05）,降低IL-6、ROS表达（P<0.05）;si-Linc00638组能显著降低Linc00638、IL-4、SOD表达（P<0.05）,升高IL-6、ROS表达（P<0.05）。结论 Linc00638在RA患者中低表达,可能通过调控炎症和氧化应激参与疾病进展。     

1 468例类风湿关节炎患者终点事件发生情况队列研究

目的 采用队列研究方法,随访安徽中医药大学第一附属医院类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）出院患者终点事件发生情况,探讨其终点事件发生的相关因素。方法 纳入安徽中医药大学第一附属医院2012年1月至2016年6月期间诊断为RA患者的病例,调取并记录RA患者的一般资料,采用电话随访方式,随访并记录出院患者中医药使用情况（根据RA患者服药时间分为非暴露组、低暴露组、中暴露组和高暴露组）、终点事件发生情况,调取随访成功RA患者首次入院的实验室指标,采用多元Logistic回归分析法分析各因素与RA患者终点事件发生的相关性。结果 共纳入1 812例RA患者,随访成功1 468例,随访终点事件有80例。全因死亡的影响因素是中医药暴露强度,年龄、抗环瓜氨酸多肽抗体能够增加病死率;再发入院的影响因素是中医药暴露强度,血沉、超氧化物歧化酶、血小板可以增加再发入院的发生率;关节外病变的影响因素是中医药暴露强度、改善病情的抗风湿药,年龄、抗环瓜氨酸多肽抗体会增加关节外病变的风险;手术治疗的影响因素是中医药暴露强度。结论 中医药干预是RA患者终点事件发生的相关因素,且干预强度越大,终点事件发生率越低。     

基于B、T淋巴细胞衰减因子及氧化应激探讨新风胶囊治疗强直性脊柱炎的作用机制

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(TAOC)、活性氧(ROS)、活性氮(RNS)、丙二醛(MDA)的变化及新风胶囊(XFC)对其影响。方法将120例AS患者按随机数字表法分为两组:XFC组(60例)和柳氮磺胺吡啶(SASP)组(60例)。两组均治疗3个月。60名健康体检者为健康对照组(NC组)。采用流式细胞术检测患者外周血BTLA表达频率及活化水平;采用酶联免疫分析法检测两组血清中氧化应激指标(SOD、CAT、TAOC、ROS、RNS、MDA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-10含量;采用魏氏法检测炎性指标血沉(ESR);采用日立7060型全自动生化分析仪检测超敏C反应蛋白(Hs-CRP);采用VAS及ASAS 20、BASDAI 50评定疗效;并进行生活质量评分及BTLA表达频率的相关分析。结果(1)与SASP组比较,XFC组ASAS 20及BASDAI 50疗效更优,差异有统计学意义(P0.01)。(2)与NC组比较,AS患者外周血BTLA表达显著降低(P0.05);SOD、CAT、TAOC值显著降低(P0.01,P0.05);ROS、RNS、MDA值显著升高(P0.01,P0.05);TNF-α、IL-1β、ESR、Hs-CRP值显著升高(P0.01),IL-4、IL-10值显著降低(P0.01,P0.05)。(3)与本组治疗前比较,治疗后两组外周血BTLA/CD19+B、BTLA/CD24+B、SOD、TAOC、IL-4、SF-36量表8个维度积分值均显著升高,ROS、MDA、TNF-α、ESR、Hs-CRP、VAS、BASDAI 50、BASFI、BAS-G均显著降低(P0.01,P0.05)。XFC组在升高BTLA/CD19+B、BTLA/CD24+B、SOD、TAOC、IL-10、BP、MH、VT、SF及降低ROS、IL-1β、MDA、TNF-α、ESR、Hs-CRP、VAS、BASDAI、BASFI、BAS-G方面优于SASP组(P0.01,P0.05)。(4)Pearson相关分析结果显示:外周血BTLA/CD19+B与SOD、CAT、TAOC、IL-4、IL-10、GH、RP、BP、SF呈正相关(r分别为0.431,0.325,0.318,0.316,0.348,0.314,0.358,0.318,0.326;P0.05,P0.01),与ROS、MDA、TNF-α、IL-1β、ESR、VAS、BASDAI呈负相关(r分别为-0.342;-0.368,-0.334,-0.354,-0.324,-0.372,-0.342,P0.05,P0.01)。BTLA/CD24+B与SOD、TAOC、IL-4、IL-10、GH、RP、BP、SF、RE、MH、VT亦呈正相关(r分别为0.358,0.352,0.372,0.436,0.435,0.326,0.352,0.345,0.326,0.343,0.332;P0.05,P0.01),与ROS、RNS、MDA、ESR、Hs-CRP、VAS、BASDAI、BASFI呈负相关(r分别为-0.447,-0.336,-0.405,-0.395,-0.358,-0.436,-0.338,-0.425;P0.05,P0.01)。结论 XFC能提高AS患者外周血BTLA表达,负性调节B细胞的激活与增殖,降低异常免疫反应和氧化应激损伤,从而有效减轻关节僵痛症状。     

类风湿关节炎患者细胞凋亡与临床指标相关性分析

目的观察寒湿型类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血CD4~+T淋巴细胞凋亡基因表达,探讨其与RA疾病临床指标的相关性。方法选取16例寒湿型RA患者(RA组)和16名健康人(对照组),应用FCM检测RA组及对照组CD4~+T细胞凋亡率,应用RT-PCR法检测凋亡基因fas、fasL、caspase-8、caspase-3、bcl-2、bax mRNA相对表达水平;分析凋亡基因与临床活动指标[ESR、CRP、RF、CCP、中医证候积分、关节晨僵时间、关节压痛数、关节肿胀数、关节功能分级及28个关节数疾病活动度评分(disease activity scores that include different 28-joint counts,DAS28)]相关性。结果与对照组比较,RA组CD4~+T细胞凋亡率降低[(2.6±0.9)%vs.(7.7±1.3)%,P0.01],RA组CD4~+T fas、fasL、caspase-8、caspase-3、bax mRNA相对表达降低,bcl-2升高(P0.01)。CD4~+T细胞凋亡率与ESR呈负相关(P0.05),caspase-8与关节肿胀数呈负相关(P0.05),bcl-2与中医证候积分和关节功能分级亦呈负相关(P0.01,P0.05)。结论 RA患者外周血CD4~+T淋巴细胞存在凋亡障碍,并且与疾病的活动性密切相关。