经典名方升陷汤的研究进展及质量标志物的预测分析

经典名方升陷汤由黄芪、知母、柴胡、升麻和桔梗组成,主治大气下陷证,现代临床主要用于治疗循环和呼吸系统的疾病。对近年来升陷汤化学成分、药理作用和临床应用的研究进展进行整理归纳和分析,并从质量传递与溯源、成分可测性、成分有效性、成分特有性及复方配伍环境5个方面对升陷汤质量标志物（Q-marker）进行预测,分析发现黄芪甲苷、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷、芒柄花素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D、芒果苷、知母皂苷B-Ⅱ、阿魏酸、异阿魏酸和桔梗皂苷D可作为升陷汤的Q-marker,为经典名方升陷汤质量控制体系和全过程质量溯源体系建立提供科学依据。     

补肾活血方对肾虚血瘀型子宫内膜增生症大鼠的作用及机制研究

目的 探讨补肾活血方（巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等）对肾虚血瘀型子宫内膜增生症 （Endometrial hyperplasia,EH）大鼠的作用及机制。方法 将90 只SD 大鼠随机分为正常组、模型组、米非司 酮组（12 mg·kg-1）及补肾活血方低、中、高剂量组（1.2、2.4、4.8 g·kg-1）,每组15 只。采用灌胃羟基脲及戊酸 雌二醇,联合尾静脉注射高分子右旋糖苷法复制肾虚血瘀型EH 大鼠模型。造模成功后,各组按照设定剂量灌 胃给药,每日1 次,连续21 d。实验结束后,采用生化法检测各组大鼠血清环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷 （cGMP）、皮质醇（CORT）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）、促甲状腺激 素（TSH）的水平以及全血黏度、血液流变学、凝血功能等指标;ELISA 法检测血清雌激素（E2）、卵泡雌激素 （FSH）、黄体生成素（LH）、一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）的水平;HE 染色法观察子宫内膜组织病理形态变 化,并测量子宫内膜厚度;免疫组化法检测子宫内膜组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制 物1（TIMP-1）蛋白表达水平;Western Blot 法检测子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1、B 细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、 Bcl-2 相关X 蛋白（Bax）、第10 号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因（PTEN）蛋白表达水平。结果 与 正常组比较,模型组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO 比值均明显降低 （P＜0.05,P＜0.01）,cGMP、E2、FSH、LH、NO 水平均明显升高（P＜0.05,P＜0.01）;血液流变学各项指标 及纤维蛋白原（FIB）含量均明显升高（P＜0.05）,凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时 间（APTT）均明显延长（P＜0.05）;子宫指数及子宫内膜厚度显著升高（P＜0.01）;子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2 蛋白表达显著上调（P＜0.01）,TIMP-1、PTEN、Bax 蛋白表达显著下调（P＜0.01）。与模型组比较,补肾活血 方组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO 比值均明显升高（P＜0.05,P＜ 0.01）;cGMP、E2、FSH、LH、NO 水平均明显降低（P＜0.05,P＜0.01）;血液流变学各项指标及FIB 含量均明 显降低（P＜0.05,P＜0.01）,TT、PT、APTT 均明显缩短（P＜0.05）;子宫指数及子宫内膜厚度均明显降低（P＜ 0.05,P＜0.01）;子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2 蛋白表达显著下调（P＜0.05,P＜0.01）,TIMP-1、PTEN、Bax 蛋白表达显著上调（P＜0.05,P＜0.01）。结论 补肾活血方能够改善肾虚血瘀型EH 大鼠的症状和体征,保护 子宫内膜血管内皮功能,以缓解子宫内膜增生,其作用机制与恢复MMP-9/TIMP-1 平衡,上调Bax、PTEN 表 达,抑制Bcl-2 表达有关。     

基于PPARγ/LXRα/ABCG1信号通路探讨黄芪总皂苷-荷叶总生物碱防治高脂血症的机制

目的 观察黄芪总皂苷-荷叶总生物碱配伍对高脂血症大鼠胆固醇逆转运（RCT）的影响,探讨其作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、高脂饮食组和黄芪总皂苷-荷叶总生物碱低（17 mg·kg^-1+40 mg·kg^-1）、中（34 mg·kg^-1+80 mg·kg^-1）、高（68 mg·kg^-1+160 mg·kg^-1）剂量组及辛伐他汀（2.1 mg·kg^-1）组,每组10只。采用高脂饲料连续喂养6周复制高脂血症大鼠模型,从第3周开始除正常组和高脂饮食组给予蒸馏水外,其余各组均灌胃相应药物治疗,给药4周。全自动生化分析仪检测大鼠血脂及肝功能变化;苏木素-伊红（HE）及油红O染色法观察大鼠肝组织病理形态及脂肪变性情况;半自动生化分析仪检测大鼠肝组织和粪便总胆固醇（TC）和总胆汁酸（TBA）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、肝X受体α（LXRα）、三磷酸结合盒转运体G1（ABCG1）和胆固醇7α羟化酶（CYP7A1）mRNA和蛋白的表达水平。结果 与正常组比较,高脂饮食组大鼠血清TC、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、TBA、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的含量或活性显著升高（P<0.01）,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量显著降低（P<0.01）,肝细胞肿胀明显,部分呈气球样改变,肝细胞内含有大量脂肪空泡和红色脂滴,肝组织和粪便TC和TBA含量显著升高（P<0.01）,肝组织PPARγ、LXRα、ABCG1和CYP7A1 mRNA和蛋白的表达显著降低（P<0.01）。与高脂饮食组比较,各给药组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TBA、AST、ALT的含量或活性显著降低（P<0.01）,HDL-C的含量显著升高（P<0.01）,肝细胞肿胀明显减轻,肝组织中气球样变、脂滴空泡和红色脂滴明显减少,肝组织TC和TBA含量明显下降（P<0.05,P<0.01）,粪便TC和TBA含量明显升高（P<0.05,P<0.01）,肝组织PPARγ、LXRα、ABCG1和CYP7A1 mRNA和蛋白表达明显上调（P<0.05,P<0.01）。结论 黄芪总皂苷-荷叶总生物碱对高脂血症大鼠具有较好的防治效果,其作用机制可能与激活PPARγ/LXRα/ABCG1信号通路,调节RCT有关。     

基于TLR4/NF-κB/MLCK 通路探讨百合地黄汤治疗失眠伴肠道菌群失调小鼠的机制

目的 基于TLR4/NF-κB/MLCK 通路研究百合地黄汤对对氯苯丙氨酸（PCPA）及多因素刺激所致失眠伴 肠道菌群失调小鼠的治疗作用及机制,为临床用药提供理论依据。方法 将84 只KM 小鼠随机分为正常组、 模型组、阳性药物组（地西泮,1.38 mg·kg-1）、百合组（2.25 g·kg-1）、地黄组（2.25 g·kg-1）、百合地黄汤组 （4.5 g·kg-1）。采用夹尾2 min、昼夜颠倒24 h、垫料潮湿24 h、45°鼠笼倾斜24 h、交替鼠笼24 h、禁食不禁 水24 h、冷水浴3 min 等多因素刺激4 周结合PCPA 腹腔注射2 d 共同制备失眠小鼠模型。模型复制成功后, 给予相应的药物治疗。采用高架十字迷宫系统观察小鼠的焦虑样行为;通过翻正反射实验观察睡眠潜伏期和睡 眠持续时间;16sRNA 测序法分析小鼠肠道菌群组成结构;液相色谱-质谱联用（LC-MS）检测脑和结肠γ-氨 基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）、色氨酸（Trp）、5-羟色氨酸（5-HTP）、5-羟色胺（5-HT）的浓度变化;免疫组织 化学法检测结肠中闭锁小带蛋白1（ZO-1）、闭合蛋白（Occludin）的表达情况;实时荧光定量PCR 法（qRTPCR） 检测结肠组织中基因白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、ZO-1、 Occludin、Toll 样受体4（TLR4）、核因子κB（NF-κB）、肌球蛋白轻链激酶（MLCK）的表达情况;蛋白免疫印迹 法（Western Blot）检测结肠上皮组织中蛋白TLR4、NF-κB、磷酸化-核因子κB（p-NF-κB）、MLCK、肌球蛋白 轻链（MLC）和磷酸化-肌球蛋白轻链（p-MLC）表达情况。结果 与正常组小鼠比较,模型组小鼠在高架十字迷 宫中进入开臂区域的距离、在开臂区域停留的时间明显缩短（P＜0.05）;睡眠潜伏期明显延长、睡眠持续时间 明显缩短（P＜0.05）;肠道菌群的丰富度、均匀度降低（P＜0.01）;脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT 浓 度明显降低（P＜0.01）,Glu 浓度明显升高（P＜0.01）;结肠中GABA、Glu 浓度明显降低（P＜0.01）,Trp、5-HTP、 5-HT 浓度明显升高（P＜0.01）;结肠组织炎性因子IL-1β、IL-6 以及TNF-α 基因表达水平明显升高（P＜ 0.01）,ZO-1、Occludin 基因和蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）,通路中TLR4、NF-κB、MLCK 基因表达水 平明显升高（P＜0.01）,TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC 蛋白表达水平明显升高（P＜0.01）。与模型组小鼠比 较,百合地黄汤能够明显延长失眠小鼠在高架十字迷宫中进入开臂区域距离、在开臂区域停留的时间（P＜ 0.05）;明显缩短睡眠潜伏期、增加睡眠持续时间（P＜0.05）;肠道菌群的丰富度、均匀度升高（P＜0.01）;升高 脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT 浓度（P＜0.05,P＜0.01）,降低Glu 浓度（P＜0.01）;升高结肠中 GABA、Glu 浓度（P＜0.01）,降低Trp、5-HTP、5-HT 浓度（P＜0.05,P＜0.01）;下调IL-1β、IL-6、TNF-α 基因表达水平（P＜0.01）,上调ZO-1、Occludin 基因和蛋白表达水平（P＜0.01）,下调通路中TLR4、NF-κB、 MLCK 基因表达水平和TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC 蛋白表达水平（P＜0.01）。结论 百合地黄汤能够 有效治疗失眠伴肠道菌群失调症状,其作用机制可能与调节脑和肠内神经递质紊乱、下调TLR4/NF-κB/MLCK 信 号通路表达、上调紧密连接蛋白表达、降低炎症反应,进而修复肠黏膜机械屏障有关。     

丹参-三七药对治疗冠心病的药效和机制研究进展

近些年来,丹参和三七在临床上常被用来治疗冠心病如心肌缺血、动脉粥样硬化,以及与冠心病等危的糖尿病和高血压等。因此,丹参-三七药对及其组分配伍治疗冠心病的潜在机制受到广泛关注。大量文献表明丹参-三七及其组分配伍在治疗冠心病中具有调节脂质代谢和能量代谢、抗炎、抗血小板聚集、改善内皮细胞功能作用。总结了丹参-三七药对及其组分配伍在治疗冠心病中的药效和机制,以期为其后续研究提供更全面的理论依据。