抗人CD25分子单链抗体基因的构建、表达及初步鉴定

目的:构建和表达抗人CD25分子单链抗体(scFv)蛋白,并测定其生物学活性。方法:用RT-PCR方法从能分泌特异性抗CD25单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中分离纯化抗体VH和VL基因。用重叠延伸PCR方法将VH和VL拼接在一起,构建抗CD25分子scFv的基因。将scFv基因克隆至pMD18T,用限制性内切酶切以及测序鉴定。将scFv基因连接到pBAD/gⅢA表达载体,转化Top10表达菌。阳性克隆用左旋阿拉伯糖诱导4 h,SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度,竞争抑制ELISA实验检测其活性。结果:scFv基因长度约为700 bp。通过DNA序列测定和分析,构建出VL-(GGGGS)3-VH(但其中349位G突变为A,使Linker其中一位Gly→Ser)。其VH隶属于小鼠Ig重链可变区Ⅲ(C)亚类,全长351 bp,可编码117个氨基酸;其VL隶属于小鼠Igκ轻链可变区Ⅳ亚类,全长318 bp,可编码106个氨基酸。TOP10中表达的scFv抗体加上同时融合表达的两个标签6×His和C-mycMr约为31 000,结果符合scFv的Mr。竞争抑制细胞ELISA实验显示表达的scFv具有活性。结论:此scFv基因的表达产物具有一定的特异结合活性。为抗CD25 scFv的临床应用打下了基础。     

Th细胞因子在移植免疫中的研究新进展

Th细胞是T细胞的一种重要的细胞亚群 ,能分泌多种细胞因子 ,调节机体的免疫应答 ,在移植免疫中发挥重要作用。根据Th细胞分泌细胞因子种类的不同 ,可分为Th0、Th1、Th2、Th34个细胞亚群。Th0细胞被认为是其它亚群的前体细胞 ,在一定条件下可分化为Th1、Th2、Th3细胞。Th1细胞主要分泌IL 2、IFN γ、TNF α ,它主要介导细胞免疫应答。Th2细胞主要产生IL 4、IL 5、IL 6、IL 9、IL 10、IL 13,它主要介导体液免疫 ,而近来其在免疫诱导与免疫耐受中的作用正在被人们逐渐所认识。Th3细胞主要分泌高水平的TGF β和IL 1RA ,抑制免疫系统功能。本文就这些细胞因子在器官移植排斥反应和诱导免疫耐受方面发挥的重要作用做一综述     

青少年不同实际体重、感知体重对自尊水平的影响

目的 了解青少年的实际体重、感知体重并分析其与自尊水平的关系,为青少年的身心健康发展提供参考依据。方法 随机整群抽取山东省某两所中学的1 534名青少年为研究对象,采用自行编制的一般资料问卷及自尊量表对青少年进行调查,并测量青少年的身高体重。用Kappa检验、t检验、方差分析以及多重线性回归分析对数据进行统计分析。结果 9.1%的青少年消瘦,12.7%的青少年超重,10.1%的青少年肥胖。青少年实际体重水平与其感知体重水平之间缺乏一致性(Kappa=0.325,P<0.001)。实际体型为肥胖组的青少年仅有19.4%的人正确地评估了自身的体重状况,正确率低于其它三组的青少年(P<0.001)。41.3%的青少年存在体重认知偏差。男生、独生子女、家庭经济状况好,自评学习成绩好对青少年自尊水平起正向作用(P<0.01);青少年的感知体重水平,而非实际体重水平与自尊状况密切相关,感知体重水平为肥胖的青少年,其自尊水平较低(P<0.001)。结论 青少年实际体型和感知体型之间缺乏一致性,青少年的感知体重,而非实际体重与自尊水平关系密切。学校和家长应可以考虑从青少年对自身肥胖的感知方面着手,提高青少年的自尊水平,帮助其健康快乐地成长。     

大鼠心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡情况及缺血预处理对其影响

目的探讨缺血再灌注及缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响.方法制备大鼠缺血预处理(IP)、缺血再灌注损伤(I/R)模型,采用末端脱氧核苷酸转换酶介导的生物素平移缺口末端标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;同时检测心肌梗死范围.结果I/R组细胞凋亡率(43.37±4.82%)高,IP组虽然也有一定的心肌细胞凋亡率(24.53±2.95%),但较I/R组明显降低(P＜0.001).IP组心肌梗死范围较I/R组明显减小.结论心肌缺血再灌注损伤可诱发或加重心肌细胞凋亡,IP能明显减少缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的发生率,能明显减少心肌梗死范围,减轻缺血再灌注损伤;IP能减少心肌梗死范围、减轻缺血再灌注损伤的机理可能与其能明显减少心肌细胞凋亡有关.     

睾酮对雄性家兔血管损伤后内皮功能及内膜增生的影响

目的探讨雄激素睾酮对雄性家兔腹主动脉球囊损伤后内皮功能及内膜增生的影响.方法选择健康雄性新西兰白兔24只随机分成三组假去势对照组、低睾酮血症组(去势)及睾酮替代组(去势1周后加用长效十一酸睾酮单次肌注,14mg/kg),每组8只.去势10天后对所有动物行腹主动脉球囊损伤术.损伤后2周采血测血浆睾酮、血脂、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平,并截取腹主动脉进行图像分析.结果低睾酮血症组的新生内膜面积明显高于假去势对照组和睾酮替代组(P＜0.01),且血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白及MDA显著上升,NO和SOD水平明显下降,(P＜0.01或0.05).治疗组和对照组比较各数据无差异.结论生理水平的睾酮(内源或外源补充)抑制雄性家兔动脉损伤后的内膜增生,并保护内皮功能.     

肌少症与肝癌治疗预后的关系研究进展

原发性肝癌是一种常见的消化系统恶性肿瘤,其发病率高,进展迅速,预后差。由于肝癌细胞代谢消耗导致机体的营养缺失、肌肉蛋白质大量分解,病人可能会出现肌少症。近年来有研究表明,原发性肝癌病人治疗的预后与肌少症密切相关。该文将结合国内外最新研究报道,对肌少症的定义、诊断及肌少症与肝癌治疗预后的关系进行综述。     

不同检查方式对胰腺损伤的诊疗价值

胰腺损伤发病率低,但病死率及并发症发生率高,容易出现不良预后。早期诊断有助于胰腺损伤患者及时得到准确有效的治疗,从而改善预后。本文从目前国内外的研究现状出发,胰腺损伤临床表现及实验室检查缺乏特异性,并归纳综述了不同检查方式包括超声、CT、MRCP、ERCP、手术等在胰腺损伤早期诊断、损伤分级、早期治疗、疗效判断、并发症检测等阶段的价值。通过探究多种诊疗方式及新的诊疗理念,结合本中心的诊疗经验,得出一种有效的诊疗模式,以供参考。     

公民逝世后器官捐献原位肝移植后早期肝功能不全的危险因素分析

目的 观察公民逝世后器官捐献原位肝移植术后早期肝功能不全（early allograft dysfunction,EAD）的发生情况,探讨早期肝功能不全的危险因素。方法 回顾性分析2017年1月至2019年12月间我院65例行肝移植供、受体资料。根据术后情况将患者分为EAD组（n=29）及非EAD组（n=35）。对相关因素先进行单因素分析,然后将统计学差异的因素进行多因素Logistic回归模型分析。结果 65例原位肝移植患者术后早期肝功能不全的患者有29例,发生率为44.6%。单因素分析显示EAD组与非EAD组供体血清钠[（157.53±21.71）mmol/L vs（146.06±15.24）mmol/L,P=0.019]、热缺血时间[（21.6±6.5）min vs（10.6±4.3）min,P=0.016]、冷缺血时间[（8.3±1.2）h vs（5.4±1.2）h,P=0.012]、ICU住院时间[（78.1±19.5）h vs（49.7±17.6）h,P=0.007]及受体的无肝期时间[（98.3±16.3）h vs（66.0±17.6）h,P=0.037]差异均有统计学意义。多因素Logistic回归分析结果显示影响术后早期肝功能不全的独立危险因素为供体血清钠水平（OR 18.372,95%CI 1.846～24.173,P=0.019）及热缺血时间（OR 8.105,95%CI 1.513～37.205,P=0.013）。结论 供体血清钠水平及热缺血时间是公民逝世后器官原位肝移植术后EAD的独立危险因素。     

如何打造医院图书馆核心竞争力

图书馆的核心竞争力是维持图书馆存在和保障图书馆发展的、外界不易掌控的能力。医院图书馆应该不断增强自己的核心竞争力：培养创新人才，不断提升图书馆凝聚力；大力开发人力资源；开展服务创新；建设数字图书馆；服务于医院、临床、社区、患者；构建好的医院文化。     

刺五加叶皂甙预处理对供心保存的实验研究

目的观察刺五加叶皂甙 (ASS)预处理对供心保存效果的影响 ,并探讨其机制。方法随机将兔分为对照组 (Control组 ) ;缺血预处理组(IP组) ;ASS预处理组 (ASS组 ) ;格列苯脲加ASS预处理组(Gli+ASS组 ) ;格列苯脲组 (Gli组 )。先行药物预处理 ,再离体灌注 ,停搏 ,4℃保存180min,最后行再灌注。观察心功能 (±dp/dtmax及其恢复率 )、心肌磷酸肌酸激酶 (CK -mb)释放量、心肌ATP含量和能荷(EC)。结果①与Control组比较 ,IP组和ASS组的±dp/dtmax恢复率均增加 ,CK -mb均降低 ,停搏180min的ATP及EC均提高 (P<0.05或P<0.01) ;②Gli+ASS组和Gli组分别与Control组比较 ,±dp/dtmax恢复率 ,CK -mb ,ATP和EC均无明显差异 (P>0.05) ;③Gli+ASS组与ASS组比较 ,±dp/dtmax恢复率 ,CK -mb,停搏180min的ATP、EC差异明显(P<0.05)。结论ASS预处理供心可以发挥和缺血预处理相似的心脏保护作用。开放KATP 是ASS发挥药物预处理作用的重要机制之一。