不同提取方法对武当山地区二翅六道木叶果胶抗氧化性的影响

目的:研究不同提取方法对武当山地区二翅六道木叶果胶抗氧化能力的影响。方法:采用酶提取、水提取及超声波辅助提取三种方法,用2,2-联苯基-1-苦基肼基自由基(DPPH)清除率,亚铁还原能力(FRAP)实验两种方法测定其抗氧化活性,并分析不同提取方法对其抗氧化性能力的影响。结果:在45℃时,用酶法提取60 min的果胶DPPH自由基清除率和FRAP抗氧化能力最强,DPPH自由基清除率达到(63.54±5.35)%,该方法明显优于同等条件下另外两种提取方法。结论:酶提取60 min的方法更适合于武当山地区二翅六道木叶中果胶的提取。     

星点设计-效应面法优化黄芩苷两种提取工艺并比较

目的:对比回流提取法和超声提取法提取黄芩中黄芩苷的效率,并对提取工艺进行优化。方法:以黄芩苷得率为指标,在单因素试验的基础上,采用星点设计-效应面法考察乙醇浓度、液料比、提取时间对黄芩苷得率的影响。结果:回流提取法最佳提取工艺为:乙醇浓度77%、液料比10∶1、提取时间2 h、提取2次,黄芩苷得率12.55%。超声提取法最佳的提取工艺为:乙醇浓度77%、液料比22∶1、提取时间52 min、提取1次,黄芩苷得率8.32%。回流提取法的黄芩苷得率远大于超声提取法,因此回流提取法优于超声提取法。结论:回流提取法简单易操作、成本低,采用星点设计-效应面法优化的黄芩苷提取工艺稳定可行、方法简便、预测性好,可为生产工艺提供参考。     

pH响应纳米载药系统DOX@MIL-101(Fe)-NH2/HA的制备及靶向抗肿瘤作用研究

目的 制备透明质酸(hyaluronan acid，HA)修饰的纳米金属有机框架MIL-101(Fe)-NH₂载药系统，并进行体外抗肿瘤活性评价。方法 采用溶剂热法制备MIL-101(Fe)-NH₂，通过物理吸附法制备HA修饰载阿霉素的DOX@MIL-101(Fe)- NH₂/HA(DMNH)。并利用扫描电子显微镜、X射线衍射仪、氮气吸附-脱附法等对所合成材料及载药系统进行表征。采用透析法考察了载药系统的体外释药行为，并利用激光共聚焦显微镜观察HepG2细胞对其摄取情况。结果 MIL-101(Fe)-NH₂形貌为规则的正八面体，比表面积和粒径分别为1 061.45 m²·g^-1和200 nm。载药后DMNH的尺寸均一，比表面积为205.84 m²·g^-1，粒径为300 nm。MIL-101(Fe)-NH₂的最佳载药率为65.3%，根据药物释放曲线，从装有阿霉素的MIL-101(Fe)-NH₂载药体系(DMN)、DMNH中释放阿霉素显示出时间和pH依赖性。细胞摄取试验结果显示DMNH较其他组别可以运输更多的阿霉素进入HepG2细胞。细胞毒性的结果证实在相同的药物浓度下，DMNH表现出更高的肿瘤细胞杀伤效率。结论 本研究制备的DMNH载药系统结构稳定、载药量和释药效率高，同时具有优异的肿瘤细胞靶向性及pH响应释放特性，在抗肿瘤药物靶向传输方面具有应用前景。     

褪黑素对人神经胶质瘤DBTRG细胞Bmi-1基因表达的影响

目的:观察褪黑素是否抑制DBTRG细胞增殖;DBTRG细胞中Bmi-1基因的表达是否受到褪黑素的影响。方法:用不同浓度的褪黑素刺激体外培养的人神经胶质瘤细胞系DBTRG细胞,MTT法检测各组细胞的活性,显微成像系统对各组细胞进行拍照,观察细胞形态的变化;运用Real-time RT-PCR检测癌基因Bmi-1的表达水平,Western-blot检测Bmi-1的蛋白水平变化。结果:⑴使用药理浓度的褪黑素(0.5、1.0、2.0 mmol/L)可抑制DBTRG细胞增殖,且随作用时间延长抑制效果越明显。⑵未经处理的DBTRG细胞Bmi-1 mRNA水平很高,经褪黑素刺激后DBTRG细胞中Bmi-1 mRNA明显下降,并有浓度依赖。⑶经褪黑素刺激后DBTRG细胞中Bmi-1的蛋白水平明显降低。结论:褪黑素可能通过调低DBTRG细胞中癌基因Bmi-1的表达来抑制DBTRG细胞增殖。     

多指标层次分析法结合Box-Behnken响应面法优化连翘提取工艺

目的：运用层次分析法（AHP）建立一种中药多指标的综合评价方法,优选连翘最佳提取工艺。方法：采用UPLC法同时测定连翘酯苷A、连翘苷和金丝桃苷的含量,层次分析法（AHP）计算权重系数,以多指标综合评分为评价指标,以醇体积分数、料液比和提取时间为影响因素,通过Box-Behnken响应面法优选连翘最佳提取工艺。结果：连翘最佳提取工艺为醇体积分数62.56%,料液比13.9,提取时间54.77 min。结论：优化工艺方法简便、预测性良好,结果可靠、评价指标可控,可用于规范连翘的提取工艺与质量控制。     

何首乌对肿瘤脂代谢的影响＊

何首乌是常见补益类中药，也是道教医药常用补益方药。药用为其干燥块根生晒（何首乌）或炮制品（制何首乌）。本文试结合本课题组近年来建立的基于肿瘤生物学特征的抗肿瘤中药药理学筛选技术平台，对何首乌抗肿瘤脂代谢研究进行回顾。何首乌与制何首乌药理活性近似。我们发现，制何首乌醇提物可通过依赖地和非依赖地抑制脂代谢关键转录因子SREBP1而诱导肿瘤的内源性凋亡，通过对蒽醌类化合物筛选，发现主要活性成分有大黄素、大黄酸和大黄素甲醚。为进一步开发何首乌的抗癌活性和临床应用提供参考。     

基于SREBP1的制何首乌抗肝癌脂代谢蒽醌类活性成分的筛选

目的:通过筛选制何首乌抗肝癌蒽醌类活性成分,为其降脂抗癌作用及其机制研究提供实验依据。方法:MTT法检测制何首乌主要蒽醌类成分对肝癌细胞Bel-7402活力的影响;RT-qPCR及Western blot检测对肝癌细胞脂代谢关键因子SREBP1(Sterol regulatory element binding protein 1)mRNA和蛋白的影响。结果:制何首乌蒽醌类成分对肝癌细胞抑制作用排序为:大黄素>大黄酸>芦荟大黄素>大黄素甲醚>大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷>大黄酚,其中大黄素甲醚、大黄素和大黄酸抑制SREBP1 mRNA和蛋白水平的表达。结论:制何首乌中蒽醌类成分对肝癌细胞作用各异,鉴于大黄素在制首乌中含量最高,大黄素可能在制何首乌抑制肝癌脂代谢中发挥主要作用。     

HPLC法测定吊筋药中栀子苷的含量

目的：建立测定吊筋药中栀子苷含量的高效液相色谱方法。方法采用 Phenomenex LUNA-C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈∶水（12∶88）为流动相,流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长238 nm。结果栀子苷在0.049～0.980 mg/ml浓度范围内有良好线性关系（r＝0.9999）,平均加样回收率为99.1%,RSD 为1.66%。结论本方法简便,快速,准确,重复性好,可用于吊筋药中栀子苷的含量测定。     

补益地黄丸中毛蕊花糖苷的含量分析

目的建立补益地黄丸中毛蕊花糖苷含量分析的方法。方法采用FORTIS-C18柱(4.6mm×250 mm,5μm),以乙腈:0.1%醋酸溶液(16:84)为流动相,流速1.0 ml·min-1,柱温30℃,检测波长331 nm。结果毛蕊花糖苷在3.42~68.40μg·ml-1浓度范围内有良好线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率为98.2%,RSD为1.42%。结论本方法灵敏度高、准确、重复性好、专属性强,可作为控制补益地黄丸质量的重要方法。