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目的构建分泌性表达布鲁氏菌外膜蛋白OMP25基因重组卡介苗（rBCG-omp25），并免疫BALB／c小鼠，观察其免疫作用。方法利用分子生物学技术构建重组穿梭分泌载体pMV261-Ag85B-omp25．电穿孔技术导人卡介苗（BCG）。通过抗生素筛选、重组卡介苗基因组PCR扩增、测序，以及Western blot对重组卡介苗进行鉴定。分别用rBCG-omp25、BCG腹腔接种BALB／c小鼠，于免疫后第10、20、30、40和50d称重，尾部采血，用表达纯化的融合蛋白OMP25—32a检测免疫小鼠抗体的生成情况，用流式细胞仪（FCM）检测CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞百分率，并计算CD4^＋／CD8^＋T细胞比值。制作小鼠肝组织切片，HE染色观察病理学变化。结果重组卡介苗rBCG-omp25含有Ag85B-omp25序列，大小为745hp；Western blot表明rBCG-omp25可分泌表达布鲁氏菌OMP25。rBCG-omp25免疫小鼠后第20d，用Western blot检测到布鲁氏菌OMP25特异性抗体；rBCG—omp25免疫组和BCG免疫组的CD4^＋、CD8^＋T细胞百分率分别为38．68％、11．32％和、48．44％、14．01％，PBS组为33．24％、9．81％，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫后50d内rBCG-omp25组、BCG组与PBS组小鼠体重差异无统计学意义（P〉0．05）；各实验组小鼠肝组织均未见明显病理改变。结论构建的rBCG-omp25能够表达特异性蛋白OMP25。该蛋白能刺激小鼠产生特异性抗体，能刺激小鼠外周血CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞增殖。rBCG-omp25毒力弱，可作为预防布鲁氏菌病的疫苗候选株之一。 相似文献
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新疆石河子地区奶牛隐性乳房炎的调查与分析 总被引：1，自引：0，他引：1
采用LMT法对新疆石河子地区三个规模化奶牛场泌乳牛群进行了隐性乳房炎检测,共检测994头泌乳牛3976个乳区.结果表明:奶牛隐性乳房炎阳性率为81.9%,乳区阳性率为49.1%.数据分析表明,不同年龄、胎次以及有无卧床奶牛的隐性乳房炎阳性率差异显著(P<0.05),后乳区的隐性乳房炎感染率显著高于前乳区感染率(P<0.05),隐性乳房炎乳区发生数也明显影响当日产奶量(P<0.05). 相似文献
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