不同双荧光素酶方法对检测胃癌相关miRNAs靶向基因TIAM1的影响

目的:探讨不同双荧光素酶实验方法对检测胃癌相关miRNAs靶向基因TIAM1的影响。方法:从胃癌细胞系BGC823基因组中提取T-细胞淋巴瘤侵袭转移诱导基因(TIAM1)的3’非编码区(3’-UTR)片段全长,将TIAM1-3’UTR构建在2种不同的荧光素酶基因质粒上,选择8个miRNAs进行双荧光素酶实验研究。结果:miR-10b的抑制物使2种质粒的相对荧光素酶活性均升高;miR-651和miR-653的抑制物使2种质粒的相对荧光素酶活性变化完全相反;miR-10b-5p的抑制物和类似物(mimic)分别使psi-TIAM1-3’UTR的相对荧光素酶活性增高和减弱;而miR-372-3p、miR-373-3p和miR-653-5p的抑制物和类似物处理组荧光素酶活性均升高,miR-335-3p的抑制物和类似物处理组荧光素酶活性均减低。结论:进行双荧光素酶实验时psi-TIAM1-3’UTR这类2种基因位于同一质粒且不以Renilla作为内参的质粒较为合适,并发现miR-10b-5p能够直接靶向作用于TIAM1-3’UTR。     

内镜逆行胰胆管造影相关技术结合血清CEA、CA199对胆管梗阻定性诊断的研究

目的研究内镜逆行胰胆管造影（endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP）相关技术结合血清CEA、CA199对胆管梗阻定性诊断的价值。方法以2010年6月至2013年12月因胆管梗阻在中日友好医院住院并行ERCP诊治的患者为研究对象,ERCP前检测血清CEA、CA199,ERCP术中进行胆汁细胞学、胆管刷检细胞学、胆管组织活检等检查,分析上述方法对定性诊断胆管梗阻的价值。结果 155例患者包括56例良性胆管梗阻和99例恶性胆管梗阻。2组病例血清CEA、CA199比较,差异有统计学意义[2.55（1.70~3.11）ng/mL vs 3.26（1.95~7.00）ng/mL,P=0.002;46.91（13.24~115.90）U/mL vs 258.20（74.80~1000.00）U/mL,P〈0.000]。采用ROC曲线方法,选取CEA=3 ng/mL、CA199=150 U/mL为界限,结合敏感度和特异度,相对于CEA而言,CA199的定性诊断预测意义更大。胆汁细胞学、胆管刷检细胞学、胆管组织活检对胆管梗阻定性诊断的敏感度（23.0%、72.0%、69.1%）、特异度（均为100%）,胆管刷检细胞学对诊断的意义更大。结合上述技术,胆管刷检细胞学联合胆管组织活检具有更高的敏感度。血清CEA≥3 ng/mL、血清CA199≥150 U/mL的病例中,胆管刷检细胞学联合胆管组织活检对胆管梗阻定性诊断的敏感度（89.4%、83.0%）、特异度（均为100%）;对血清CEA≥3 ng/mL的胆管梗阻病例进行胆管刷检细胞学联合胆管组织活检,明确诊断的意义更大。结论 ERCP下进行胆管刷检细胞学联合胆管组织活检,结合血清CEA、CA199浓度对于胆管梗阻定性诊断具有价值。血清CEA≥3 ng/mL可能用于高危人群的术前筛选,对于基线血清CEA≥3 ng/mL的胆管梗阻患者建议考虑行胆管刷检细胞学联合胆管组织活检。     

血液透析患者C-反应蛋白与心血管疾病的关系

目的:探讨血液透析患者的慢性炎症与心血管疾病的关系.方法:对64例稳定的血液透析患者进行统计分析慢性炎症的标志物-血C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和心血管疾病(心肌梗死、心绞痛及心力衰竭)的关系.结果:64例患者中有28.1%(18/64)的患者CRP超过正常值(正常值为＜5 mg/L),平均血CRP12.61 mg/L±4.81 mg/L(5.90 mg/L～21.4 mg/L).其中有心血管疾病患者27例,无心血管疾病患者37例.心血管疾病组的CRP(7.79 mg/L±6.61 mg/L)明显高于无心血管疾病组(2.14 mg/L±3.59 mg/L)(P＜0.01).多元Logistic逐步回归分析证实:CRP是心血管疾病的独立致病因素.结论:血液透析治疗的患者确实存在慢性炎症;慢性炎症与心血管疾病有关.     

汉族人群中二氢嘧啶脱氢酶基因多态性的初步研究

目的:对中国汉族人群二氢嘧啶脱氢酶基因(DPYD)上与二氢嘧啶脱氢酶(DPD)活性相关的3个突变位点进行多态性调查.方法:采用PCR-SSCP-银染色法对122例健康汉族人DPYD的突变位点IVS14 1G→A、Exon13的A1627G和Exon11的G1156T进行筛查,并用限制性内切酶分析及DNA测序分析加以证实.结果:122例样本中有11例在Exon13的A1627G位点发生变异,限制性内切酶分析及DNA测序分析表明均为杂合型变异,其变异频率为4.5%;而IVS14 1G→A和Exon11的G1156T两个位点没有发现变异.结论:中国汉族人群DPYD的Exon13 A1627G位点具有多态性;IVS14 1G→A和Exon11的G1156T两个位点没有多态性.     

多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统的耐药作用

目的 探讨MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统（外排泵）在多重耐药铜绿假单胞菌耐药机制中的作用.方法 选取25株外科监护室分离的多重耐药铜绿假单胞菌,用实时定量RTPCR测定结构基因mexA、mexX的mRNA表达水平来判断MexAB-OprM、MexXY-OprM外排泵表达情况;用PCR分别扩增其调控基因mexR、mexZ,并对其产物测序,用Blast软件在GenBank与已知序列比较,研究其过度表达的机理.结果 25株多重耐药铜绿假单胞菌中,14株高表达MexAB-OprM系统（56%）,3株高表达MexXY-OprM系统（12%）,这3株菌同时高表达2种外排泵.在8株mexA高表达的菌株中,5株菌发生mexR基因突变,出现氨基酸替代,1株mexR提前出现终止密码子,2株菌未发现mexR基因突变.2株mexX高表达的菌株均发生基因mexZ突变,出现氨基酸替代.结论 主动外排系统MexAB-OprM、MexXY-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中过度表达,是此菌多重耐药机制之一;外排泵MexAB-OprM、MexXY-OprM高表达分别与调控基因mexR、mexZ发生变异有关,同时存在其他调控机制.     

1年以上血透患者HCV感染状况的调查

目的 研究1年以上的长期血液透析患者丙型肝炎（HCV）感染状况。方法 用ELISA法和RT－PCR法检测137例长期血透患者血清中的抗－HCV和HCVRNA,并且同时检测谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）,计算其变动率。结果 透析时间超过1年以上的137例患者中仅抗－HCV阳性8例,仅HCV－RNA阳性13例,抗－HCV与HCVRNA同时阳性者24例,感染率34．3％。且透析时间小于2年的,HCV感染率为15％,透析时间大于2年以上的其感染率增至37．6％。结论 血透患者中HCV的感染应引起重视,透析的年限越长,被HCV感染的机率就越大。酶学指证的变动率不能作为长期透析患者HCV感染的敏感指标。     

中国北方汉族人群TRIB1基因rs2235110多态性与2型糖尿病合并冠心病的相关性研究

目的探讨中国北方汉族人群TRIB1基因rs2235110多态性与2型糖尿病和2型糖尿病合并冠心病的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测了147例对照组、97例2型糖尿病组(DM组)和75例2型糖尿病合并冠心病组(DM+CHD组)TRIB1基因rs2235110多态性基因型,分析了不同组间基因型和等位基因频率分布特点,并探讨了基因多态性对糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖、血脂水平的影响。结果我国北方汉族人群rs2235110多态性AA、AG、GG基因型频率分别为0.351、0.483、0.116,A、G等位基因频率分别为0.592、0.408,与其他不同国家地区不同种族人群分布有显著差异(P<0.001)。3组研究对象间的TRIB1基因rs2235110多态性基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和DM+CHD组中AG+GG型患者HDL-C水平明显低于AA型,DM组AG+GG型患者LDL-C水平明显低于AA型,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,G等位基因不是2型糖尿病合并冠心病的危险因素(95%CI:0.579～2.552,OR=1.216,P=0.605)。结论 TRIB1基因rs2235110多态性与2型糖尿病和2型糖尿病合并冠心病无明显关联,不是我国北方地区汉族人群2型糖尿病合并冠心病发病的危险因素。     

铜绿假单胞菌亚胺培南耐药株的临床感染及其诱因分析

目的：探讨亚胺培南耐药的铜绿单胞菌临床感染情况及其危险因素。方法：对各种送检的痰、尿、分泌物等标本进行培养并采人汤稀释法对亚胺培南等８种抗生素进行最小抑菌浓度分析。结果：分离的３６．０％铜绿假单胞菌菌株呈现亚胺培南耐药,以ＩＣＵ病房、高干病房的患为主,病情较重,３１．４％的患使用过罗氏芬,２０．０％的患用过泰能。结论：随着抗生素的大量使用,越来越多的铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药,多发生于危重、     

2009-2011年北京某医院呼吸道感染患者病原谱构成分析

目的了解呼吸道感染患者的病原菌谱构成、分布、发展情况,为探讨该医院呼吸道感染致病原因,以及进一步开展医院获得性呼吸道感染的研究提供依据。方法收集某医院2009年1月-2011年1月249例呼吸道感染患者的656份标本,按照临床细菌室常规鉴定流程进行分离、培养、鉴定;收集相关患者病历信息,并加以整理和分析。结果 249例患者共检出98株病原菌,其中革兰阳性球菌30株占30.61%,以粪肠球菌为最多占9.18%;真菌27株占27.55%,以白色假丝酵母菌为最多占18.37%;革兰阴性杆菌41株占41.84%,以铜绿假单胞菌最多占12.24%;送检的标本中以鼻咽拭子、痰、血液样本为主;分离阳性的99份标本主要是痰液,占63.64%;送检患者发病时间以秋季为发病高峰,发病例数占69.0%;77例分离阳性患者的临床表现,发现同时具备咳嗽和咳痰的患者41例;发热50例;有渗出或实变的58例。结论该医院2009-2011年呼吸道感染患者的病原菌主要以革兰阴性杆菌为主,尤其以非发酵菌的比例最大,因此应加强监测以有效减少医院获得性呼吸道感染的发生。     

益保世灵对临床菌株的敏感试验

本文对益保世灵在临床分离的51株与其两种三代头孢菌素及一种一代头孢菌素作了对革兰氏阴性杆菌的敏感试验。CZX对革兰氏阴性杆菌有很强的作用,较其他头孢菌素(CTX、CPZ、CEZ)效果均优。对绿脓杆菌及表皮葡萄球菌也显示一定作用。它具有广谱抗感染的作用。