产毒性大肠杆菌（ETEC）中毒力岛分布的研究

目的 了解小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛在产毒性大肠杆菌中的分布,以便于进一步深入研究毒力岛在大肠杆菌中的结构的完整性和功能。方法 PCR扩增和原位杂交及基因序列分析,结果 在检测的93株产毒性大肠杆菌（ETEC）的毒力岛的检出率为32.25%(32/93),而且这些阳性菌株中的毒力岛大部分连接到asntRNA(天门冬氨酸tRNA0位点。结论 产毒性大肠杆菌是致病性较强的病原菌之一,而小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛在产毒性大肠杆菌中阳性率较高的分布。对于进一步研究产毒性大肠杆菌的毒力的变化和毒力的调控以及细菌毒力的进化具有重要意义。     

副溶血弧菌不耐热溶血毒素的表达与纯化

目的　表达和纯化融合表达的副溶血弧菌不耐热溶血毒素。方法　将表达载体 pET3 2a -tlh转化大肠杆菌BL2 1(λDE3) ,诱导表达副溶血弧菌不耐热溶血毒素 ,表达产物用聚丙稀酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)鉴定 ,8mmol/L的尿素溶解包涵体 ,用 6×his组氨酸蛋白质镍亲和层析树脂亲和层析纯化目的蛋白。结果　诱导表达的目的蛋白以包涵体形式存在 ,其含量约占菌体总蛋白的 10 % ,纯化获得了高纯度的融合表达的副溶血弧菌不耐热溶血毒素。结论　转化有重组质粒pET3 2a -tlh的BL2 1(λDE3)可稳定高效地表达目的蛋白 ,采用低浓度的咪唑、β -巯基乙醇和Tritonx -10 0等方法减少杂蛋白污染 ,亲和层析纯化目的蛋白 ,可获得高纯度的目的蛋白     

缺失耶尔森菌HPI irp6基因EAggEC的构建

目的 构建小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6重组自杀质粒，并应用其构建EAggEC上该基因的缺失株。方法 根据已知小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛irp6基因序列，设计PCR引物，扩增并克隆了irp6结构基因，在体外进行精确突变后，插入氯霉素抗性基因。再将含氯霉素的irp6缺失基因亚克隆入自杀质粒pKNGl0l中，构建成irp6基因重组自杀质粒pKH6，并以肠粘附聚集性大肠杆菌EAggECl7.2为出发菌株，通过体内同源重组，置换其irp6基因。结果 经接合转移和同源重组，利用蔗糖抗性筛选，pKH6上的同源序列有效的置换了EA6gECl7-2的ir6基因。结论 以小肠结肠炎耶尔森菌为靶构建的irp6基因重组自杀质粒成功的缺失了EAggECl7-2的ir6基因，获得了携带耶尔森菌强毒力岛的EAggECl7-2 irp6基因缺失株EAG6，为进一步研究其功能打下了基础。     

锐器伤与护士行为、生理、心理及环境关系的探讨

目的了解护士锐器伤的发生与护士的行为、生理、心理状况及外界环境的关系，为锐器伤的分析流行病学提供病因线索。方法采用回顾性调查法对广州市3010名护士在一个月内发生锐器伤的情况及发生锐器伤时的操作行为、生理、心理状况及工作环境情况进行调查。结果调查人群在调查期间共发生锐器伤2433次，锐器伤的发生密度为0．83次／人／月。四种针头使用后的处理行为导致了47．1％的锐器伤的发生；抽血、静脉注射、肌肉注射等与病人治疗护理密切相关的行为导致了20．1％的锐器伤的发生；掰安瓿导致了24．2％的锐器伤。42％的锐器伤是在心情急躁或紧张时发生的，74％的锐器伤是在工作紧急或繁忙时发生的。结论护士锐器伤的发生不是随机的，而与护士一定的行为、心理及工作环境有关。     

人杯状病毒检测方法及其进展

人杯状病毒常常引起人群胃肠炎的爆发与散发,随着检测方法的不断改进,其危害性愈来愈受到重视。本文对人杯状病毒的常用检测方法及其研究进展进行了综述。     

含乙型肝炎表面抗原基因重组腺相关病毒的构建及其基因的表达和功能初步研究

目的构建含乙型肝炎表面抗原(HBsAg)基因的重组腺相关病毒(rAAV)并观察目的基因的表达和功能。方法采用PCR法从PTHBV-1质粒中扩增HBsAg基因(ayw 亚型);将PCR扩增产物插入腺相关病毒(AAV)表达质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAV-HBsAg;用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中,G418筛选得到转入重组质粒并能表达目的基因的细胞系BHK-HBsAg;用具有rAAV包装功能的HSV-1- HSV1-rc/△UL2感染BHK-HBsAg,纯化后得到rAAV-HBsAg;ELISA检测重组病毒表面抗原基因在BHK-21细胞和293细胞中的表达;用rAAV-HBsAg免疫BalB/C小鼠,RIA法检测血清中表面抗体的滴度。结果ELISA法检测到混合细胞系BHK-HBsAg中HBsAg的表达量为(28.6±6.7)ng/5×106细胞;rAAV-HBsAg感染BHK-21细胞和293细胞后均能检测到HBsAg的表达,表达量随感染复数的增加而升高;rAAV-HBsAg免疫的BalB/C小鼠能产生表面抗体(抗-HBs抗体)。结论rAAV-HBsAg在体外能表达,免疫动物能诱导体液免疫反应的产生。rAAV-HBsAg有希望成为乙型肝炎候选疫苗,也可以进一步用于探索慢性乙型肝炎的免疫治疗。     

人类杯状病毒的研究进展

随着检测手段的进步和分子生物学技术的发展,人类杯状病毒(HuCVs)的重要性和危害性逐渐得以认识.本文就目前HuCVs的研究进展和进一步的研究方向作一综述.     

人类杯状病毒的研究进展

随着检测手段的进步和分子生物学技术的发展，人类杯状病毒(HuCVs)的重要性和危害性逐渐得以认识、本文就目前HuCVs的研究进展和进一步的研究方向作一综述。     

PCR-ELISA检测葡萄球菌肠毒素A

葡萄球菌肠毒素(SE)是引起食物中毒和医院感染的重要病原。金葡菌肠毒素分为7个血清型。近年来，国外学者又发现了新的血清型即SEH、SEG、SEI。近来发现，造成医院感染的耐青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)，80％以上产生肠毒素，个别医院分离诛几乎100％产生肠毒素。肠毒素的检测有生物学方法、免疫学方法、分子生物学方法等，近年来又发展基因探针的检测方法，由于放射性同位素标记探针的半衰期及放射污染特点，限制了该技术的推广应用，聚合酶链反应(PCR)在临床应用时，遇到了一些问题，     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及肠毒素的检测

目的评价乳胶结合实验检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法并检测MRSA的肠毒素.方法收集130株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过药敏试验将其分为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA),应用乳胶结合试验和基因扩增分别检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和MecA基因;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肠毒素.结果65株MecA基因扩增阳性菌株中的62株PBP2a检测阳性,63株MSSA中,MecA基因扩增及PBP2a检测全部为阴性.MRSA产肠毒素为67株.MSSA肠毒素为19株.结论乳胶结合试验是一种简便、快速、准确检测MRSA的方法,实验室应重视金黄色葡萄球菌肠毒素的检测.