普鲁卡因酰胺诱导肝癌细胞启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达

目的　研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系 ,并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTP1基因重新表达的可能性。方法　分别用 5 -杂氮 - 2′ -脱氧胞苷 (5 -Aza -CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培养 ,甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞中GSTP1基因的甲基化状况 ,RT -PCR和Westernblot分别检测细胞中GSTP1mRNA和GST -π的表达。结果　HepG2细胞在去甲基化药物处理前 ,GSTP1基因完全甲基化 ,GSTP1基因不表达 ;药物处理后 ,普鲁卡因酰胺组和 5 -Aza -CdR组GSTP1基因有表达。结论　肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化可抑制GSTP1基因表达 ,普鲁卡因酰胺与 5 -Aza -CdR一样能使启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达     

腺病毒介导的p21基因联合顺铂对胃癌的作用

目的 探讨腺病毒介导的p21基因在人胃癌细胞株SGC-7901中的表达及其对肿瘤细胞生长和荷瘤小鼠的作用。方法 采用腺病毒载体携带周期控制基因p21转染人胃癌细胞株，用流式细胞仪技术测定p21基因对SGC-7901细胞周期的影响，并与CDDP联合应用，观察p21基因和／或CDDP对SGC7901细胞株和荷瘤小鼠的作用。结果 腺病毒介导的p21基因可在胃癌细胞株SGC-7901中过度表达，使胃癌细胞株S期含量下降，抑制其生长(抑制率为80％)，并可诱导胃癌细胞的凋亡；p21基因联合CDDP作用使SGC-7901细胞G2／M含量明显下降，并可抑制荷瘤小鼠肿瘤细胞的生长，且联合作用比单一用药作用更明显。结论 腺病毒介导的p21基因可抑制人胃癌细胞株的生长，抑制瘤体的生长，结合化疗药物作用更强，为临床应用提供了依据。     

骨桥蛋白反义基因重组质粒的构建

目的 构建反义骨桥蛋白(OPN)基因重组质粒，以用于肝癌基因治疗的研究。方法 通过设计含有特定酶切位点的引物，以含有全长骨桥蛋白基因的质粒(pBlueScript—OPN)为模板，将PCR产物反向克隆至pcDNA3．1( )真核表达载体上，并经酶切鉴定及测序分析。结果重组质粒经酶切后出现913bp长的片段。测序分析结果与献报道结果完全一致。结论 反义骨桥蛋白基因表达质粒克隆成功，为恶性肿瘤的基因治疗提供了一种有效手段。     

槲皮素对胃癌细胞多药耐药的逆转作用

目的 了解槲皮素对胃癌组织P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)的逆转作用。方法 取27例胃癌手术标本，采用体外细胞培养，测定槲皮素对肿瘤细胞化疗药物敏感性的影响(H^3-TDR法)，并分析肿瘤组织P-gp、MRP1表达的关系。结果 P-gp阴性细胞5种化疗药物的敏感性均高于P-gp阳性，其中ADM组差别有显性。而槲皮素可随剂量增加，使P-gp阳性细胞化疗药物敏感性增加，其中MTX、VP-16及ADM组有显性差别。MRP1阴性细胞对5种化疗药物的敏感性均高于MRP1阳性，其中MTX、MMC和5-FU组差别有显性。槲皮素不能使两组细胞化疗敏感性有明显改变。结论 槲皮素能逆转P-gp的多药耐药，特别是对MTX、VP-16及ADM的耐药。但对MRP1引起的耐药，逆转效果不明显。     

原发性甲状旁腺功能亢进11例分析

原发性甲状旁腺功能亢进（以下简称原发性甲旁亢）是由甲状旁腺激素（PTH）分泌增加而引起的一种较少见的内分泌疾病．常因钙磷代谢紊乱导致骨髂、肾脏、消化系统病变。其临床表现复杂，常易延误诊治。2001年1月至2005年4月我院经手术和病理检查证实原发性甲旁亢11例，现报道如下。     

老年胃癌患者的临床特点和围手术期处理

回顾性分析462例70岁以上胃癌患者的临床资料。探讨老年胃癌患者的临床特点和围手术期处理。结果：老年胃癌患者具有病程较长、中晚期病例较多、病变部位及范围不同、组织学分化程度较高、并存病及术后并发症较多的特点。全组胃癌切除率为86．4％（399／462），其中根治性切除率为66．7％（308／462），术后并发症的发生率为19．7％（91／462），死亡率为2．8％（13／462）。随访患者的1年生存率为71．4％，3年生存率为49．8％，5年生存率为19．5％。提示应加强对老年胃癌患者的围手术期处理，手术治疗应兼顾根治性和安全性。以减少手术并发症的发生。     

乳腺癌淋巴结清扫新术式的临床可行性研究

目的设计并临床验证乳腺癌腋窝及锁骨下逆行淋巴结清扫法的临床可行性；同时探索保乳手术的实施策略。方法对78例女性乳腺癌住院患者（42例施行保乳手术，36例施行改良根治术）采用逆行腋窝及锁骨下淋巴结清扫法进行引流区域的淋巴结清扫。结果78例均未出现神经、血管损伤等并发症，术后恢复顺利；随访3～29个月，未见1例复发和转移，也未发现上肢疼痛、肿胀等并发症。结论逆行腋淋巴结清扫法，对各组淋巴结显露清晰，能全面掌握区域淋巴结状况，操作简便易行，适用于各种保留胸肌或保乳的乳腺癌手术。     

hTERT启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒载体的构建和制备

目的构建人端粒酶逆转录酶启动子驱动的HSV-TK基因重组腺病毒的真核表达载体,为进一步研究其在体内外实验提供依据。方法PDC312-TP质粒和PSUCMV-TK质粒经EcoR I,Sal I酶切连接构建PDC312-TP-TK,将质粒PDC312-TP-TK与含有5型腺病毒右臂的质粒Pbhge3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,经同源重组产生重组腺病毒PSG-TP-TK,PSG-TP-TK在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度。结果质粒PDC312-TP-TK经酶切鉴定正确,扩增得到的PSG-TP-TK经PCR扩增证实为hTERT启动子驱动的HSV-TK重组腺病毒,腺病毒滴度为1.9×1010pfu/ml。结论该实验为重组腺病毒PSG-TP-TK用于肿瘤的基因治疗打下了基础。     

HGF/c-Met相关信号通路在大鼠肝脏祖细胞增殖中的作用

目的探讨HGF/c-Met相关信号通路PI3K/AKT和STAT3在大鼠肝脏祖细胞增殖中的作用。方法选择Wistar大鼠,以CD90.1为标志物,通过免疫磁珠法分离正常肝脏内的祖细胞。对肝脏祖细胞进行体外培养,实验组培养液中加入Su11274,通过Western印迹观察PI3K/AKT和STAT3蛋白表达水平变化。结果实验组和对照组肝脏祖细胞PI3K、AKT蛋白表达无差异(P=0.65,P=0.73)。实验组p-PI3K蛋白第10、12、14天分别为1.36±0.14、1.28±0.15、1.14±0.14;p-AKT蛋白第10、12、14天分别为0.36±0.11、0.31±0.09、0.22±0.11,与对照组相比存在差异(P=0.033,P=0.014)。对照组和实验组肝脏祖细胞STAT3蛋白表达水平相似(P=0.73)。对照组p-STAT3蛋白第6、8、10、12、14天分别为0.22±0.11、0.18±0.06、0.13±0.05、0.13±0.07、0.13±0.05,实验组p-STAT3第6、8、10、12、14天分别为0.22±0.08、0.17±0.05、0.15±0.05、0.11±0.07、0.06±0.02,都出现下调,但实验组更为明显(P<0.001)。结论 PI3K/AKT、STAT3传导通路可能是肝脏祖细胞的增殖阶段HGF/c-Met的相关下游信号。     

B7-H5在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的研究乳腺癌中B7 H5的表达及其临床意义。方法收集2020年6月至2021年4月苏州大学附属第一医院48例乳腺癌患者的癌组织、正常乳腺组织及血液标本，进行流式细胞学分析B7 H5表达。整理并分析了相关临床数据及病理特征。使用Kaplan Meier绘图仪数据库，对B7 H5不同表达程度的乳腺癌患者进行预后分析。结果乳腺癌组织中的B7 H5表达高于正常乳腺组织（P<0001）；B7 H5的表达与患者淋巴结转移情况及乳腺癌TNM分期呈负相关。Kaplan Meier绘图仪数据库分析显示，B7 H5 mRNA高表达乳腺癌患者的生存率高于低表达者（P=0019）；B7 H5高表达组的根治性治疗到复发的时间(RFS)明显高于低表达组（P<0001）。结论B7 H5在乳腺癌组织中显著高表达，其与乳腺癌患者疾病预后相关，B7 H5高表达预示着较好的预后及生存期。