白细胞介素18单核苷酸多态性与73例喉鳞状细胞癌易感性的关联性

目的 探讨白细胞介素18(IL-18)启动子位点-137G/C和-607C/A基因多态性与山东地区汉族人群喉鳞状细胞癌(LSCC)易感性的关系。 方法 随机选取2017年5月至2019年10月就诊于临沂市人民医院的喉鳞状细胞癌患者73例为病例组,选取同期查体的健康志愿者73人为健康对照组。收集研究对象一般临床资料及外周静脉血2 mL,提取全血DNA,采用sanger测序法进行基因测序及SNP分型。所有定量资料采用Students-t检验分析,定性资料采用Pearson χ2检验或Fisher精确检验,应用卡方拟合优度检验分析健康对照组是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,采用二元Logistic回归分析计算两种单核苷酸多态性(SNP)位点以及各风险因素(年龄、吸烟、饮酒)与LSCC发病风险的关联性。 结果 与健康对照组相比,病例组中-137G/C位点变异基因型GC的基因型频率升高(34.2% vs 19.2%, P=0.040),而-607C/A 位点各基因型频率的分布在病例组和健康对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。吸烟及饮酒均会升高LSCC的发病风险(OR分别为5.710和3.116)。对基因型、年龄组、吸烟史及饮酒史4种风险因素进行调整后,吸烟者与-137G/C基因型携带者LSCC发病风险的OR值分别为4.967(95%CI=2.185~11.289, P<0.001)和2.971(95%CI=1.243~7.101, P=0.014),差异有统计学意义。 结论 IL-18启动子位点-137G/C而非-607C/A的多态性与LSCC的患病风险升高有关联性。     

Slug在胰腺癌中的表达及干扰Slug对胰腺癌转移的影响

目的 探讨Slug和E-CADHERIN(E-cadherin)表达与胰腺癌转移的关系以及干扰Slug转录因子对胰腺癌转移的影响.方法 采用免疫组化和RT-PCR技术分别检测36例胰腺癌组织中Slug、E-cadherin和mRNA表达.将肝脏高转移潜能的胰腺癌细胞株SW1990H4,分为3组:对照组、空载体质粒(shRNA-1)和转染干扰S1ug质粒(Slug-shRNA-1),观察Slug对E-cadherin mRNA表达的逆转作用,及对SW1990H4体外侵袭、运动的抑制作用.结果 胰腺癌组织中Slug高表达,而E-cadherin低表达.转移组胰腺癌组织中Slug蛋白和mRNA表达明显高于非转移组,差异分别有统计学意义(P＜0.05),而E-cadherin在转移组胰腺癌中无表达.PCR产物凝胶电泳结果显示,Slug mRNA在空白对照组SW1990H4中表达为0.985±0.016,E-cadherin mRNA表达为0.120±0.001.shRNA-1时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.973±0.014,E-cadherin mRNA表达水平分别0.160±0.001,与对照组比差异分别无统计学意义(P＞0.05).转染Slug-shRNA-1组瞬时转染48 h时,Slug mRNA的表达水平为0.554±0.011,E-cadherin mRNA表达水平为0.36±0.002,与对照组和shRNA-1组比差异分别有统计学意义(P＜0.05).SW1990H4稳定转染后,shRNA-1和Slug-shRNA-1组Slug mRNA表达水平分别为0.968±0.015,0.206±0.017,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),而E-cadherin mRNA表达水平分别为0.18±0.002,0.727±0.006,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).体外细胞运动实验表明,对照组、转染shRNA-1和SlugshRNA-1组跨膜细胞数393±28、352±24、96±13,差异有统计学意义(P＜0.01).重组细胞基底膜(Matrige1)侵袭实验显示,3组穿透基底膜细胞数分别为223±69、202±64、65±19,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Slug高表达,E-cadherin低表达与胰腺癌的转移相关.胰腺癌细胞中存在Slug mRNA与E-cadherin mRNA表达的逆转关系,抑制Slug mRNA的表达对胰腺癌细胞的侵袭和运动有抑制作用,可能为胰腺癌转移的基因治疗提供新的靶点.

Abstract：

Objective To investigate expression of slug and E-cadherin in pancreatic cancer tissues and determine the inhibitory effects of anti-Slug, an anti-sense plasmid, on the invasion of pancreatic cancer cell lines in vitro. Methods Slug and E-cadherin protein and mRNA was analyzed by IHP and RT-PCR in 36 cases of pancreatic cancer. Then anti-Slug plasmid was transfected into herin and Slug expression. The inhibitory effects of anti-sense Slug were also detected by Transwell motility assay and Matrigel invasion assay. Results The expression of Slug and mRNA in metastatic pancreatic cancer tissue was higher than that in non-metastatic tissue. E-cadherin and mRNA was lower in metastasis tissues(P＜0.05). The inverse relationships were further observed by transient transfection of anti-Slug into SW1990H4 cells. The downregulated expression of Slug and re-expression of E-cadherin were found. The Slug mRNA levels were 0.985±0.016,0.973±0.014, 0. 554±0. 011 after 0, 48 h of transfection of anti-sense Slug, and that of E-cadherin were 0.120±0.001, 0.360±0.002, 0. 727±0. 006, respectively. The diference was significant between different time points (P＜0.05). The Slug mRNA levels were 0. 206±0.017, 0.968±0.015, and that of E-cadherin were 0. 18±0.002,0.727±0.006 after stable transfection of anti-sense Slug, and control plasmid, respectively. The diference was significant (P＜0.05). The motility activity(393±28, 352±24, 96 ±13 )and the invasion activity (223 ± 69, 202 ± 64, 65 ±19) of1 antisense Slug transfectant cells were significantly decreased as compared with those of control cells (P＜0.05). Conclusions Higher expression of slug and lower expression of E-cadherin is related to the invasion and metastasis in pancreatic cancer. A reverse corelation of E-cadherin and Slug expression exists in pancreatic cancer. Slug is possibly a potential target for cancer gene therapy blocking invasion and metastasis in human pancreatic cancer.     

新型冠状病毒肺炎药物预防、诊断、治疗与出院管理临床指南计划书

本计划书为《新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的肺炎诊疗快速建议指南(标准版)》更新版的研究方案。计划书涵盖指南制定方法学、指南的目标用户、指南的目标人群、利益冲突调查与声明、临床问题和结局指标的遴选与确定、证据的检索、合成与评价、证据与推荐意见分级标准、推荐意见的形成、指南的更新,并附录指南临床问题清单、文献检索策略及利益冲突调查表。     

经前交通动脉路径行对侧大脑前动脉取栓术1例

正急性大血管闭塞性缺血性卒中发生后,在有效时间内尽早开通闭塞血管,恢复脑缺血区域的灌注,可改善大多数患者的预后。本文报道1例在治疗急性大血管闭塞性缺血性卒中患者术中,取栓装置经常规路径到位困难后,从对侧近端血管入口,经前交通动脉路径行左侧大脑前动脉取栓术。最终,靶血管再通成功,患者获得良好结果。     

p53-Bax线粒体凋亡通路DNA甲基化与胆管癌病理生物学的关系

目的探讨p53-Bax线粒体凋亡通路抑癌基因启动子区的甲基化状态与胆管癌病理生物学行为的关系。方法采用甲基化PCR检测36例胆管癌患者癌组织和癌旁组织中抑癌基因甲基化诱导静止基因（TMS1／ASC）、死亡相关蛋白激酶（DAPK）和p14启动子区甲基化状态,并对p53基因外显子5～8进行DNA测序,分析以上基因的突变与胆管癌生物学行为的关系。结果24例（66．7％）胆管癌患者癌组织中至少有1个抑癌基因启动子区存在甲基化,p14、DAPK和TMS1／ASC的甲基化率分别为25％、30．6％和36．1％。5例（13．9％）患者的癌旁组织中存在抑癌基因启动子区甲基化,其中TMS1／ASC启动子区甲基化3例（8．3％）,DAPK启动子区甲基化2例（5．6％）。DNA测序显示,22例（61．1％）胆管癌患者癌组织中p53基因外显子5～8存在突变。其中14例（38．9％）p53基因外显子突变伴1个以上抑癌基因启动子区甲基化,与胆管癌的病理类型、浸润深度、分化程度显著相关（P〈0．05）。抑癌基因非甲基化及p53突变阴性组（4例）术后1、2、3年的生存率分别为70％、43％、28％,抑癌基因甲基化及p53突变阳性组（14例）术后1、2、3年的生存率分别为28％、5％、0％,前者的生存率显著高于后者（X^2=9．060,P=0．03）。结论p53-Bax线粒体凋亡通路中抑癌基因启动子过甲基化是胆管癌组织中常见的分子事件,癌旁组织中TMS1／ASC和DAPK基因甲基化程度虽然较低,但可能对胆管癌有早期诊断意义。p53突变伴抑癌基因甲基化与胆管癌的病理生物学行为有关,趋向于较高的恶性程度和较低的生存率。     

中西医结合治疗动脉硬化闭塞症临床观察

目的：探讨中西医结合治疗动脉硬化闭塞症的作用机理。方法：观察４０例动脉硬化闭塞症（ＡＳＯ）患者治疗前后血浆内皮素（ＥＴ）、一氧化氮（ＮＯ）等血管活性因子水平，载脂蛋白及血管造影影像学的变化。结果：所有患者均存在高ＥＴ、低ＮＯ血症，存在载脂蛋白的代谢异常，存在患肢主干动脉闭塞、侧枝循环减少的现象；治疗后３０例显效患者血浆ＥＴ、ＮＯ等血管活性因子、载脂蛋白水平均恢复正常（与治疗前比较，Ｐ〈０．０１），     

辨体治疗格雷夫斯病伴肝损害25例临床观察

目的:研究按中医体质辨识理论拟定的龟芍方对格雷夫斯病(Graves病)伴肝损害甲状腺功能及肝功能的改善作用与机制。方法:选取Graves病伴肝损害患者50例,随机分成两组,治疗组25例给予龟芍方加甲巯咪唑片治疗,对照组25例采用复合磷酸酯酶肠溶片加甲巯咪唑片治疗,疗程均为12周。观察两组治疗前后游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素受体抗体(TRAb)、谷丙转氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-17F(IL-17F)、白细胞介素-23(IL-23)的变化。结果:经12周治疗,两组患者各异常指标较前均有改善。其中治疗组显效7例,有效15例,无效3例,总有效率为88.0%;对照组中显效3例,有效13例,无效9例,总有效率64.0%;两组有效率比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组经12周治疗后各项指标均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:龟芍方对Graves病伴肝损害患者的甲状腺功能及肝功能有改善作用,其机制与调节细胞免疫有关。     

大鼠急性血瘀证模型造模方法的网状Meta分析

目的：采用网状Meta分析评价不同急性血瘀证模型造模方法的效果,为中医实验研究急性血瘀证动物模型的制备提供循证依据。方法：检索中国期刊全文数据库（CNKI）、中国学术期刊数据库（CSPD）、中文科技期刊数据库（CCD）中有关急性血瘀证模型的建模方法,应用Stata软件进行网状Meta分析。结果：最终纳入32项研究,共纳入9种造模方案。各项指标最优前3位概率排序分别为：1）全血黏度：1 S-1切变率右旋糖酐＞高脂＞氢化可的松+肾上腺素,10 S-1切变率冰水浴＞肾上腺素＞高脂+力竭游泳,30 S-1切变率多因素刺激＞右旋糖酐＞肾上腺素,60 S-1切变率多因素刺激＞右旋糖酐＞肾上腺素,150 S-1切变率肾上腺素＞冰水浴＞高脂+力竭游泳,200 S-1切变率右旋糖酐＞氢化可的松+肾上腺素＞角叉莱胶+内毒素;2）血浆黏度：右旋糖酐＞多因素刺激＞肾上腺素;3）红细胞聚集指数：冰水浴＞多因素刺激＞高脂+力竭游泳。受纳入研究质量和数量的限制,所得结论仍待进一步验证。结论：右旋糖酐、冰水浴、多因素刺激、肾上腺素造模效果更显著。     

小组协作式分层教学在重症医学科规范化培训中的效果研究

目的 探讨小组协作式分层教学在重症医学科规范化培训中的效果。方法 将2020年6月至2020年11月进入青岛大学附属医院重症医学科进行规范化培训的专业学位研究生71人,随机分为试验组和对照组,统一培训1周后行入科考试。试验组采取小组协作式分层教学,对照组采用传统教学。2个月后结束培训,分别行临床演练评估量表（mini-clinical evaluation exercise,Mini-CEX）考核、岗位胜任力评估、出科考试及教学满意度评价。采用SPSS 25.0进行t检验及卡方检验。结果 在Mini-CEX考核中,试验组在问诊技巧[（7.42±0.60）分 vs. （7.00±0.55）分]、体格检查[（7.47±0.56）分 vs. （6.94±0.24）分]、沟通技巧[（7.56±0.50）分 vs.（7.24±0.49）分]、临床辩证思维[（7.53±0.56）分vs.（7.03±0.39）分]、临床诊断[（7.50±0.51）分 vs.（6.90±0.42）分]、能力及效率[（7.58±0.50）分 vs. （7.15±0.44）分]、整体临床能力[（7.64±0.49）分 vs. （7.17±0.39）分]等方面的成绩均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。在岗位胜任力评估中,试验组在临床基本能力[（89.15±9.12）分 vs. （86.24±10.23）分]、医学知识运用[（48.37±5.87）分 vs. （46.98±3.68）分]、团队合作能力[（48.10±3.55）分 vs. （45.96±4.83）分]、信息与管理[（68.52±7.61）分 vs. （66.38±5.54）分]、学术研究能力[（22.18±0.95）分vs. （20.87±1.22）分]等方面评估结果均高于对照组,差异有统计学意义（均P<0.05）。在出科成绩、教学满意度方面,试验组高于对照组,差异有统计学意义（均P<0.05）。结论 小组协作式分层教学可以提高重症医学科研究生培养质量,提高临床综合能力和岗位胜任力。     

注意缺陷多动障碍共患对立违抗障碍患儿行为与父母间冲突的相关性研究

目的分析注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)共患对立违抗障碍(oppositional defiant disorder,ODD)患儿行为与父母间冲突的关系。方法选择符合美国《精神障碍诊断与统计手册(第Ⅳ版)》(DSM-Ⅳ)中ADHD和诊断标准的门诊儿童,ADHD伴ODD者33例(占总数的55%)为共患组,单纯ADHD者27例(占总数的45%)为ADHD组。由儿童填写儿童对婚姻冲突的感知量表(Children's Perception of Interparental Conflict Scale,CPIC),其父母填写Achenbach儿童行为量表(Achenbach's Child Behavior Checklist,CBCL)。对数据结果进行t检验、相关分析及Logistic回归分析。结果 1)共患组在CPIC各因子及总分得分均显著高于ADHD组(P0.05),焦虑/抑郁问题、违纪行为、攻击行为、外化性行为问题的得分及行为问题总分显著高于ADHD组(P0.05);2)相关分析发现,共患组儿童社交问题、注意问题、违纪行为、攻击行为、外化性行为问题与感知到的婚姻冲突存在相关性;3)Logistic回归分析显示,保留在模型中的变量有自我归因(P=0.005,OR=1.489),应对效能(P=0.026,OR=1.329),冲突频率(P=0.019,OR=1.254)。结论共患组儿童有更多的行为问题,可能与父母婚姻间冲突有关,儿童对婚姻冲突的感知中的自我归因、应对效能、冲突频率增加了ADHD共发ODD的危险,提示对共患有ODD、ADHD的儿童进行治疗时,不仅要注意调节其父母关系,更要引导儿童正确看待婚姻冲突。