慢病毒携带shRNA对宫颈癌细胞中HPV16型E6表达的抑制作用

目的研究慢病毒携带的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA, shRNA)对宫颈癌Caski细胞中人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)16型E6表达的抑制作用.方法将靶向HPV16型E6的shRNA表达序列克隆到改建的慢病毒表达载体PLL3.7中,经限制性酶切鉴定和测序后,与3种包装质粒混合,以Lipofectamine 2000包裹后转染293FT细胞,72 h后收取含病毒的上清液并感染宫颈癌Caski细胞,感染48 h后加入G418筛选阳性克隆.每天对阳性细胞克隆进行细胞计数;提取细胞总mRNA,进行RT-PCR反应.结果与对照组相比HPV16型E6的表达降低70%,宫颈癌Caski细胞生长速度减慢50%.结论慢病毒携带的短发夹状干扰RNA能干扰宫颈癌细胞中HPV16型E6的表达并有抑制癌细胞生长的作用.     

脐血乳酸水平及胎心监护图形预测胎儿窘迫的价值

目的　探讨新生儿脐动脉血乳酸水平及胎心监护图形预测胎儿窘迫的价值。方法　测定 73例胎心监护图形为不良图形 (胎心基线异常、重度变异减速、轻度变异减速、心动过速 )的新生儿(病例组 )和 118例产前无胎儿窘迫征象 ,出生后 1分钟Apgar评分≥ 9分的新生儿 (对照组 )出生后脐动脉血乳酸水平。结果　病例组中产钳助产率明显高于对照组 (P <0 0 1) ,顺产率低于对照组 (P<0 0 1)。病例组中 ,胎心重度变异减速多发于第二产程 ;胎心基线异常的新生儿Apgar评分≤ 7分的发生率高于重度变异减速、轻度变异减速、心动过速的新生儿 (P <0 0 5 )。病例组中 ,胎心基线异常者脐动脉血乳酸水平为 (4 5 5± 0 2 3 )mmol/L ;重度变异减速者为 (3 84± 0 40 )mmol/L ,出现以上两种图形的新生儿脐动脉血乳酸水平均明显高于对照组 (P <0 0 1)。轻度变异减速者脐动脉血乳酸水平为 (2 63± 0 3 2 )mmol/L ;心动过速者脐动脉血乳酸水平为 (2 5 5± 0 46)mmol/L。并且轻度变异减速与心动过速者脐动脉血乳酸水平与对照组比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　测定新生儿脐动脉血乳酸水平是一种有效、准确的诊断胎儿窘迫的方法。胎心基线异常、重度变异减速与胎儿窘迫的发生密切相关 ;轻度变异减速、心动过速与胎     

高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ、E-cadherin和α-catenin在卵巢上皮肿瘤组织和不同转移能力的卵巢癌细胞中的表达

目的:检测高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ(Golgiα-mannosidaseⅡ,GMⅡ)、E-cadherin和α-catenin在不同卵巢上皮肿瘤组织和不同转移能力的卵巢癌细胞中的表达。方法:运用免疫组织化学法检测46例卵巢上皮恶性肿瘤(其中有大网膜或淋巴结转移者27例)、15例卵巢上皮交界性肿瘤及12例卵巢上皮良性肿瘤组织中GMⅡ、E-cadherin和α-catenin的表达情况。体外培养卵巢癌A2780、SKOV-3和HO-8910细胞,分别应用RT-PCR、免疫荧光和蛋白质印迹法检测GMⅡ、E-cadherin和α-catenin mRNA和蛋白的表达情况。结果:在卵巢上皮恶性肿瘤中GMⅡ的阳性表达率(87%)和E-cadherin、α-catenin的异常表达率(80%和72%)明显高于卵巢上皮交界性肿瘤(60%、20%和40%)和卵巢上皮良性肿瘤(42%、0%和17%),且有转移患者肿瘤组织中的阳性表达率和异常表达率明显高于无转移者(P<0.05)。A2780、SKOV-3和HO-8910细胞中GMⅡ荧光表达强度逐渐增强,E-cadherin和α-catenin荧光表达强度逐渐减弱。在A2780、SKOV-3、HO-8910中,GMⅡmRNA和蛋白表达水平逐渐增加,而E-cadherin和α-catenin mRNA及蛋白表达水平则逐渐减弱,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GMⅡ、E-cadherin和α-catenin可能在卵巢癌的恶性进展中发挥重要作用,GMⅡ有望成为卵巢癌预后的标志和治疗靶点。     

肝内胆汁淤积症孕鼠的胎鼠心率功率谱变化与猝死的关系

应用皮下注射雌、孕激素建立妊娠肝内胆汁淤积(ICP)大鼠模型,通过Powerlab生物信号处理系统Chart5软件引导妊娠第21d胎鼠宫内心电图,分析胎鼠心率变异性(HRV)频域指标低频带(LF)、高频带(HF)及LF/HF值,探讨肝内胆汁淤积症孕鼠的胎鼠心脏自主神经系统变化与猝死的关系。结果显示,(1)ICP模型组孕鼠血清总胆汁酸水平为(78.5±4.5)μmol/L,正常对照组为(24.6±3.6)μmol/L,两组差异有极显著性;P<0.01;(2)ICP模型组实验开始时胎鼠心电图显示正常,持续观察29.3±6.4min后出现胎鼠心律不齐,继续观察23.5±4.6min后胎鼠死亡,而正常对照组持续观察90min,胎鼠心电图均显示正常;(3)ICP模型组胎鼠出现心律失常前20min内HRV频域指标LF和LF/HF分别为48.45±4.11nu和0.99±0.14,高于正常对照组胎鼠33.87±4.31nu和0.61±0.10,两组差异均有显著性,均为P<0.01;(4)ICP模型组胎鼠猝死前15min内LF及LF/HF随着死亡时间的濒临而呈进行性上升趋势。研究表明,孕鼠肝内胆汁淤积症时胎鼠死亡前出现短暂的心律失常阶段;ICP孕鼠的胎鼠猝死可能与高水平胆汁酸诱导胎鼠心脏自主神经活动失衡有关;HRV分析技术对于胎儿宫内安危的监护将会有很好的应用前景。     

灵芝多糖和当归多糖促进人外周血T淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ

目的探讨中药灵芝多糖和当归多糖对人外周血活化T淋巴细胞的免疫调节作用。方法分离健康人外周血T淋巴细胞并分为空白对照组、灵芝多糖组和当归多糖组,免疫荧光观察各组T细胞PI3K和Caspase-3蛋白的表达;MTT法检测培养72 h后各组T细胞的增殖水平;流式细胞术分析各组T细胞凋亡率和细胞周期变化;ELISA检测各组T细胞培养上清液的IFN-γ含量。结果灵芝多糖组和当归多糖组T细胞均表达PI3K,细胞增殖OD值均明显高于空白对照组(P<0.01,P<0.05);灵芝多糖组T细胞Caspase-3蛋白表达的平均光密度值明显低于空白对照组(P<0.05),T细胞凋亡率也低于空白对照组,分别为18.23%和29.74%;灵芝多糖组和当归多糖组T细胞培养上清液IFN-γ的含量明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.05)。结论灵芝多糖和当归多糖均明显促进外周血T淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ,灵芝多糖还能下调Caspase-3蛋白表达并抑制T淋巴细胞凋亡。     

阴道子宫内膜间质肉瘤5年后局部复发病例临床病理观察（病例报道+文献复习）

目的：研究阴道子宫内膜间质肉瘤局部复发的临床病理特征、免疫表型、诊断及鉴别诊断。方法：回顾分析1例原发于阴道的低级别子宫内膜间质肉瘤,随访5年后局部复发病例临床病理特征,并结合国内外文献复习。结果：本例原发于阴道的低级别子宫内膜间质肉瘤5年后局部复发的组织学形态和免疫组化与5年前的一致。国内外文献报道原发于阴道的子宫内膜间质肉瘤极少,迄今为止,中英文报道了14例,未见局部复发病例报道。结论：原发于阴道的子宫内膜间质肉瘤虽为低级别子宫内膜间质肉瘤,但肿瘤在切除术后数年仍可复发,建议对该病患者进行长期随访。     

基于超星网络教学平台的BOPPPS在妇产科教学中的应用：以《妊娠期妇女的护理》为例

本文以重庆医科大学妇产科BOPPPS[导入（bridge in）、学习目标（objective）、前测（pre-assessment）、参与式学习（participatory learning）、后测（post-assessment）、总结（summary）]模型与超星网络教学平台相结合实验教学为例,详细介绍了该混合型教学模式遵循的导入、学习目标、前测、参与式学习、后测、总结6大教学模块,结合“过程性评价+奖励性评价+终结性评价”三合一考核方式,全面综合评价学生学习效果。实践证明,该模式可以提高学生的学习自主性,锻炼沟通能力,培养团队精神,促进临床思维建设,提高教学效果和课堂教学质量。     

人子宫颈癌异常表达程序性死亡配体-1并促CD4+ T和CD8+ T细胞凋亡

目的：探讨程序性死亡配体－１（Programmed death ligand-1,PD-L1）在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内CD4+ T和CD8+ T细胞浸润的相关性,体外实验观察重组人PD-L1蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞凋亡的影响。方法：采用免疫组化SP法检测PD-L1在10例正常人宫颈组织和67例宫颈癌组织中的表达以及死亡受体-1（Programmed death receptor-1,PD-1）在宫颈癌内浸润淋巴细胞的表达;TUNEL法检测肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡;免疫荧光分析宫颈癌内浸润的CD4+ T和CD8+ T淋巴细胞数量;流式细胞术分析PD-L1促进宫颈癌患者外周血活化CD4+ T和CD8+ T细胞凋亡情况。结果：正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈癌PD-L1的表达率为70%（47/67）。部分宫颈癌内浸润的淋巴细胞表达PD-1,且淋巴细胞存在凋亡现象。PD-L1阳性宫颈癌肿瘤内浸润的CD8+ T细胞数量明显减少（P＜0.05）。体外实验发现PD-L1与健康人或宫颈癌患者外周血活化T细胞混合培养48 h后,T细胞凋亡率明显高于空白组,２组平均凋亡率分别为（32.8±1.4）%、（38.3±1.5）%（P＜0.05）和（27.7±1.3）%、（30.9±1.9）%（P＜0.05）;抗PD-1抗体使PD-L1诱导的T细胞凋亡率下降,分别为（29.8±1.6）%和（31.6±1.4）%（P >0.05）。PD-L1对人外周血活化CD4+ T和CD8+ T细胞均有促凋亡作用。结论：人子宫颈癌异常表达PD-L1与肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡及CD8+ T细胞数量减少有关。PD-L1经PD-1促进活化的CD4+ T和CD8+ T细胞凋亡。     

孕大鼠和胎鼠心脏系统混沌特征分析

应用计算机化大鼠心电信号采集和处理系统,引导妊娠第21dSD大鼠和胚胎宫内心电,记录母胎鼠心动周期信号混沌图形参数和数值参数,探讨正常妊娠大鼠母胎心脏系统混沌特征,分析母胎鼠自主神经系统发育的差异性。结果显示,(1)正常胎鼠与孕鼠比较,频率和电压较低,差异均有显著性(P<0.01);(2)正常胎鼠和孕鼠心动周期信号功率谱具有类似于人的心动周期信号功率谱三峰特征;正常胎鼠和孕鼠比较,第二峰、第三峰明显较低;(3)正常胎鼠与孕鼠比较,相对分散度、李雅普诺夫指数和分维数均显著较低,差异均有显著性(P<0.01)。本研究表明,正常胎鼠心动周期信号变化的复杂性低于孕鼠,胎鼠心脏混沌程度低于孕鼠,胎鼠自主神经系统发育尚不成熟。     

妇产科双语教学带给我们的思考

妇产科双语教学是21世纪对妇产科教学提出的一个新要求，妇产科双语教学的授课对象是医学本科四年级学生。该通过分析妇产科使用双语临床教学所存在的利弊问题，提出妇产科临床教学中提高教学质量的方法，并探讨在妇产科学双语教学中，应以桥梁学科的双语教学为基础，强化学生的医学专业英语，加强对妇产科学教师的培训，提高教师的教学水平和英水平，课前教与学双方都需要充分准备，最终确保妇产科双语教学的顺利实施和良好的教学效果。